目的:本研究通过细胞实验探讨扶正消瘤方作用于胃癌SGC7901、AGS细胞的上皮-间充质转化、转移的分子机制,希望能够为进一步探讨扶正消瘤方的临床使用提供新的治疗依据。方法:(1)体外培养人胃癌SGC7901和AGS细胞株经扶正消瘤方干预处理。(2)采用CCK-8检测不同浓度扶正消瘤方对SGC7901和AGS细胞活性的抑制作用,并分析扶正消瘤方的IC_(50)值。(3)不同浓度梯度的扶正消瘤方(0、3、6mg/m L)作用于SGC7901和AGS细胞后,Transwell小室法对细胞迁移、侵袭情况进行检测,并对比不同药物浓度对侵袭、迁移的影响。(4)不同浓度梯度的扶正消瘤方(0、3、6mg/m L)干预SGC7901和AGS细胞后,Western-blotting测定E-cadherin、N-cadherin、MMP2、MMP9等EMT相关蛋白的表达情况。(selleck Bafilomycin A15)Western-blotting检测TGF-β、Smad2、Smad3、p-Smad2、p-Smad3、smad7等TGF-β/Smad相关蛋白的表达。结果:(1)通过倒置显微镜观察人胃癌SGC7901和AGS细胞形态良好。(2)CCK-8检测结果显示扶正消瘤方对SGC7901和AGS细胞具有生长抑制作用,且抑制作用呈浓度正相关性。(3)Transwell检测结果显示,扶正消瘤方能够抑制细胞的迁移、侵袭能力(P<0.01)。(4)通过WB实验对EMT相关蛋白进行检测,结果显示:与0mg/m L组相比,3mg/m L和6mg/m super-dominant pathobiontic genusL组的E-cadherin表达上调(P<0.01),而N-cadherselleck CL13900in、MMP2和MMP9的表达下调(P<0.01)。(5)Western-blotting实验检测TGF-β/Smad通路相关蛋白结果显示:与0mg/m L组相比,3mg/m L和6mg/m L扶正消瘤方干预后,TGF-β、p-Smad2和p-Smad3蛋白表达均下调(P<0.01),Smad7蛋白表达上调(P<0.01),Smad2、Smad3蛋白表达基本不变(P>0.05)。结论:通过体外实验,扶正消瘤方能够抑制胃癌细胞的迁移和侵袭能力。扶正消瘤方抑制胃癌细胞转移的复杂机制主要包括:扶正消瘤方通过抑制Smad2和Smad3蛋白的磷酸化调控胃癌细胞EMT的转化过程,通过抑制TGF-β/Smad通路介导的EMT过程抑制细胞的侵袭和迁移。