类弹性蛋白多肽(elastin-like?polypeptide，ELP)是以五个氨基酸“V-P-G-X-G”作为重复单元的一类多肽，在特定条件下能发生可逆相变聚沉，利用该特性已实现多种蛋白的高效纯化。本研究通过将不同长度的ELP与纳米抗体融合表达，获得了具有温度响应能力的抗黄曲霉毒素B_(1)(aflatoxin?B_(1)，AFB_(1))纳米抗体。采用递归定向连接(recursive?directional?ligation，RDL)克隆得到重组表达载体pET30a-G8-ELP20、pET30a-G8-ELP40、pET30a-G8-ELP60、pET30a-G8-ELP80，分别转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株，表达后经SDSselleck Canagliflozin-PAGE分析显示四种融合蛋白均以不溶性包涵体形式存在于菌体沉淀中，对其进行变性处理后，分别采用稀释复性、可逆相变循环(inverse transition cycling，ITC)纯化、透析复性、柱上复性四种方式对包涵体蛋白进行复性。SDS-PAGE分析四种复性方式分别获得的四种融合蛋白，结果显示其纯度差异不显著，但ITC纯化蛋白得率最高，分别为83%、90.7%、89.5%、88.3%；间接竞争酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)测定复性后融合蛋白活性，结果表明由稀释复性法获得的G8-ELP80重组蛋白IC_(50)最低(4.35?ng/mL)；浊度分析法测得融合不同长度ELP标签纳米抗体的相变温度(The?phase?transition?temperPuromycinature，Tt)分别为45 ℃、38 ℃、32 ℃、28 ℃；圆二色谱分析显示四种融合蛋白二级结构均以β折叠、β转角为主，与预估结果相符。本研究将ELP标签与抗AFB_(1)纳米抗体融合表达，实现了纳米抗体的温度刺激响应性，系统比较了不同复性方式对蛋白特性的影响，tick-borne infections为后续AFB_(1)检测分析提供了基础。