目的:1.探索棕榈油酸对高脂饮食诱导的肥胖小鼠胰岛素抵抗的相关机制。2.探索棕榈油酸对蛋氨酸和胆碱缺乏饮食诱导的非酒精性脂肪性肝炎小鼠的作用及其机制。方法:1.棕榈油酸对肥胖小PF-03084014使用方法鼠胰岛素抵抗的作用机制:6周龄的C57BL/6J小鼠分别进行维持饲料或高脂饲料喂养12周。第13周时,分别对小鼠给予BSA、油酸和棕榈油酸灌胃处理,持续维持饲料或高脂饲料喂养并灌胃6周。第17周进行葡萄糖耐量实验。第18周收取小鼠血液、肝脏、脂肪、结肠组织和采集粪便样本,检测小鼠粪便中肠道菌群的组成,检测小鼠结肠、脂肪和肝脏组织巨噬细胞浸润和炎症反应,检测小鼠脂肪和肝脏中甘油二酯水平。2.棕榈油酸对非酒精性脂肪性肝炎小鼠的作用及其机制:8周龄的C57BL/6J小鼠分别进行维持饲料、蛋氨酸和胆碱充足饲料、或蛋氨酸和胆碱缺乏饲料喂养5周。第6周时,对蛋氨酸和胆碱缺乏饮食喂养组小鼠分别给予BSA、油酸和棕榈油酸灌胃处理,持续喂养并灌胃4周。第9周收取小鼠血液和肝脏组织,检测血清和肝脏甘油三酯水平,肝脏损伤、炎症和纤维化水平。检测肝脏中CD36和NLRP3的表达水平以及AMPK磷酸化水平。3.棕榈油酸对巨噬细胞炎症的影响:用50 μmol/L棕榈油酸处理巨噬细胞细胞24h,加入125 μmol/L棕榈酸(高脂刺激)继续培养24h;分别用Ad-GFP和Ad-CD36腺病毒感染RAW 264.7细胞LY2157299溶解度,随后用50 μmol/L棕榈油酸处理巨噬细胞细胞24 h,加入125 μmol/L棕榈酸(高脂刺激)继续处理24 h。检测巨噬细胞CD36表达水平和炎症反应,以及巨噬细胞中CD36和NLRP3的表达水平以及AMPK磷酸化水平。结果:(1)棕榈油酸可以改善高脂饮食诱导的肥胖小鼠全身胰岛素抵抗,降低厚壁菌丰度和增加拟杆菌丰度,改变肠道菌群组成,改善肠道屏障,减轻高脂饮食诱导的结肠、脂肪和肝脏组织巨噬细胞浸润和炎症反应。然而,棕榈油酸并没有降低高脂饮食诱导的肥胖小鼠肝脏和脂肪中的甘油二酯水平。因此,棕榈油酸是以不依赖于甘油二酯的方式改善胰岛素抵抗,改变肠道菌群,降低组织炎症。(2)棕榈油酸可以改善蛋氨酸和胆碱缺乏饮食诱导的非酒精性脂肪性肝炎小鼠肝脏炎症和纤维化反应,降低肝组织CD36和NLRP3表达水平,增加AMPK磷酸化水平。(3)巨噬细胞在棕榈酸(高脂)刺激情况下,CD36的表达水平明显升高,且伴随着炎症反应的增加。棕榈油酸能够显著降低在高脂刺激下巨噬细胞CD36表达水平,降低炎症因子IL-1β、IL-6和TNFα的mRNA水平。Chromatography巨噬细胞过表达CD36时,棕榈酸(高脂刺激)对巨噬细胞的炎症反应和CD36表达水平进一步增加,且NLRP3水平明显升高,AMPK磷酸化水平显著下降。棕榈油酸预处理能降低CD36和NLRP3水平,增加AMPK磷酸化水平。结论:1.本研究中,棕榈油酸可以改善高脂饮食诱导的肥胖小鼠全身胰岛素抵抗,降低厚壁菌丰度和增加拟杆菌丰度,改变肠道菌群组成,改善肠道屏障,减轻高脂饮食诱导的结肠、脂肪和肝脏组织巨噬细胞浸润和炎症反应。然而,棕榈油酸并没有降低高脂饮食诱导的肥胖小鼠肝脏和脂肪中的甘油二酯水平。因此,棕榈油酸以不依赖于甘油二酯的方式改善胰岛素抵抗,改变肠道菌群,降低组织炎症。2.棕榈油酸可能通过改变炎性巨噬细胞CD36/NLRP3和CD36/AMPK信号通路进而改善非酒精性脂肪性肝炎。