Author: admin

目的 探究A类清道夫受体1(MSR1)在矽肺小鼠肺组织内的表达及其在小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7)中介导的炎症和脂质代谢的作用。方法 24只C57BL/6雄性小鼠Ipatasertib浓度随机分为对照组、染毒7 d组、染毒14 d组和染毒28 d组，每组6只。RAW264.7细胞分为对照组、siRNA-MSR1组、SiO_2组、siRNA-MSR1+SiO_2刺PLX5622化学结构激组。通过苏木精-伊红(HE)染色和Van Gieson(VG)染色观察小鼠肺组织病理变化；油红O染色镜下观察脂质蓄积情况；免疫组织化学染色(IHC)检测MSR1的表达以及定位；免疫印迹法检测MSR1、炎症因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-6、IL-1β的表达。结果 与对照组相比，HE和VG染色结果显示矽肺小鼠肺组织中炎性细胞聚集，胶原分布增加；IHC结果显示，矽肺小鼠模型中MSR1的表达上调；油红O染色结果显示小鼠肺组织出现大量橙红色脂滴；免疫印迹结果显示，与对照组比较，矽肺小鼠肺组织中MSR1、TNF-α、IL-6、IL-1β表达均上调(P<0.05)。与对照组比较，SiO_2细胞刺激组MSR1的表达上调，siRNA-MSR1组的MSR1表达降低(P<0.05),SiO_2组细胞内出现橙红色脂滴，siRNA-MSR1+SiO_2刺激组脂滴蓄积程度低于SiO_2组(P<0.01);ELISA结果显示SiO_2细胞刺激组TNF-α、IL-6、IL-1β表达上调(P<0.05)。与SiO_2组比较，siRNA-MSR1+SiO_2刺激组的TNF-α、IL-6、IL-1β表达下调(P<0.05)。结论 MSR1参与了矽肺小鼠肺组织和细胞内脂质成分的调控及炎症因子的释放；抑制MSR1的表达可以拮抗巨噬细胞的炎症反应和脂质异常蓄Evolution of viral infections积。MSR1可能是今后干预矽肺病程进展的潜在治疗靶点。

孤独症是以社交交流障碍和重复刻板行为或局限兴趣为主要特征的神经发育障碍,是一个长期遭受污名(歧视和偏见)的疾病。这种污名使孤独症儿童在学校学习和未来社会就业等方面受到排斥的风险更高,严重影响他们的身心健康。因此,探究孤独症污名的影响因素有利于了解污名的产生机制并进行干预,以改善孤独症儿童的生活环境,促进他们的身心健康的发展。本研究探究孤独症标签化的疾病诊断结果和异常行为对污名的影响。同时,本研究还测量了人们对孤独症儿童的道德判断和共情以全面了解大众对孤独症的认知、情感和行为反应。实验1探究诊断知情的影响。60NVP-TNKS656名被试阅读一名被诊断为孤独症的儿童(未描述孤独症的典型行为特征)的信息和一名正mastitis biomarker常发育儿童的信息,随后完成对这两名儿童的社会距离、道德评价和共情的问卷调查。实验2探究行为特征的影响。60名被试阅读一名具有孤独症典型行为特征的儿童(未提供孤独症的诊断知情)的信息和一名正常发育儿童的信息,随后完成对这两名儿童的社会距离、道德评价和共情的问卷调查。结果发现,相比于正常发育儿童,被试对被诊断为孤独症(实验1)或是具有孤独症行为特征(实验2)的儿童的社会距离更远(社会回避),即存在污名。然而,当描述儿童做了不道德的事以及受伤时,相比于正常发育儿童,被试对被诊断为孤独症或具有孤独症行为特征的儿童的道德评价更高,并且更共情。进一步对比实验1和实验2的结果发现与具有孤独症行为特征的儿童相比,被试对被诊断为孤独症的儿童的社会距离更近,认为他们更有道德,并更共情他们。这些结果说明孤独症诊断知情和行为特征均会影响大众对孤独症儿童的污名、道德判断和共情:人们对孤独症儿童”既爱又憎”。虽然孤独症诊断知情和行为特征会让人们对孤独症儿童更共情、更认为有道德,但是更不愿意接近他们。同时,揭露孤独Alpelisib症的诊断可能能降低孤独症的污名。

