【研究背景】小胶质细胞介导的神经炎症是神经退行性疾病(NDD)最显著的特征之一,包括帕金森病(PD),阿尔兹海默症(AD)和肌萎缩侧索硬化症(ALS)。越来越多的证据表明,小胶质细胞在NDD的发生和发展中发挥着神经保护和损害的双重作用。然而,目前围绕小胶质细胞活化的具体作用机制尚不清楚。近年来,越来越多的研究表明小胶质细胞介导的中枢神经炎症在形成NDD的级联反应的重要始动因素,因此阐述调节小胶质细胞功能和表型似乎是逆转NDD的潜在策略,对于NDD疾病的早期发现、诊断、治疗均具有重要科学意义。【研究目的】小胶质细胞介导的中枢炎症反应在NDD的发生和发展中起到关键作用,然而小胶质细胞活化的机制研究尚不清楚。Lnc RNA和mi RNA作为NDD和免疫炎症反应的重要调控因子。基于原代小胶质细胞测序及文献报道论证,探究MIR155HG/MIR155-5p获悉更多对小GSK2118436化学结构胶质细胞介导的神经免疫应答及神经炎症的调控的作用及其机制。【实验方法】1.分子水平:通过分析静息状态和LPS诱导活化后的原代小胶质细胞的全转录组测序,进一步进行差异分析Lnc RNA(DEG)并且挑选出差异显著的的lnc RNAMIR155HG。通过下调/过表达MIR155HG/MIR155-5P,利用实时荧光定量PCR(RTQPCR)及蛋白免疫印迹技术(Western blot),分析其在小胶质细胞静息及活化后的表达及其中的调控关系。2.细胞水平:通过下调/过表达MIR155HG/MIR155-5P,利用RT-QPCR、Western blot及流式细胞技术检测小胶质细胞活化后的相关分子变化,明确MIR155HG/MIR155-5P在小胶质细胞活化后的作用。3.动物水平:通过立体定向注射慢病毒构建的下调/过表达MIR155HG的C57小鼠,然后通过LPS诱导的PD炎症模型,利用RT-QPCR、Western blot、免疫荧光等技术检测MIR155HG/MIR155-5P的表达及调控的相关分子变化。【研究结果】1.LPS激活TLR4后促进MIR155HG/MIR155-5P的表达,促进小胶质细胞的活non-coding RNA biogenesis化。2.MIR155HG通过STAT1/STAT2通路,从而改变干扰素应答基因(ISG)及炎症因子的表达。3.MIR155-5p调控STAT1/STAT2通路的表达,从而改变干扰素应答基因(ISG)及炎症因子的表达。【结论】MIR155HG/MIR155-5P协同调控小胶质细胞活化后的神经炎症及免疫应答,促进小胶质细胞活化,提示MIR155HG/MIR155-5P可作为神经退行性疾病的潜在治疗靶点及研究方向。