魔芋葡甘聚糖联合罗伊氏乳杆菌干预细菌性阴道病的实验研究

研究背景:细菌性阴道病(bacterial vaginosis,BV)是阴道内正常菌群失调所致的一种混合型感染疾病,是全球育龄妇女最常见的下生殖道疾病。魔芋葡甘聚糖(konjac glucomannan,KGM)是一种从魔芋(amorphophallus konjac)植物根粉中分离获得的水溶性杂多糖。研究显示KGM具有益生元活性、抗感染、抗肿瘤及免疫调节功能。本实验以SPF(specific pathogen free,SPFhttps://www.selleck.cn/products/ly2835219.html)级昆明雌性小鼠为受试体,研究KGM对阴道环境及胃肠道环境的影响,为KGM作为益生元及其进一步开发运用于治疗细菌性阴道病和恢复阴道微生态系统提供实验依据。目的:研究KGM的益生元活性,再联合罗伊氏乳杆菌验证其干预细菌性阴道病的作用。方法:选取25只昆明雌性小鼠,随机分成5组:正常(Control)组、模型(BV)组、魔芋(KGM)组、罗伊氏乳杆菌(Lr)组、魔芋联合罗伊氏乳杆菌(KGM+Lr)组。每组5只,除正常组外,其余4组小鼠均采用雌激素β-雌二醇-3-苯甲酸酯联合苯酚胶浆与混合致病菌制备细菌性阴道病模型,整个实验期间,魔芋KGM组每天灌胃10~9CFU/m L的魔芋悬浮液200μL(魔芋浓度为5g/m L)。阴道给药50μL,罗伊氏乳杆菌Lr组每天灌胃10~9CFU/m L的益生菌悬浮液200μL,阴道给药50μL,魔芋联合罗伊氏乳杆菌组每天灌胃10~9CFU/m L的魔芋益生菌混合悬浮液200μL,阴道给药50μL。整个实验Stormwater biofilter期间记录小鼠体重、进食、活动,观察小鼠外阴情况。第15天麻醉处死小鼠,收集小鼠阴道灌洗液检测灌洗液中细菌的分类和数量及相关基因的表达情况;HE染色检测阴道组织病理学变化;Western Blotting法检测阴道组织中TNF-α、IL-6的蛋白表达情况;RT-q PCR检测TNF-α、IL-6m RNA表达情况。结果:(1)与正常组比较,BV组小鼠的体重降低,阴道充血水肿明显,大肠杆菌和金黄色葡萄球菌数量增多,乳杆菌数量下降。阴道灌洗液Crizotinib分子量中乳酸杆菌基因b Lacto表达明显下降,大肠杆菌基因b Eco表达明显上升(P<0.05),阴道组织中TNF-α和IL-6的表达水平显著升高(P<0.05),表明BV造模成功。(2)与BV组相比,KGM组、Lr组和KGM+Lr组的小鼠外阴临床指标评分均有不同程度的降低,其中魔芋联合益生菌组降低最为显著(P<0.05)。KGM组、Lr组和魔芋联合益生菌组中大肠杆菌和金黄色葡萄球菌数量以及阴道灌洗液中b Eco m RNA表达呈递减趋势(P<0.05),乳杆菌数量以及b Lacto m RNA呈递增趋势(P<0.05)。KGM组、Lr组和魔芋联合益生菌组中TNF-α和IL-6的表达水平均有不同程度的降低(P<0.05)。结论:魔芋葡甘聚糖联合罗伊氏乳杆菌对细菌性阴道病小鼠具有缓解作用,可改善阴道菌群微环境,促进阴道健康,并具有抗炎作用,作用机制与KGM的益生元及协同益生菌的抗炎活性有关。