扁桃酸作为一种芳香族化合物,它既Polyclonal hyperimmune globulin是手性药物的重要中间体又是手性拆分试获悉更多剂,具有很广泛的应用价值。本论文将对微生物法催化苯甲酰甲酸合成扁桃酸进行系统深入研究。主要研究内容和成果如下:1.以苯甲酰甲酸为底物模型,从土壤中分离纯化得到能够转化苯甲酰甲酸的微生物菌株21株,并选择底物转化率以及产率均在90%以上的的微生物菌株selleck NMR对其在属进行鉴定,结合16Sr DNA测序分析后鉴定出该菌株为伯克霍尔德氏菌属(Burkholderia sp.)。2.依据文献报道合成能够转化芳香族化合物的氧化还原酶基因,进行E.coli BL21(DE3)异源表达,成功构建转化苯甲酰甲酸合成扁桃酸的工程菌株E.coli BL21/pET28a-OPPAR,该工程菌还原苯甲酰甲酸生成扁桃酸的转化率和产率分别为6.03%和8.77%。3.对工程菌株E.coli BL21/pET28a-OPPAR发酵条件进行了优化培养。筛选了单因素碳源、氮源、pH以及诱导剂IPTG浓度,在此基础上正交实验结果表明该工程菌株的最适发酵条件为:葡萄糖15 g/L,硫酸铵10 g/L,pH为6.5±0.05,接种量为5%,最佳诱导剂浓度为0.5 M。4.对工程菌株E.coli BL21/pET28a-OPPAR还原苯甲酰甲酸生成扁桃酸的转化条件进行优化,确定了最适转化条件为:pH7.0,反应温度37℃,底物浓度5 g/L,添加1 g/L辅金属锌离子,180 rpm反应48小时。最终底物的转化率由优化前的6%达到28%,反应产率由优化前的8%达到77%。这一结果为苯甲酰甲酸还原生成扁桃酸提供了一定的实践依据。