元蘑多糖的结构特征及其调节巨噬细胞免疫活性机制

【目的】为明确元蘑多糖的结构特征，并探究其调节巨噬细胞免疫活性机制。【方法】采用水提醇沉法获得元蘑多糖粗提物，并通过DEAE-5BMN 673作用2离子交换层析及Sephacryl S-400葡聚糖凝胶过滤层析对该多糖粗提物进行分离纯化，获得多糖组分SEP-0medicinal valuea。分别采用高效凝胶渗透色谱法、离子交换色谱法、傅立叶红外光谱法检测了SEP-0a的理化性质。进一步采用CCK-8法、ELISA法、qPCR法、Western blot等方法考察了元蘑多糖SEP-0a对巨噬细胞RAW264.7的免疫调节作用及机制。【结果】元蘑多糖SEP-0a由半乳糖、甘露糖、葡萄糖和岩藻糖组成，相对分子量为4.23×10~4 Da，并且具有α构型与β构型。体外免疫活性结果表明，元蘑多糖SEP-0a可显著增强RAW264.7细胞增殖和吞噬能力，促进该细胞活性氧（reactive oxygen species,ROS）、一氧化氮（nitric oxide,NO）的分泌，提高肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素（interleukin,IL）-1β、IL-6的表达，Western blot检测发现，该MS-275多糖可显著提高核转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路p65蛋白磷酸化表达。【结论】元蘑多糖SEP-0a可通过NF-κB信号通路调控巨噬细胞的免疫活性。