单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)是一种能氧化分解伯胺和一些仲胺的酶,通过氧化脱氨来调节单胺水平。在哺乳动物体中存在2种MAO的同工酶,分别为MAO-A和MAO-B,主要存在于线粒体外膜上,编码基因均位于X染色体上,且各自独立,从而使2种酶有了不同的底物特异性。目前国内外对植物MAO的分离纯化、酶学性质等研究非常少见。本课题对小麦幼苗中的MAO的提取、分离纯化工艺进行了优化,并研究了小麦MAO的酶学性质。实验结果如下:(1)研究光照条件对小麦幼苗MAO活性的影响,发现在黑暗条件下生长的小麦幼苗中的MAO活性比光照条件下的活性高;(2)对比分析了小麦种子和幼苗不同部位MAO的活性,发现小麦种子和幼苗芽、根的MAO的活性大小顺序为:幼苗根>种子>幼苗芽;(3)对小麦幼苗MAO的提取、分离纯化工艺进行优化研究,发现其最佳提取液p H为7,最佳液料比为3:1,而提取时间对MAO活性的影响不显著;(4)对小麦幼苗MAO粗酶液进行分离纯化工艺研究。经离Selenium-enriched probiotic心、硫酸铵沉淀、葡聚糖凝胶G-75层析、透析、DEAE-纤维素离子交换层析等操作,得到纯度较高的MAO,回收率为22%,比酶活为100U/mg;(5)对小麦幼苗MAO的反应条件与稳定性进selleck合成行研究,发现其最适反应温度为37℃,最适反应p H为7Navitoclax体内实验剂量.0。MAO的热稳定性差,高温易失活;(6)对小麦幼苗MAO酶学性质进行研究,发现其对苄胺的Km值为8.40mmol/L,对腐胺和精胺几乎不产生反应。Fe~(2+)、Fe~(3+)、Cu~(2+)等金属离子对MAO的活性产生较强的促进作用,Ca~(2+)、Mg~(2+)可以略微促进MAO的活性,K~+、Na~+和Zn~(2+)对MAO的活性不产生影响。测试草酸、柠檬酸、抗坏血酸、双甘肽、肉桂酸、反式肉桂酸、曲酸、阿魏酸、4-乙基间苯二酚和亚硫酸氢钠等抑制剂对小麦MAO活性的抑制作用,发现草酸、抗坏血酸、双甘肽、肉桂酸、曲酸、4-乙基间苯二酚和亚硫酸氢钠对MAO活性有明显的抑制作用,其中抗坏血酸对MAO的抑制作用最强,抑制效果可达90%。