作为常见的药食同源物质,黄精是中国应用最广泛的植物源食品之一。由于缺少市场的引导性,黄精的相关研究并不充分。为进一步提升黄精的市场价值,对黄精中主要药理活性的成分进行提取,并评估其生物活性,对黄精资源的开发具有Taurine浓度重要意义。本文利用单因素实验结合响应面法,优化提取黄精中皂苷和多糖成分,并探究皂苷粗提物抗炎活性和和多糖粗提物抑癌活性。主要实验结果如下:(1)利用超声辅助提取黄精皂苷,依据单因素实验设计得到的结果,通过响应面法优化。试验对比乙醇浓度、料液比、超声温度和超声时间对皂苷提取率的影响,通过拟合四个因素对黄精皂苷提取率的数学模型发现,影响黄精皂苷提取率的强弱顺序为:乙醇浓度>超声时间>超声温度>料液比。得到的最佳工艺条件为乙醇浓度为73%,料液比为1∶19 g/m L,超声温度为52°C,超声时间为70 min,皂苷提取率为3.2048%。(2)利用脂多糖(LPS)诱导小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7),建立炎症模型评估黄精皂苷的抗炎活性。黄精皂苷在200μg/m L、400μg/m L和800μg/m L的浓度下均能够明显减少RAW264.7细胞内的活性氧(ROS)和一氧化氮(NO)水平(p<0.05)。对细胞因子的测定发现,黄精皂苷在200μg/m L、400μg/m L和800μg/m L的浓度下均能显著减少白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分泌量(p<0.05),显著增加抗炎因子IL购买IACS-10759-10的水平(p<0.05),且抗炎效果与皂苷浓度呈依赖性。结果表明黄精皂苷具有良好的抗炎活性。(3)利用单因素实验结合响应面法,优化高速剪切辅助提取黄精多糖的工艺。试验对比料液比、剪切时间和剪切速率对多糖提取率的影响,通过拟合三个因素对黄精多糖提取率的数学模型发现,影响黄精多糖提取率的强弱顺序为:料液比>剪切速率>剪切时间。进行模型优化,最终确定了黄精多糖最佳提取率工艺参数为:液料比Half-lives of antibiotic1∶45,剪切时间14 min,剪切速率7900 g,多糖提取率为1.0257%。(4)利用人肝癌细胞(HepG2)评估黄精多糖的抑癌活性。黄精多糖以100、200和400μg/m L浓度下分别处理HepG2细胞24、48和72 h。MTT细胞毒理学试验发现三个浓度均在处理72 h时表现出最佳抗肿瘤活性。同时,黄精多糖的浓度与抗肿瘤活性成正相关。划痕实验结果与MTT分析一致,400μg/m L黄精多糖孵育后,细胞间隙距离最大,表明对HepG2细胞的抗增殖效果最佳。对黄精多糖处理后的HepG2细胞形态进行观察,100、200和400μg/m L的浓度下均可促进HepG2细胞凋亡,发生细胞核皱缩和线粒体膜电位降低。经流式细胞仪测定分析,黄精多糖能够干扰HepG2细胞增殖,诱导HepG2细胞G1期阻滞和增加细胞凋亡率。此外,黄精多糖增加内源性凋亡途径中Caspase-9和Caspase-3的活性诱导HepG2细胞凋亡。结果表明黄精多糖具有良好的抑癌活性。