目的1.分析老年肺部多重耐药菌(MDRB)感染的影响因素,探索具有预测能力的相关变量,构建MDRB感染风险预警模型。2.探讨老年肺部MDRB感染患者预后的相关影响因素,构建老年肺部MDRB感染患者预后评估模型;3分析抑制鲍曼不动杆菌(A.baumannii)诱导的巨噬细胞焦亡可能机制,为治疗多重耐药鲍曼不动杆菌提供新方法。方法本研究为回顾性队Hepatoma carcinoma cell列研究,共纳入符合标准的肺部感染患者994例,选取合肥市滨湖医院和中国科学技术大学附属第一医院的数据作为多中心外部验证集,其余数据(安徽医科大学附属第三医院、安庆市市立医院和安徽医科大学附属阜阳医院)作为训练集((比例约为3:7)。在第一部分中,根据痰培养分离结果,将训练集患者分为MDRB感染组和非MDRB感染组,用Lasso回归及Logistic多因素分析筛查多重耐药菌感染的相关因素,采用R4.2.1软件建立模型并以Nomogram形式表示,在内部(训练集)和外部验证集中,使用ROC及校准曲线来评估预后模型的性能,采用决策曲线分析(DCA)评价模型的临床应用价值;在第二部分中,将感染训练集中的MDRB患者(255例)作为预后训练集中的个体,感染验证集中的MDRB患者(100例)作为预后验证集,根据预后训练集中MDRB患者的住院时间及结局,进行Lasso单因素及COX回归分析确定预后相关的危险因素,预后训练集中每个患者的相关风险根据预后独立危险因素进行评分,根据风险评分的中位数将患者分为低危组(<中位数)和高危组(>=中位数),采用Kaplan-Meier(K-M)生存曲线比较高危组和低危组的生存情况,若高低风险组差异有统计学意义,则基于独立预后因素和风险分组构建预后预测模型并验证;在第三部分中,将多重耐药鲍曼不动杆菌感染巨噬细胞RAW 264.7,以流式细胞术及蛋白免疫印迹法分析感染后RAW264.7细胞凋亡程度及焦亡关键分子GSDMD、Caspase-1、IL-18和IL-1β的表达。分析甘草酸(GA)对感染后RAW 264.7焦亡程度的影响,以蛋白质印迹分析甘草酸对RAW 264.7感染后极化标志物i NOS及JAK1/STAT1通路的表达程度。结果1.共纳入符合标准的肺部感染患者994例,其中MDRB感染病例355例,非MDRB感染病例589例,预后研究共纳入355例患者,死亡病例为66例,死亡率为18.60%;通过对感染及预后的训练集和验证集所有患者的基线人口统计学和特征进行比较,两组间一般资料差异均无统计学意义;2.气管插管、抗生素使用时长≥2周、合并呼吸衰竭和脑血管疾病是MDRB感染的独立危险因素,根据独立危险因素构建的感染风险预测模型的Nomogram图,其训练集(内部验证)和验证集(多中心外部验证)AUC值分别为0.738、0.731,提示模型有良好的诊断能力;经Hosmer-Lemeshow检验(训练集P=0.919,验证集P=0.152),提示模型有良好的拟合优度;通过decision曲线分析显示,模型的获益性尚可。3.呼吸衰竭、营养不良、APACHEⅡ评分>=20、Cr是训练集中老年肺部多重耐药菌感染的独立预后因素,Kaplan-Meier分析显示,高危组与低危组生存期差异有统计学意义(P<0.001),在老年MDRB患者中,患者的风险评分与生存期成反比,基于独立预后因素和风险分组构建了预后预测模型,在进行内部和外部验证时,我们发现训练集的AUC值为0.826,验证集的AUC值为0.805,提示模型的诊断能力良好;DCA曲线提示Nomogram在预测MDRB感染的预后风险方面提供了中等的净收益,MDRB感染后预后风险的校准曲线也显示了观察值和预测值之间的良好一致性。4.鲍曼不动杆菌耐药菌株体外可通过激活caspase-1和IL-1β合成诱导巨噬细胞RAW264.7发生焦亡。甘草酸(GA)处理可显著降低A.baumannii诱导的RAW264.7焦亡相关蛋白GSDM、IL-1β、IL-18、NLRP3及caspase-1、3的活化,抑制其焦亡发生。此外,GA在保护RAW264.7免受A.baumannii诱导的焦亡同时,下调了RAW264.7的M1极化分子i NRapamycinOS的表达。结论1.老年肺部感染患者MDRB感染率高,积极纠正呼衰、早期脱机拔管,治疗脑血管基础疾病,合理使用抗生素,缩短抗生素使用时间,对控制MDRB感染有重大意义。2.对于GNE-140半抑制浓度老年肺部MDRB感染的患者,在临床中应积极利用列线图进行个体化评估,尤其是合并有呼吸衰竭、营养不良、APACHEⅡ评分>=20及血肌酐值较高的患者要警惕发生预后不良的可能,综合考虑各项指标,制定相应的干预措施。3.甘草酸做为临床常见的抗炎药物,其可通过抑制A.baumannii诱导的巨噬细胞焦亡和M1极化水平,从而减轻巨噬细胞引起的局部炎症反应。其未来或可用于A.baumannii引起的细菌性肺炎的患者治疗。