目的探讨氯胺酮通过调节LncRNA PVT1/MYC轴对乳腺癌(breast cancer, BC)细胞干性维持的影响。方法采用不同浓度的氯胺酮(0、5、10或20 μg/ml)处理BC细胞系MCF-7, 或以20 μg/mlC59氯胺酮处理MCF-7细胞不同时间(0、24、48或72 h)。此外, 干预MCF-7细胞中的METTL3、PVT1和MYC的表达并且将MCF-7细胞分组。采用球体形成实验Endomyocardial biopsy检测细胞球体形成的数量。Western blot检测各组细胞干细胞特性相关分子(OCT4和SOX2)的表达水平。采用qRT-PCR法检测PVT1/MYC在各组细胞中的表达水平。MeR-IP分析用于检测PVT1的m6A甲基化水平。结果氯胺酮以剂量和时间依赖性方式显著减少BC细胞球体形成数目, 抑制OCT4和SOX2的蛋白表达水平(均P0.05)。氯胺酮通过调节METTL3介导PVT1的m6A水平, 与氯胺酮+pcDNA3.1组相比(207±11), 氯胺酮+PVT1组(311±15)细胞的球体形成数目明显增加(t=12.06,P0.001), OCT4和SOX2蛋白表达水平升高(t=9.68,P0.001;t=11.50,P0.001)。MYC是PVT1的下游调节基因, 与氯胺酮+PVT1+si-NC组相比, 氯胺LY-188011配制酮+PVT1+si-MYC组细胞的球体形成数目明显减少(t=0.54, P=0.005), OCT4和SOX2蛋白表达水平降低(t=5.98, P=0.004;t=7.33, P=0.002)。结论氯胺酮通过抑制PVT1的m6A水平介导PVT1及其下游基因MYC的表达, 进而抑制BC细胞干细胞样特征。