目的:抑郁与高血压发生发展互为因果,互相影响,形成恶性循环使病情加重,本研究的目的在于探究中药治疗高血压合并抑郁症的用药规律,预测核心药物组合的潜在作用机制,为后续研究实验和临床应用提供数据依据和参考。方法:本研究采用中英文数据库检索中医药治疗高血压合并抑郁症的相关文献,构建高血压合并抑郁症处方数据库,对数据库纳入的中药进行药物分类、性味归经的频次分析。使用SPSS Clementine 12.0软件对药物进行关联规则分析,采用主成分分析法、组间联接法进行因子分析和系统聚类分析。以“depression”和“hypertension”作为关键词,从TCMSP数据库和OMIM等数据库中分别electron mediators获取药物与高血压合并抑郁症相关的靶点,取交集靶点后上传至STRING数据库构建蛋白质—蛋白质互作网络,导入Cytoscape 3.7.2软件中,运用Network Analyzer工具计算网络拓扑参数并得到关键靶点,最后通过分子对接技术对关键成分与靶点进行反向验证。结果:本研究通过文献计量和数据挖掘发现高血压合并抑郁症的高发对象为老年人,且最受关注的中药复方为归脾汤。本研究利用网络药理学预测核心药ABT-199生产商物组合的潜在作用靶点和通路,共获得高血压的1568个疾病靶点以及抑郁症的2124个疾病靶点,筛选出共有基因靶点248个获悉更多,核心靶点主要有 INS、IL6、STAT3、TNF、AKT1、VEGFA、ALB、MAPK3、EGFR、JUN,核心药物化学成分有槲皮素,豆甾醇,山奈酚,三磷酸腺苷,姜酮等。GO功能富集分析结果显示生物过程主要包括基因表达的正向调控、对脂多糖的反应等,而KEGG富集通路主要包括神经活性配体受体相互作用信号通路、MAPK信号通路和钙信号通路。结论:中药治疗高血压合并抑郁症的核心药物主要出自归脾汤,确定归脾汤中草药相互作用的机制有助于临床更好地治疗和预防高血压合并抑郁,改善患者的整体健康状况。

