麻叶荨麻对LPS诱导斑马鱼和雏鸡肠道炎性反应的缓解作用

自从我国全面禁止饲料添加抗生素以来,利用植物源活性物质替代抗生素逐步成为研究的热点。麻叶荨麻(Urtica cannabina L,UL)广泛分布于北半球,具有丰富的营养价值和药理作用,但有关抗炎机制还有待深入研究。本实验旨在探讨不同浓度UL对斑马鱼和雏鸡的抗炎作用及其机制。Biological early warning system实验选用300条斑马鱼(13周龄)和180只雏鸡(3日龄)作为研究对象,研究UL对大肠杆菌脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)引起的斑马鱼和雏鸡肠道炎性反应的缓解作用,将UL粉碎后分别加入斑马鱼饲料(1%和3%)和雏鸡饲料(3%和6%)制成日粮。分别从形态学、组织学、基因和蛋寻找更多白水平的变化,检测UL对LPS炎性反应的缓解作用。结果表明:1)斑马鱼尾鳍被切除后,阳性对照组和UL30 mg/g组尾鳍出现瘢痕,尾鳍愈合面积减少,而UL10 mg/g组尾部瘢痕较轻,愈合面积与对照组接近,显著高于阳性对照组和UL30 mg/g组(P<0.01)。2)通过肠道微生物群分析,发现UL10 mg/g组中益生菌拟杆菌增加,致病菌梭杆菌、厚壁菌和变形杆菌减少。3)LPS处理显著抑制了斑马鱼的肠道杯状细胞,与对照组相比减少42%(P<0.001),而UL处理显著恢复了LPS引起的破坏,添加UL也有效缓解斑马鱼肠道杯状细胞的形态、数目和肠道绒毛的形态。4)LPS显著增加了斑马鱼IL-6、IL-8和TNF-α炎症因子的m RNA表达,分别是对照组的1.87倍(P<0.05)、2.01倍(P<0.05)和2.05倍(P<0.05),而添加UL饲喂缓解了LPS对以上三个基因表达的影响。5)LPS造成斑马鱼日增重的降低,UL缓解了这一影响。并且LPS抑制雏鸡日增重的增加,UL同样起到改善作用,使雏鸡日增重寻找更多维持在对照组的水平。6)雏鸡在LPS处理后肠道杯状细胞显著减少,与对照组相比减少了45%(P<0.05)。而UL30 mg/g+LPS和UL60 mg/g+LPS处理组雏鸡肠道杯状细胞接近对照组水平,相较于LPS组升分别升高了71%(P<0.05)和35%。此外,UL添加促进雏鸡肠道绒毛长度和绒腺比恢复到正常水平。7)LPS诱导雏鸡肠道IL-6、IL-8和TNF-αm RNA表达量分别升高了3.4倍(P<0.05)、0.6倍(P>0.05)、3.4倍(P<0.05)。而UL30mg/g+LPS和UL60 mg/g+LPS组的IL-6基因表达分别降低了4.0倍(P<0.05)和4.8倍(P<0.05),TNF-α基因表达分别降低了4.9倍(P<0.05)和4.1倍(P<0.05)。8)LPS显著增加了雏鸡肠道TNF-α蛋白的异常高表达(P<0.05),而添加UL缓解了LPS对TNF-α蛋白表达的影响(P<0.05)。另外,LPS诱导斑马鱼炎性因子关联蛋白CD40L蛋白表达量增加了1.43倍(P<0.01),而UL10 mg/g处理后恢复到对照组水平。以上结果表明,UL对LPS诱导的斑马鱼和雏鸡肠道炎性反应具有强烈的抑制作用,证明UL是一种可开发的饲料添加剂,用于提高牲畜疾病抵抗力和健康水平。