内质网应激在邻苯二甲酸二丁酯加重小鼠过敏性哮喘中的作用

[背景]邻苯二甲酸二丁酯(DBP)是使用最为普遍的塑化剂之一,有证据表明接触DBP与过敏性哮喘患病风险增加密切相关。然而,DBP暴露促发过敏性哮喘的作用机制还获悉更多未明确,亟待研究。[目的]探讨内质网应激在邻苯二甲酸二丁酯加重小鼠过敏性哮喘中的作用。[方法] 32只雄性C57BL/6J小鼠随机分为4组,每组8只:对照组、哮喘模型组[卵清蛋白(OVA)]、OVA+40 mg·kg-1 DBP暴露组(OVA+DBP)和OVA+40 mg·kg-1 DBP+50 mg·kg-1 4-苯基丁酸(4-PBA)组(OVA+DBP+4-PBA)。对照组在第21、35、42、49天进行腹腔注射生理盐水,第54~60天进行每天30 min的无菌生理盐水雾化。哮喘模型组小鼠分别于第21、35、42、49天腹腔注射0.3 mLOVA,第54~60天使用1%OVA溶液雾化激发建立过敏性哮喘小鼠模型。OVA+DNVP-TNKS656说明书BP组采用与OVA组相同处理enterovirus infection方式构建哮喘模型,并从第1~53天口服暴露40 mg·kg-1DBP,第54~60天进行1%OVA溶液雾化激发。为验证内质网应激在DBP加重过敏性哮喘中的作用,在OVA+DBP组处理的基础上第1~53天每两天腹腔注射50 mg·kg-1的4-PBA作为OVA+DBP+4-PBA组。通过苏木精和伊红(HE)和过碘酸雪夫(PAS)染色观察肺组织气道重塑、炎症细胞浸润以及气道黏液增生等病理改变;使用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清免疫球蛋白E(T-IgE)和卵清蛋白特异性免疫球蛋白E(OVA-IgE),以及肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素(IL)-4、IL-5、IL-13和IL-17A含量;通过免疫组织化学检测肺组织内质网应激相关蛋白肌醇需求酶1α(IRE1α)、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)和激活转录因子6(ATF6)表达水平。[结果]与对照组小鼠相比,OVA组小鼠表现出了明显的过敏性哮喘样症状,包括肺组织炎细胞浸润和炎症因子增多,气道重塑和黏液增生等。与OVA组小鼠相比,OVA+DBP组小鼠出现更严重的病理学改变且血清T-IgE和OVA-IgE水平进一步升高(P <0.01),BALF中Th2(IL-4、IL-5、IL-13)和Th17(IL-17A)细胞因子水平增加(P <0.01);内质...