目的:探讨葛根素对H_2O_2诱导的RSC96细胞铁死亡的保护作用及其机制。方法:将RSC96细胞体外培养,随机分成4组:正常组(Control,Con)、模型组(H_2O_2)、葛根素干预组(H_2O_2+Pue)和抑制剂组(H_2O_2+Pue+ML385)Compound C。采用如下实验Panobinostat抑制剂:1.将RSC96细胞用0～0.75 m M H_2O_2进行处理,Western blot检测GPX4和PTGS2蛋白表达,以测定H_2O_2造模浓度及干预时间。2.将RSC96细胞用0.25～1 m M葛根素进行预处理后,加入0.3 m M H_2O_2干预RSC96细胞24h,CCK-8检测细胞存活率,以确定葛根素干预浓度。3.Western blot检测各组细胞中SLC7A11、GPX4、Nrf2和HO-1蛋白水平。4.生化方法检测GSH、MDA、T-SOD、ROS和Fe~(2+)水平。5.免疫荧光法观察Nrf2蛋白共定位情况。结果:1.与Con组相比,0.3 m M H_2O_2处理RSC96细胞24 h,GPX4的蛋白水cultural and biological practices平显著下降(P<0.05),PTGS2蛋白表达显著升高(P<0.01),提示RSC96细胞铁死亡模型造模成功。2.CCK-8结果显示,与Con组相比,H_2O_2组的细胞存活率显著降低(P<0.01);与H_2O_2组相比,500μM葛根素预处理RSC96细胞30 min,细胞存活率显著升高(P<0.01)。3.WB结果显示,与H_2O_2组相比,H_2O_2+Pue组GPX4、SLC7A11、HO-1和Nrf2蛋白表达显著增加(P<0.05或P<0.01)。4.生化检测结果显示,与Con组相比,H_2O_2组RSC96细胞GSH和SOD水平显著降低(P<0.05或P<0.01),ROS和MDA水平明显增加(P<0.05或P<0.01);与H_2O_2组相比,H_2O_2+Pue组细胞内GSH和SOD水平显著增加(P<0.05或P<0.01),ROS和MDA积累显著下降(P<0.05或P<0.01)。5.免疫荧光结果显示,与H_2O_2相比,H_2O_2+Pue组共定位系数显著增加(P<0.05),而这种作用可被Nrf2蛋白的抑制剂ML385所抑制。结论:葛根素对H_2O_2诱导的RSC96细胞铁死亡具有保护作用,其机制可能是通过激活Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路,抑制脂质过氧化实现的。