肠道是畜禽营养物质消化吸收以及发挥免BLZ945纯度疫作用的重要器官,肠道健康对畜牧生产具有重要意义。在养殖过程中,断奶应激会改变仔猪肠道形态和功能,并引起肠道屏障功能损伤和肠道炎症,造成仔猪腹泻,因而改善仔猪肠道屏障功能在一定程度上可以提高猪场生产和经济效益。丁香酚由于具有抑菌、抗炎、抗氧化、增强动物生长性能等优点而广泛受到关注。本研究以120头健康断奶仔猪(8.9±0.2 kg)和肠道上皮细胞为试验对象,利用荧光定量PCR,蛋白免疫Trichostatin A印迹,苏木素/伊红染色,16s微生物测序,酶联免疫吸附等方法研究丁香酚对仔猪肠道屏障功能,氧化应激以及炎症的改善作用。主要研究结果如下:1.日粮添加丁香酚改善断奶仔猪生长性能,缓解脂多糖(LPS)诱导的氧化应激和炎症。(1)日粮中添加丁香酚相较对照组显著增加仔猪平均日增重,降低料重比(P<0.01);(2)丁香酚组相较对照组显著增加血清中抗氧化酶谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性,同时增加总抗氧化能(T-AOC)的含量(P<0.05);(3)丁香酚+LPS组和LPS组相比,显著下调(P<0.01)仔猪血清中的白介素(IL)-1β和肿瘤坏死因子α(TNF-α)炎性因子的表达。(4)丁香酚+LPS组相较LPS组,显著下调了促凋亡因子Bcl-2-Associated X(Bax)蛋白的相对表达量(P<0.01),上调抑凋亡因子B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)蛋白的相对表达量(P<0.05)。2.日粮中添加丁香酚增加肠道有益菌的相对丰度,缓解LPS诱导断奶仔猪肠道屏障功能bacteriochlorophyll biosynthesis损伤。(1)日粮中添加丁香酚增加了绒腺比(P<0.01)。丁香酚+LPS组显著缓解由LPS引起的闭孔小带蛋白-1(ZO-1)基因和蛋白表达的下降(P<0.01)。(2)日粮中添加丁香酚增加了肠道有益菌的相对丰度,在一定程度上改善了肠道微生物区系。与对照组相比,LPS组提高弯曲杆菌属的相对丰度,降低厚壁菌门的相对丰度(P<0.05)。在日粮中添加丁香酚增加了肠道中厚壁菌门的相对丰度(P<0.05)。3.丁香酚缓解LPS诱导仔猪肠道上皮细胞炎症和肠道屏障损伤。(1)确定了丁香酚对肠道上皮细胞的最适作用浓度以及LPS对肠道上皮细胞的刺激浓度和时间:100μM丁香酚预处理细胞24 h,之后用50μg/m L LPS刺激细胞24 h。(2)丁香酚预处理抑制了LPS诱导的肠道上皮细胞TNF-α、IL-1β炎性因子表达的增高(P<0.01)以及Toll样受体-4(TLR4)-核因子(NF)-κB信号通路关键因子TLR4、My D88、NF-κB基因与蛋白相对表达升高(P<0.05)。(3)丁香酚预处理缓解了LPS诱导的肠道上皮细胞屏障因子ZO-1 m RNA和蛋白相对表达量的下降(P<0.01)。综上所述,日粮中添加丁香酚可以提高仔猪生长性能,缓解由LPS诱导造成的氧化应激以及炎症,修复肠道物理屏障损伤,改善肠道微生物区系;同时其可能是通过抑制TLR4-NF-κB信号通路来抑制LPS诱导的炎症。