运用网络药理学和体外实验探究黄芩苷是否诱导HepG2细胞发生铁死亡并探讨潜在机制。体外培养HepG2细胞，CCK-8法检测细胞活力。TCGA数据库获取肝癌转录组测序数据，FerrDb V2数据库获取铁死亡基因数据。使用DEG2程辑包筛选差异表达基因，并与铁死亡基因取交集，得到介导铁死亡调节肝癌进程的靶向基因。通过基因本体数据库(Gene Ontology, GO)与京都基因与基因组百科全书数据库(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes, KEGG)以P<0.05、|log_2(fold change)|>0.5为标准，分析模块相关的分子功能及结构。DCFH-DA探针检测细胞活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平变化。试剂盒检测细胞还原型谷胱甘肽(glutathione, GSH)、Fe~(2+)水平。实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative PCR, RT-PCR)检测谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)、溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)mRNA表达。蛋白质印迹法检测GPX4、SLC7A11、PI3K、p-PI3K、Akt、Incidental genetic findingsp-Akt、FoxO3a、p-FoxO3a蛋白表达。CCK-8检测结果显示，200μmol·L~(-1)黄芩苷干预48 h,能显著抑制HepG2细胞活力。网络药理www.selleck.cn/products/pexidartinib-plx3397学结果显示，可通过PI3K/Akt信号通路调节肝癌中铁死亡的发生。细胞实验结果显示，黄芩苷可下调SLC7A11,降低GSH水平和GPX4表达，诱导HepG2细胞ROS累积，增加Fe~(2+)产生。铁死亡抑制剂(ferrostatin-1,Fer-1)可减少黄芩苷诱导的ROS累积，上调SLC7A11、GSH和GPX4表达，减弱PI3K、Akt、FoxO3a磷酸化。综上，黄芩苷可通过抑制ROS获悉更多介导的PI3K/Akt/FoxO3a通路诱导HepG2细胞铁死亡。