目的观察大肠杆菌脂多糖(LPS)是否可在体外诱导小鼠血小板凋亡的发生。方法selleck PS-341制备洗涤血小板悬液,调整血小板终浓度至3×10~8/mL。根据刺激剂不同分为对照组[无钙台式缓冲液(TB)]、凝血酶处理组(终浓度1 U/mL,无钙TB制备)和不同浓度LPS处理组(终浓度1、10、100μg/mL,无钙TB制备)。各组加入相应刺激剂后室温孵育30 min。应用化学发光法检测三磷酸腺苷(ATP)含量及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)活性;用流式细胞仪检测血小板膜联蛋白V(Annexin V)阳性率以反映磷酯酰丝氨酸(PS)暴露水平;用流式细胞仪测定血小板平均通道荧光强度(MCF)以反映线粒体内膜电位(ΔΨm)去极化。结果与对照组比较,凝血酶处理组血小板ATP水平明显降低[相对荧光强度(RLU):(5.46±0.14)×10~5比(6.25±0.26)×10~5,P<0.05],Annexin V阳性率[(50.43±2.45)%比(1.58±0.25)%,P<0.05]和caspase-3活性[RLU:(26.92±1.60)×10~3比(1.30±0.10)×10~3,P<0.05]均明显升高,血小板MCF明显降低[(8.32±0.58)×10~4比(13.05±eye tracking in medical research1.10)×10~4,P<0.05],说明ΔΨm去极化增加。给予不同浓度LPS处理后,血小板ATP水平、Annexin V阳性率和caspase-3活性均明显升高,血小板MCF明显降低,说明ΔΨm去极化增加,且呈浓度依赖性。与对照组比较,1μg/mL LPS即可使Annexin V阳性率增加[(10.45±1.08)%比(1.58±0.25)%,P<0.05],caspase-3活性升高[RLU:(14.06±0.61)×10~3比(1.30±0.10)×10~3,P<0.05],MCF明显降低[(9.48±0.50)×10~4比(13.05±1.10)×10~4,P<0.05]。经100μg/mL LPS处理后血小板ATP水平、Anmexin V阳性率和caspase-3活性最高,且均明显高于对照组[ATP(RLU):(7.00±0.03)×10~5比(6.25±0.26)×10~5,Annexin V阳性率:(55.35±2.42)%比(1.58±0.25)%,caspase-3(RLU):(32selleck合成.00±3.75)×10~3比(1.30±0.10)×10~3,均P<0.05];血小板MCF最低,且明显低于对照组[(4.69±0.55)×10~4比(13.05±1.10)×10~4,P<0.05]。结论大肠杆菌LPS可体外诱导小鼠血小板ATP升高、PS暴露、ΔΨm去极化及caspase-3活性增加,说明LPS可诱导血小板凋亡,且呈浓度依赖性。