研究背景α-突触核蛋白(Alpha-synuclein)是一种广泛表达于神经末梢的小分子蛋白质,以多种方式参与帕金森病等突触核蛋白病的发病机制和病理变化。α-突触核蛋白的异常表达和聚集与突触核蛋白病的发生和特征性病理改变的发展均具有紧密联系。当前认为,清除中枢系统内的α-突触核蛋白是防治突触核蛋白病的重要干预策略。然而,针对α-突触核蛋白脑内清除所展开的一系列研究,都未能获得理想的效果。这些干预往往都通过采用直接针对α-突触核蛋白的抗体为手段,以达成中枢蛋白清除的目的。因此,从外周系统的角度重新审视突触核蛋白病,尝试在外周清除脑内α-突触核蛋白、探索α-突触核蛋白的外周清除能力,和对外周途径对α-突触核蛋白清除能力的评估,对进一步理解以帕金森病为主的一系列突触核蛋白病的发生机制和开发防治新靶点具有重要的科学意义。材料与方法1.生理条件下机体外周系统对脑源性α-突触核蛋白的清除能力共纳入30例需要接受射频消融术治疗的房室折返心动过速住院病人,在手术期间,对其股动脉、上腔静脉、下腔静脉和股静脉进行置管,同一时间采集血液样本,分离血清冻存。采用ELISA法检测血液循环系统不同采集部位血液的α-突触核蛋白水平,并比较其差异和静脉血与动脉血α-突触核蛋白水平的比值,分析并探讨生理条件下机体外周系统清除脑源性α-突触核蛋白的能力。2.外周脏器对脑内α-突触核蛋白清除能力的初步研究共收集11例需要接受癫痫病灶切除术的住院患者,在其手术中采集脑组织,洗净冻存,采用ELISA测量其脑组织提取液α-突触核蛋白水平,结合既往文献数据估计全脑α-突触核蛋白表达水平,并结合不同取血部位α-突触核蛋白表达差异,计算外周系统对脑源性α-突触核蛋白的清除速率。同时,采集分析患者血常规、肝功能、肾功能等临床检测主要指标,通CL13900分子式过相关性分析等,探讨不同外周脏器功能与脑源性α-突触核蛋白外周途径清除能力的相关性,探讨外周系统清除脑源性α-突触核蛋白的影响因素。3.血液α-突触核蛋白与帕金森病患者肝肾功能相关性的验证研究共纳入118例帕金森病患者与86例年龄性别匹配的健康对照,采集外周静脉血冻存,采用ELISA测量其血液的α-突触核蛋白水平,检测血液血常规、肝功能、肾功能,分析帕金森病患者血常规、肝功能和肾功能指标的变化及其与血液α-突触核蛋白水平的相关性。结果1.生理条件下不同部位血液α-突触核蛋白水平比较(1)上腔静脉处血液α-突触核蛋白水平明显而且显著高于下腔静脉处血液α-突触核蛋白水平,提示从中枢神经系统代谢后的血液α-突触核蛋白水平显著高于从腹腔脏器代谢后的血液α-突触核蛋白水平;(2)股动脉处血液α-突触核蛋白水平显著高于下腔静脉处血液α-突触核蛋白水平,表明在腹腔脏器的体循环过程中,血液内的α-突触核蛋白明显减少。(3)股静脉处血液α-突触核蛋白水平显著高于下腔静脉处血液α-突触核蛋白水平,而股动脉和股静脉间血液α-突触核蛋白水平无明显差异,提示腹腔脏器有能力代谢α-突触核蛋白。2.外周途径清除脑内α-突触核蛋白的清除速率和影响因素粗略估测中枢神经系统α-突触核蛋白的清除速率为3182ng/min,而为外周器官和组织α-突触核蛋白的清除速率为18126ng/min。血常规指标和肝功能指标与血液V-A差异水平无明显相关。肾功能指标中GFR与V-A差异呈显著性正相关(p=0.0272)。3.外周血液α-突触核蛋白与血液检测指标相关性的临床探索PD患者与健康对照间血液α-突触核蛋白水平并未存在显著差异(P=0.0AY-22989核磁769),PD组患者白细胞和单核细胞总数显著低于正常对照(P=0.0364,P=0.0365),PD组人群天门冬氨酸转移酶水平显著低于对照组(P=0.0029),同时尿素和肌酐水平显著高于对照组(P=0.0071和P=0.0163)。PD组血液α-突触核蛋白水平与血常规和肝肾功各项指标均无显著相关。全文结论1,生理条件下,机体外周系统对脑源性α-突触核蛋白具有清除Strategic feeding of probiotic作用。腹腔脏器可能是α-突触核蛋白外周清除的重要部位。2,外周途径清除血液中α-突触核蛋白的能力与肾小球滤过率正相关,提示肾脏为脑源性α-突触核蛋白外周清除的潜在脏器。