研究目的血液兴奋剂是一类以提高机体血氧运输能力为作用机制的兴奋剂。运动员生物护照(Athlete Biological Passport,ABP)是对运动员各项生理指标的长期记录,出现异常变化时提示可能存在兴奋剂违规行为。ABP血液模块是通过全血分析技术间接检测血液兴奋剂的有效手段,大大提高了血液兴奋剂的检测效率。然而现有的ABP血液模块指标存在不足,对微剂量的重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,rhEPO)并不敏感,同时容易受到缺氧、脱水等因素的影响,因此需要通过探索新的指标,提高ABP血液模块的特异性和灵敏度。本文旨在探究ALAS2 mRNA作为运动员生物护照血液模块新指标的可行性,为兴奋剂检测工作提供新方向。研究方法将20位健康男性受试者和18位健康女性受试者随机分为男性rhEPO实验组(E group-M,n=15)、女性rhEPO实验组(E group-F,n=13)、男性生理盐水对照组(C group-M,n=5)和女性生理盐水对照组(C group-F,n=5)。rhEPO实验组每位受试者接受2次50IU/kg剂量的rhEPO注射。生理盐水对照组每位受试者接受2次与50IU/kg rhEPO等体积的生理盐水注射,2次注射间隔48h。在第一次注射前18天(Day-18)、第一次注射前即刻(Day 0)、第一次combination immunotherapy注射后24h(Day 1)、第二次注射后24h(Day 3)、第二次注射后72h(Day 5)、第二次注射后1周(Day-10)、第二次注射后2周(Day-16)、第二次注射后3周(Day 23)、第二次注射后4周(Day 30)收集血液样本。血液样本由全血分析仪测定红细胞计数(Red blood cell count,RBC)、血红蛋白浓度(Haemoglobin,HGB)、血细胞比容(Haematocrit,HCT)等ABP血液模块常规指标。在血液样本中提取的全血RNA样本经逆转录后使用实时荧光定量PCR技术(Quantitative Real-time PCR,q RT-PCR)检测ALAS2 L mRNA和ALAS2 L+C mRNA表达水平。研究结果(1)2次注射50IU/kg rhEPO能引起ABP血液模块指标RET%和IRF显著上升。(2)2次注射50IU/kg rhEPO能引起ABP血液模块指标OFFS显著下降。(3)人体血液中ALAS2 mRNA表达水平的个体变异系数较大。(4)2次注射50IU/kg rhEPO能引起ALAS2 L mRNA和ALAS2 L+C mRNA表达水平显著上升,且ALAS2 L+C mRNA的变化更为显著(5)相较于ABP血液模块常规指标,ALAS2 mRNA对rhEPO更为敏感。研究结论2次注射50IU/kg的rhEBMN 673浓度PO能够引起ALAS2 L mRNA和ALAS2 L+C mRNA表MS-275配制达水平出现显著变化。ALAS2 L mRNA和ALAS2 L+C mRNA可以作为ABP血液模块的潜在生物标志物。