目的 通过对2022年收集的海南省136株耐药结核分枝杆菌进行基因分型研究，了解和掌握海南省不同耐药结核分枝杆菌基因型的流行情况及耐药率，为海南省结核病防治策略提供科学依据。方法 收集海南省结核分枝杆菌耐药菌株136株，采用间隔区寡核苷酸分型技术（Spoligotyping）对结核分枝杆菌临床分离株进行基因分型，并对不同基因型结核分枝杆菌的耐药率进行统计学分析。结果 136株耐药结核分枝杆菌中北京型占54.41%(74/136)，非北京型占27.94%(38/136)，新发现基因型占17.65%(24/136)。北京型中包含SIT1和SIT269两种基因型，占比分别为52.94%(72/136)、1.47%(2/136)。在非北京型中，T型（T1、T2、T3）占21.32%(29/136),U型占6.62%(9/136)。基因分型聚类分析结果：分为北京型和非北京型两个大类以及一些散在的新型基Pidnarulex作用因型。Spoligotyping分型成簇分析结果：136株耐药菌株分为3簇，成簇率为75.74%(103/136)。北京型和非北京型的单耐药、多耐药、耐多药、广泛耐药比率分别为41.89%(31/74Enteric infection)、13.51%(10/74)、24.33%(18/74)、20.27%(15/74)和36.84%(14/38)、15.79%(6/38)、26.32%(1LGK-974体内实验剂量0/38)、21.05%(8/38)，经过卡方检验，北京型和非北京型两者之间以上各耐药率差异均无统计学意义（P>0.05）。结论 海南省结核分枝杆菌基因型呈基因多态性，其主要流行菌株基因型为北京型中的SIT1型，应加强该基因型结核分枝杆菌监测工作。