基于体外模拟消化探讨枸杞果渣蛋白酶解液对血管紧张素转换酶抑制活性的影响

目的枸杞果渣作为枸杞深加工的主要待利用产品是目前研究的热点之一,本研究探讨以”宁杞1号”头茬果和夏果、”宁杞7号”夏果及”宁杞7号”夏果果渣为原料制备的枸杞蛋白酶解液的血管紧张素转换酶(Angiotensin-converting enzyme, ACE)抑制效果,同时评价体外模拟胃肠消化对枸杞蛋白酶解液ACE抑制效果稳定性的影响,为宁夏枸杞及枸杞果渣的进一步开发和利用提供一定的理论依据。方Biosafety protection法将”宁杞1号”头茬果和夏果、”宁杞7号”夏果及”宁杞7号”夏果果渣用粉碎机粉碎,过80目筛子,分别制成4种80目过筛粉,同时制备”宁杞7号”夏果果渣的超微粉。碱提酸沉法提取5种枸杞粉样本中的枸杞蛋白后用中性蛋白酶酶解,制备枸杞蛋白酶解液,并用冻干机将枸杞蛋白酶解液冻干,制备成酶解液冻干粉,将冻干粉分别配置成5种10mg/ml枸杞蛋白酶解物溶液,同时配置10mg/ml的卡托普利溶液作为对照。双缩脲法测定5种枸杞酶解物冻干粉溶液的多肽含量;FAPGG法测定ACE抑制率;根据INFOGEST的静态体外模拟方案模拟胃肠道消化,分别测定胃、肠消化后的ACE抑制率,评估其抵抗胃肠道酶降解的能力。结果各组样品多肽含量为3.94-6.08 mg/mL,”宁杞1号”夏果组多肽含量最高(6.08±0.03 mg/mL),”宁杞7号”夏果组(5.99±0.08 mg/mL)和”宁杞1号”夏果组(6.08±0.03 mg/mL)的多肽含量相近(P>0.05),但较”宁杞1号”头茬组(3.94±0.01mg/mL)分别显著增加2.05 mg/mL和2.14 mg/mL(P<0.05),"宁杞7号"夏果果渣组(4.48±0.01 mg/mL)蛋白酶解物多肽含量较"宁杞1号"头茬组高0.54 mg/mL(P<0.05),但较"宁杞7号"夏果组减少1.51 mg/mL(P<0.05),"宁杞7号"夏果果渣超微粉组(5.27±0.01 mg/mL)较"宁杞7号"夏果果渣组提高0.79 mg/mL(P<0.05);各组样品的平均ACE抑制率为67.33±7.63%,均低于10 mg/mL卡托普利的ACE抑制率(82.27±1.10%)(P<0.05),"宁杞1号"头茬组(55.81±1.93%寻找更多)的ACE抑制率较”宁杞1号”夏果组(69.91±3.51%)低14.10%(P<0.05),"宁杞7号"夏果组(71.37±1.21%)与"宁杞1号"夏果组的ACE抑制率无显著差异(P>0.05),进一步比较枸杞果渣的ACE抑制效果发现,”宁杞7号”夏果果渣组(64.08±1.56%)的ACE抑制率较”宁杞7号”夏果组降低7.29%(P<0.05),但由"宁杞7号"夏果果渣超微粉制得的蛋白酶解液ACE抑制率显著高于其余各组(75.50±1.66%)GSK J4体内实验剂量(P<0.05);与消化前相比,模拟胃消化后ACE抑制率降低,"宁杞7号"夏果果渣组、"宁杞7号"夏果果渣超微粉组、"宁杞7号"夏果组、"宁杞1号"头茬组、"宁杞1号"夏果组分别降低6.80%、3.80%、2.06%、1.88%、2.92%,继续进行模拟肠消化,其ACE抑制率均升高(较胃消化产物分别升高9.37%、5.94%、5.93%、2.29%、5.12%),且均高于消化前的ACE抑制率,表明枸杞蛋白酶解液对胃肠道酶的消化作用具有良好的稳定性。结论 5种枸杞蛋白酶解液均具有较高的ACE抑制活性,且酶解液中的多肽在模拟胃肠道消化过程中对胃蛋白酶和胰酶的降解具有良好的抗性。枸杞果渣超微粉制备的蛋白酶解液ACE抑制率最高。