利拉鲁肽是一类多肽药物,现临床上主要用于治疗2型糖尿病和减肥。其上市制剂为皮下注射制剂,为提高患者用药顺应性,本课题将其制备为鼻用原位凝胶。目的:制备鼻腔给药的利拉鲁肽原位凝胶,减少药物在制备中的损失,同时规避注射给药GSK1120212采购方式,提高顺应性;采用不同的凝胶递送,增加药物生物利用度,提高药效。对制备得到的凝胶进行质量评价、稳定性试验、溶蚀考察以及药效学评价。方法:(1)通过对流动相中的缓冲盐离子强度和比例以及梯度洗脱条件的筛选,建立了高效液相色谱法用于测定利拉鲁肽的含量。(2)以胶凝温度为主要指标,单因素考察不同温敏凝胶基质的用量比例,采用CCD响应面法优化处方工艺,并对温敏凝胶进行质量评价、稳定性试验;采用无膜溶出法探究其体外释药规律。(3)以p H值和粘度为指标,对p H敏感凝胶进行初步筛选后,采用正交实验进行优化得到最佳处方;同上进行药剂学考察。(4)以SD雄性大鼠为实验动物,以皮下注射利拉鲁肽溶液为阳性对照,鼻腔给予生理盐水为阴性对照,研究利拉鲁肽溶液和两种原位凝胶鼻腔给药后血糖下降百分比变化,计算相对生物利用度。(5)Digital Biomarkers通过小鼠鼻腔成像观察鼻腔滞留及荧光强度。结果:(1)利拉鲁肽原位凝胶含量测定方法的方法学验证结果表明,本文所建立的含量测定方法准确灵敏可靠,可用于利拉鲁肽原位凝胶含量的测定。(2)温敏凝胶的制备:取P407 2.54 g,P188 0.49 g,PVP 0.1 g后加入PBS溶液至10m L,4℃冷藏溶胀,再加入质量浓度5%苯扎溴铵20μL和8.00 mg利拉鲁肽,分散均匀即得。p H敏感凝胶的制备如下:分别配制5 m L 0.5%的卡波姆溶液和0.4%的HPMC溶液,室温下溶胀24小时后,混合均匀。随后分散入8.00 mg利拉鲁肽搅拌均匀,最后加入质量浓度5%的苯扎溴铵20μL。采用无膜溶出法研究了利拉鲁肽原位凝胶的体外溶蚀和释药特性。发现凝胶的溶蚀与释放均符合零级动力学方程(Zero-level kinetic model)(3)大鼠药效学显示,利拉鲁肽温敏凝胶(Lrg-TS-ISG,Liraglutide Temperature Sensitive In Situ Gel)生物利用度更高,F_(12)为(4.19±1.0)%,F_(24)为(8.98±2.75)%,与生理盐水组相比较具有显著性差异,利拉鲁肽p H敏感凝胶(Lrg-p H-ISG,Liraglutide p H Sensitive In Situ Gel)与生理盐水组相比没有显著差异。(4)鼻腔荧光显示,经凝胶递送可增强鼻腔滞留,其中,Lrg-TS-ISG滞留效果更明显。结论:利拉鲁肽原位凝胶的制备工艺简单。Lrg-TS-ISselleckchem Smoothened AgonistG相较于Lrg-p H-ISG更加稳定,易于存放。用于鼻腔给药后,延长滞留时间,顺应性得以提高,Lrg-TS-ISG生物利用度更高。