目的哮喘儿童常伴有骨骼肌质量的下降,不仅影响肺功能,同时也会增加未来罹患慢阻肺、代谢综合征及心血管疾病的危险。呼吸肌均属于骨骼肌。胰岛素样生长因子1(IGF-1)/蛋白激酶B(Akt)信号通路与骨骼肌质量密切相关。捏脊法可有效防治儿童哮喘、缓解哮喘症状,但是否影响骨骼肌质量未见研究。因此,本研究主要观察捏脊法对哮喘幼鼠骨骼肌质量的影响及IGF-1/Akt通路的调节效应,并与按揉足三里进行对照,观察两者的效应差异,为推拿防治儿童哮喘提供一定的指导和科学依据。方法本研究采用30只三周龄的雄性SPF级SD大鼠,经过3天适应性喂养后,随机分组为正常对照组(CON组)、哮喘模型组(OVA组)、哮喘捏脊组(OVA+BP组)、哮喘足三里组(OVA+ST组)、哮喘激素组(OVA+MP组)五组(n=6)。本研究采用卵清白蛋白(OVA)致敏和激发的造模方法创建哮喘大鼠模型,并在造模的过程中采用捏脊法、按揉足三里和甲基泼尼松龙(MP)腹腔注射的方法分别进行干预。大鼠气道PF-02341066体外高反应性的差异用全身体积扫描法检测增强呼吸间歇(Penh)值来观察;对肺组织进行HE染色观察,以评估气道炎症程度;RT-qPCR检测肺部炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、Th2细胞因子白细胞介素4(IL-4)mRNA水平以评估Th2免疫优势的气道过敏性炎症程度;HE染色检测膈肌(主要呼吸肌)和腓肠肌(四肢肌代表)肌纤维横截面积以评估骨骼肌质量情况;RT-qPCR法检测膈肌和腓肠肌的生肌决定因子(MyoD)和肌细胞生成素(MyoG)mRNA水平评估骨骼肌蛋白合成情况;RT-qPCR法检测膈肌和腓肠肌的肌肉特异性环指蛋白1(Trim63)和肌肉萎缩盒F蛋白32(Fbxo32)mRNA水平评估骨骼肌蛋白分解情况;以WB检测膈肌和腓肠肌的IGF-1、Akt、p-Akt蛋白表达水平以了解与骨骼肌蛋白合成和分解均密切相关的通路表达情况。结果(1)与CON组比较:OVA组的大鼠终末体重显著降低(P<0.01);肺功能Penh值显著升高(P<0.05);肺部炎症评分显著升高(P<0.01);肺部TNF-α、IL-4mRNA水平显著升高(均P<0.01);膈肌selleck抑制剂、腓肠肌肌纤维横截面积显著减少(均P<0.01);膈肌、腓肠肌IGF-1和p-Akt蛋白表达水平显著下降(均P<0.01);膈肌、腓肠肌Trim63和Fbxo32 mRNA水平均显著上升(均P<0.01);膈肌、腓肠肌MyoD和MyoG mRNA水平显著下降(均P<0.01)。(2)与OVA组比较:OVA+BP组大鼠体重明显升高(P<0.01);肺功能Penh值显著降低(P<0.05);肺部炎症评分显著降低(P<0.01);肺部TNF-α、IL-4mRNA水平均显著降低(均P<0.01);膈肌、腓肠肌肌纤维横截面积均显著增加(均P<0.01);膈肌、腓肠肌IGF-1、p-Akt蛋白表达水平均显著增加(均P<0.01);膈肌Trim63和Fbxo32 mRNA水平均显著降低(均P<0.01);腓肠肌Trim63和Fbxo32 mRNA水平都呈降低趋势(P<0.01、P<0.05);膈肌MyoD和MyoG mRNA水平均显著增加(均P<0.01);腓肠肌MyoD和MyoG mRNA水平呈现显著增加趋势(P<0.05,P<0.01)。(3)与OVA组比较:OVA+ST组大鼠体重没有体现出显著差异(P>0.05);肺功能Penh值显著降低(P<0.05);肺部炎症评分呈显著降低趋势(P<0.05);肺部TNF-α IL-4mRNA水平均显著降低(均P<0.01);膈肌、腓肠肌肌纤维横截面积均显著增加(均P<0.01);膈肌、腓肠肌IGF-1、p-Akt蛋白表达水平均呈显著增加趋势(均P<0.01);膈肌、腓肠肌Trim63和Fbmicrobe-mediated mineralizationxo32mRNA水平均显著降低(均P<0.01);膈肌、腓肠肌MyoD和MyoG mRNA水平显著增加(均P<0.01)。(4)与OVA组比较:OVA+MP组大鼠体重无显著差异(P>0.05);肺功能Penh值显著降低(P<0.05);肺部炎症评分显著降低(P<0.01);肺部TNF-α、IL-4 mRNA水平均显著降低(均P<0.01);膈肌肌纤维横截面积显著增加(P<0.01);腓肠肌肌纤维横截面积无显著差异(P>0.05);膈肌IGF-1、p-Akt蛋白表达水平呈现显著增加趋势(均P<0.01),腓肠肌IGF-1、p-Akt蛋白表达水平没有明显的差异(P>0.05);膈肌、腓肠肌Trim63和Fbxo32 mRNA表达水平均无显著差异(均P>0.05);膈肌MyoD和MyoG mRNA水平显著增加(P<0.05,P<0.01),腓肠肌MyoD和MyoG mRNA水平无显著差异(均P>0.05)。结论1.哮喘幼鼠存在膈肌和腓肠肌的质量下降。2.哮喘幼鼠可能存在系统性骨骼肌质量下降,其机制与骨骼肌IGF-1/Akt信号通路受抑制有关。3.捏脊法可提高膈肌和腓肠肌质量,机制与激活骨骼肌IGF-1/Akt通路有关;捏脊法也可抑制气道炎症、改善肺功能。4.按揉足三里可提高膈肌和腓肠肌质量,机制与激活骨骼肌IGF-1/Akt通路有关;也可改善肺功能、抑制气道炎症;但改善气道炎症和膈肌质量的效果不如捏脊法。5.MP可有效抑制哮喘幼鼠气道炎症,但会抑制骨骼肌质量和IGF-1/Akt通路。