【目的】1研究骨髓间充质干细胞(Bone mesenchymal stem cells,BMSCs)对阿霉素肾病的治疗作用。2探讨BMSCs是否通过改善阿霉素肾病大鼠的氧化应激实现对肾脏损伤的修复。3探索BMSCs抗氧化应激的可能CL13900说明书机制。【方法】1模型构建:(1)24只雄性SD大鼠随机分为3组(每组8只),阿霉素肾病组(ADR组)的造模方式为尾静脉注射阿霉素(4 mg/kg),间隔两周后再次注射同等剂量阿霉素;BMSCs治疗组(BMSCs组)的造模方式同ADR组,并于末次阿霉素注射9周时经肾动脉注射1 m L BMSCs悬液(细胞数量约为2×10~6个);在同样的时间节点,对照组(Control组)经尾静脉注射生理盐水,经肾动脉注射1 m L L-DMEM培养基。(2)模型检测:在末次注射阿霉素8周时收集24 h尿液,成功的标准为24 h尿蛋白>100 mg。2肾脏结构和功能检测:24 h尿蛋白、血肌酐(Serum Creatinine,Scr)和血尿素氮(Blood Urea Nitrogen,BUN)评估肾功能。课题组通过光镜观察肾脏病理结构,透射电镜观察基底膜、足细胞及线粒体,明确BMSCs对阿霉素肾病的治疗作用。3氧化应激指标检测:通过免疫荧光染色检测活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)的表达,ELISA检测氧化应激相关因子(T-AOC、T-SOD及MDA)的水平,探讨BMSCs对阿霉素肾病大鼠氧化应激的改善。4分子机制研究:Western Blot和免疫荧光染色检测AMPK/SIRT1/PGC-1α轴相关因子的表达,探索BMSCs是否通过AMPK/SIRT1/PGC-1α轴改善阿霉素肾病大鼠的氧化应激。Western Blot检测细胞凋亡相关因子Bcl-2和Bax以及足突裂孔隔膜相关蛋白nephrin的表达情况,研究BMSCs是否可以改善氧化应激导致的细胞凋亡和足细胞损伤。【结果】1课题组成功建立了阿霉素肾病大鼠模型。2 BMSCs可改善阿霉素肾病大鼠肾功能及肾脏结构。与ADR组相比,BMSCs组的Scr、24h尿蛋白明显改善(P<0.05),但BUN改善不明显;BMSCs组肾小球硬化、肾小管扩张以及肾间质纤维化减轻。透射电镜观察到ADR组肾基底膜结构模糊,厚度不均,足突融合,线粒体明显肿胀,而BMSCs组的状况好转。3 BMSCs通过抗氧化应激实现对阿霉素肾病大鼠的治疗。与ADR组相比,BMSCs组的氧化应激指标ROS和MDA明显降低(P<0.05),而抗氧化应激指标T购买MK-1775-AOC和T-SOD明显升高(P<0.05)。4 BMSCs可能通过AMPK/SIRT1/PGC-1α轴改善氧化应激,抑制了细胞凋亡并修复滤过屏障损伤。具体表现如下:与ADR组相比,BMSCs组p-AMPK、SIRT1、PGC-1α表达上调,nephrin和Bcl-2表prescription medication达上调,以及Bax表达下调。【结论】1 BMSCs可减轻阿霉素肾病大鼠的蛋白尿,改善肾功能,延缓疾病的进展。2 BMSCs通过抗氧化应激发挥治疗作用,抑制了细胞凋亡并减轻足细胞损伤。3 BMSCs可能通过AMPK/SIRT1/PGC-1α轴发挥抗氧化应激作用。