【背景】猪水肿病大肠杆菌引发的疾病造成了很大的危害，但现有培养基存在培养密度低的问题。【目的】研制出高抗原活性猪水肿病大肠杆菌疫苗培养基。【方法】以常用的市售猪水肿培养基为对照，通过单因素试验、爬坡试验(Plackett-Burman, PB)、响应面(Box-Behnken, BB)试验对猪水肿培养基进行响应面优化，得到猪水肿培养基最优配方。以响应面试验得到的培养基培养猪水肿病大肠杆菌genetics services，评价不同培养时间点菌株的抗原活性，制作灭活疫苗，进行动物免疫保护试验。【结果】对研制的培养基进行扩大培养验证，发现扩大培养得到的菌株活菌数可达5×109CFU/mL以上，约为对照组的2倍。制备的灭活疫苗效价可达1:140 000，并在AMG510溶解度9 h时抗原蛋白效价达到最高。【结论】本研究研制出的疫苗培养基显著提高了猪大肠杆菌菌体密度，并可提高菌体抗原活性，为猪水肿病灭活疫苗的制ABT-263浓度备提供了技术指引。