目的:通过建立暴露于纳米Si O2(SiNPs)的SH-SY5Y细胞体外实验模型,证实SiNPs对细胞具有毒性作用,明确SiNPs暴露可以诱导SH-SY5Y细胞发生氧化应激和Parthanatos,揭示AIF/PARP在SiNPs诱导的神经细胞氧化应激反应和Parthanatos中的作用及机制,为更深一步阐述SiNPs神经毒性作用和毒性机制提供实验依据。方法:细胞实验模型选择人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y,受试物为SiNPs,暴露剂量分为0μg/m L、3.125μg/m L、6.25μg/m L、12.5μg/m L、25.0μg/m L和50.0μg/m L,作用时间为24 h。采用透射电子显微镜表征SiNPs的粒径;采用Zeta电位分析仪检测SiNPs分散性和稳定性;采用倒置荧光显微镜观察细胞生长状态;采用MTT检测法检测细胞存活率;用荧光Immunology & Inflammation抑制剂显微镜观察和流式细胞术检测细胞内DCFH-DA标记的ROS;流式细胞术检测细胞内Ca2+水平;Hoechst33342染色和TUNEL染色法观察细胞凋亡;生物化学检测法检测细胞内SOD酶和ATP酶活性以及ATP含量变化;Western Blot法检测细胞内Parthanatos和Caspase凋亡通路相关蛋白的表达;免疫荧光技术观察SiNPs诱导细胞PaHuman hepatic carcinoma cellrthanatos相关蛋白的分布。结果:1.SiNPs对SH-SY5Y细胞生长状态和存活率的影响倒置显微镜观察SH-SY5Y细胞的生长状态,对照组细胞密度均匀,细胞呈纺锤型。而随着SiNPs暴露剂量的增加,暴露组细胞触角消失,形态收缩变圆,细胞数量逐渐减少。MTT结果显示不同浓度SiNPs暴露细胞24 h,细胞存活率随染毒剂量的增加而呈现下降趋势。尤其是25.0μg/m L和50https://www.selleck.cn/products/forskolin.html.0μg/m L剂量组(P<0.05)。2.SiNPs对SH-SY5Y细胞内ROS和Ca2+含量的影响荧光显微镜观察和流式细胞术检测细胞内ROS水平变化。随着SiNPs染毒剂量的逐渐增加,细胞内绿色荧光逐渐增加,表明细胞内ROS的水平逐渐升高,尤其是高剂量组更为明显(P<0.05)。流式细胞术检测细胞内Ca2+含量,随着SiNPs染毒剂量的逐渐增加,细胞内Ca2+的浓度逐渐增加,尤其50.0μg/m L染毒剂量组的增加更为明显,差异具有统...