目的:构建搭载紫杉醇的免疫相容性的弹性多肽(ABD-iTEPA)纳米颗粒靶向给药系统,通过体外抑制乳腺癌细胞MCF-7增殖,评估纳米药物HSA-ABD-iselleckchem BelumosudilTEPA-PTX抑制乳腺癌细胞效果。方法:通过本实验室经基因工程技术设计合成的cDNA,经转染,转录及翻译制备免疫相容性的弹性多肽(albumin-binding domain immune-toleran elastin-like polypeptide,ABD-iTEPA),并与改造合成的紫杉MDV3100浓度醇(PTX-LEV-EMCH)通过巯基连接自组装形成纳米药物颗粒(albumin-binding domain immune-toleran elastin-like polypeptide nano-particles,ABD-iTEPA-PTX NPs);利用亲水端的白蛋白结构域(albumin-binding domain,ABD)与人白蛋白(human serum albumin,HSA)结合形成纳米药物(human serum albumin albumin-binding domain immune-toleran elastin-like polypeptide PTX-LEV-EMCH nano-particles,HSA-ABD-iTEPA-PTX NPs)。通过Nano Brook Omni对纳米药物粒径大小和Zeta电势测定以及透射电镜进行鉴定,通过Nano Measurer随机计数TEM图像中纳米药物的粒径分布对其进行结构确证。利用紫外分光光度仪建立紫杉醇标准曲线并检测纳米药物中紫杉醇的包封率及上载率。通过模拟正常人体组织内环境及酸性肿瘤周围组织环境的差异对载药纳米粒进行药物体外酸性释放检测。以体外培养MCF-7乳腺癌细胞为模型,采用CCK-8法考察ABD-iTEPA-PTX NPs体外抑制乳腺癌细胞MCF-7增殖,评估纳米药物HSA-ABD-iTEPA-PTX抑制乳腺癌细胞效果。结果:编码纳米载体多肽的cDNA经DH5α感受态细胞转染后提取质粒测量OD_(260)/OD_(280)为2.073±0.043浓度为104.05 ug/m L±9.95 ug/m L;提取质粒测定序列与原质粒序列比对重复性>98%,经BL21感受态细胞表达后每升TB培养液可提取139.17 mg±7.42 mg载体多肽。合成的纳米药物ABD-iTEPA-PTX NPs粒径大小为87.09 nm±7.63 nm(PDI:0.20);其携带电荷电位未显示;HSA-ABD-iTEPA-PTX NPs粒径大小为117.24 nm±5.42 nm(PDI:0.28),其携带电荷电位为-21.26 m V±1.37 m V。电镜下的HSA-ABD-iTEPA-PTX NPs呈典型椭圆球状的形态。建立的紫杉醇标准曲线为:Y=0.2173 X+0.0064(R2=0.9999),在1.875～7.5μg/m L浓度范围内,线性关系良好。ABD-iTEPA-PTX NPs包封率和上载率分别为52.52%和19.11%。HSA-ABD-iTEPA-PTX NPs在肿瘤的酸性微环境里有较高的释放率;制备的ABD-iTEPA及HSA-ABD-iTEPA纳米载体31.25-500μg/m L下未观察到明显的细胞毒性。HSA-ABD-iTEPA-PTX NPs与白蛋白结合型紫杉醇相比对乳腺肿瘤MCF-7细胞增殖有显著抑制,药物浓度在2.5～40μg/m L细胞抑制率显著高于白蛋白结合型紫杉醇(P<0.05),IC_(50)为9.205μg/m L。结论:成功构建了免疫相容性的弹性蛋白多肽搭载紫杉醇的自组装新型纳米颗粒(HSA-ABD-iTEPA-PTX NPs),并建立了MCF-7乳腺癌细胞模型。体外细胞毒性试验结enamel biomimetic果显示纳米药物载体具有良好的生物相容性,HSA-ABD-iTEPA-PTX NPs具有良好的杀伤乳腺癌肿瘤细胞的能力。为进一步研究HSA-ABD-iTEPA-PTX NPs小鼠体内试验及临床试验奠定基础。