炭黑纳米颗粒暴露对哮喘气道上皮细胞DNA损伤及炎症反应的影响

目的 通过鸡卵清蛋白(OVBiolistic transformationA)联合炭黑纳米颗粒(CBNPs)处理人支气管上皮细胞(16HBE),探讨CBNPs暴露后对哮喘气道上皮细胞DNA损伤及炎症反应的影响。方法 以16HBE细胞为S63845作用研究对象,构建体外哮喘模型。实验先设对照组和OVA(10μg/mL )处理组,处理细胞6、12、24 h,选取炎症反应最明显的时点,用于后续实验;再设对照组,OVA处理组,OVA+炭黑组(40、80μg/mL ),处理细胞24、48、72 h。CCK8法检测细胞活力,荧光定量PBYL719临床试验CR和酶联免疫吸附试验测定细胞因子(IL-4、IL-33、TGF-β)基因和蛋白表达水平;彗星实验检测细胞DNA损伤情况。结果 与对照组相比,OVA处理12h后细胞内IL-4(q=5.313,P=0.026)、IL-33(q=5.060,P=0.035)、TGF-β(q=6.029,P=0.011)的蛋白水平均有明显的上升,而在处理24 h后,仅有24 h OVA组IL-4的蛋白水平较6 h组有明显上升(q=4.909,P=0.041)。进一步联合CBNPs进行暴露,发现随着染毒浓度和时间增加,各组细胞活力均未受明显影响(P>0.05)。与对照组和OVA处理组相比,联合处理细胞后,IL-4的mR NA(F浓度=16.000,P<0.001;F时间=90.700,P<0.001)和蛋白(F浓度=24.361,P<0.001;F时间=74.610,P<0.001)水平随时间和浓度的增加而上调。彗星实验同样发现,评价细胞DNA损伤的主要指标Olive尾矩的水平(F浓度=26.651,P<0.001;F时间=78.910,P<0.001),随时间和浓度的增加而增加。结论 CBNPs暴露可能是通过引起哮喘气道上皮细胞DNA损伤来加重哮喘炎症反应。