增塑剂DEHP通过铁死亡途径抑制小鼠GC-1 spg精原细胞生长

目的:探究邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(di-2-ethylhexyl phthalate, DEHP)损伤小鼠GC-1 spg精原细胞功能的可能机制。方法:采用不同浓度DEHP(0、30、60、90、120μmol/L)处理GC-1 spg细胞，通过CCK8实验、克隆形成实验和Transwell实验检测细胞增殖和迁移能力的变化；化学分光光度比色法检测细胞内铁离子(Fe~(3+))和丙二醛的相对含量；蛋白质印迹实验检测细胞内铁死亡相关蛋白胱氨酸/谷氨酸逆转运蛋白(xCT)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的相对表达；细胞免疫荧光染色技术检测细胞内活性氧水平以及线粒体膜电位(JC-1)的改变。使用铁死亡抑制剂Ferrostatin-1(1μmol/L)与DEHP(90μmol/L)联合培养GC-1 spg细胞24 h, CCK8实验检测细胞的增殖能力。结果:与对照Persian medicine组(0μmol/L)相比，30、60、90、120μmol/L DEHP组细胞的增殖能力、克隆形成能力和迁移能力明显下降；丙二醛、活性氧、FeCX-5461溶解度~(3+)(90、120μmol/L DEHP组)含量明显升高；线粒体膜电位(60、90、120μmol/L DEHP组)明显降低；GPX4(60、90、120μmGDC-0973纯度ol/L DEHP组)和xCT蛋白表达水平明显降低。DEHP与Ferrostatin-1联合培养后细胞增殖能力较DEHP单独培养明显提高。结论:DEHP能够抑制GC-1 spg细胞的增殖和迁移能力，降低GPX4和xCT蛋白的表达，可能通过铁死亡途径引起细胞死亡。