干旱会降低土壤环境水势,使植物细胞失水并受到氧化损伤,是影响水稻生长和产量的重要因素。找寻水稻抗旱基因并研究其功能,培育节水抗旱的水稻品种对保证水稻稳产高产有着重要意义。已有研究表明水稻Gα蛋白RGA1参与响应干旱胁迫,但其响应机制尚不明确。实验室前期通过水稻cDNA文库筛选到RGA1的一个互作蛋白BCAT4。本研究利用双分子荧光互补技术验证RGA1和BCAT4的互作,并以实验室留存的野生型NIP、BCAT4突变体B1、RGA1突变体R5为材料,以B1和R5为亲本杂交获得双突变体BR、以转基因技术获得RGA1过表达株系ROE和BCAT4的过表达株系BOE,采用苗期PEG模拟干旱胁迫和分蘖期干湿交替灌溉处理,观察不同基因型水稻(野生型NIP、单突变体B1和R5、双突变体BR、以及过表达株系BOE和ROE)的表型,测定抗旱相关的生理与分子指标以及产量,对BCAT4和RGA1蛋白响应干旱胁迫的机制进行了研究,结果如下:(1)生信分析表明:BCAT4基因的启动子序列存在多个ABRE脱水响应元件,可能受ABA诱导;BCAT4在水稻全生育期均有表达,在营养生长中期和生殖生长初期表达量较高;STRING分析BCAT4和RGA1的互作网络包括Gα、Gβ蛋白和5个参与BCAAs代谢的酶。进一步构建了双分子荧光互补重组载体,利用BiFC技术成功在烟草叶片细胞中验证了 BCAT4和RGA1蛋白在细胞膜上发生相互作用。(2)利用转基因技术获得了BCAT4过表达株系BOE和RGA1过表达株系ROE,qPCR结果表明BOE的BCAT4基因相对表达量上升了 7.89倍,ROE的RGA1基因相对表达量上升了 3.65倍。以B1和R5为亲本杂交获得BCAT4和RGA1双突变体BR,测序表明BR的BCAT4和RGA1基因均发生了突变。(3)对照条件下,与NIP相比,RGA1基因表达量在BOE中显著下降,在B1中变化不显著,BCAT4基因表达量在R5显著上升,在ROE中变化不显著。干旱胁迫处理后,RGA1与BCAT4的基因表达量均显著增加。与NIP相比,RGA1的表达量在B1中上升,在BOE中下降;BCAT4的表达量在R5中上升,在ROE中变化不显著。(4)水稻幼苗PEG模拟干旱试验结果表明,BCAT4缺失显著降低了干旱胁迫下水稻的BCAT酶活、BCAAs含量、内源ABA含量,抗逆相关基因表达量和生理指标,使得水稻的苗期干旱存活率降低了 38.52%;BCAT4的过表达则提高了水稻幼苗的抗旱性。RGA1的缺失降低苗高,增大根冠比而改变水稻株型增强了耐旱性,而RGA1的过表达对上述大部分指标影响不显著。抗逆相关形态和生理指标的主成分分析及不同基因型水稻的耐旱综合因子得分结果表明,与NIP相stent graft infection比,B1的因子得分降低了 5.78%,BOE的因子得分上升了 5.21%,R5的因子得分上升了 10.2%,BR的因子得分上升了 11.45%,ROE的因子得分与NIP相近。RGA1对水INCB018424浓度稻抗旱性的削弱效应大于BCAT4对水稻抗旱性的增强效应。(5)分蘖期干湿交替灌溉处理后,与NIP相比,B1的生长受显著抑制,其产量减少了 12.56%;BOE的地上部和根系干重和总叶面积指数分别上升了 5.71%、14.58%和7.33%,但产量变化不显著;单突变体R5和双突变体BR的生长和产量均显著受抑制;ROE的生长和产量变化不显著。综上,RGA1则通过影响苗高和根冠比等以改变Bucladesine水稻株型而在水稻干旱响应中起负调控的作用,BCAT4则正调控水稻响应干旱胁迫的过程,BCAT4和RGA1可能在细胞膜上产生互作,这两个蛋白可能通过BCAAs的代谢过程产生联系,主成分分析结果表明RGA1对水稻抗旱性的负效应大于BCAT4的正效应,两者负协同水稻对干旱胁迫的响应过程。该结果可为进一步研究水稻BCAT4蛋白和RGA1蛋白的功能及水稻抗旱育种提供一定的理论与实践依据。

癌症是影响人类健康的主要威胁,提高治疗效率和减少治疗副作用成为治疗癌症的迫切需求。光动力学疗法(PDT)由于具有非侵入性、安全性和高选择性等优点,因寻找更多而受到越来越多的研究人员关注。作为一种有效的癌症辅助治疗手段,PDT治疗癌症有利于提高癌症患者生活质量。在PDT过程中,光敏剂(PSs)经过光照后跃迁到最低激发单重态(S_1),通过系间交叉(ISC)迅速跃迁到具有较长寿命的激发三重态(T_1),与分子氧作用生成具有细胞毒性的活性氧(ROS)。然而传统光敏剂合成困难,分子结构不稳定,斯托克斯位移较小,水溶性差且具有暗毒性,这些缺点导致它们在PDT过程中不能有效的发挥抗肿瘤效果。在大共轭体系中引入重原子Se有利于自旋轨道耦合(SOC)介导的ISC,因而能有效提升PSs的T_1态产率,增加Rimmediate recallOS生成量,使PSs更好的发挥PDT效果。由于引入重原子硒的合成较为复杂,所以开发合成简单、ROS生成效率高的含硒有机小分子光敏剂具有重要意义。本文合成了三种新型电子推拉结构的有机小分子光敏剂BSN、NSN与PSN。BSN、NSN和PSN能产生活性氧(ROS),其中BSN、NSN的ROS生成能力强于PSN。BSN、NSN和PSN均能产生单线态氧(~1O_2),计算得出BSN、NSN和PSN的单线态氧量子产率(Φ_Δ)分别为0.089、0.086和0.13。其中BSN与PSN均具有产生羟基自由基(·OH)的能力,且BSN的·OH生成能力强于PSN。BSN、NSN和PSN在线粒体和溶酶体上累积,光照下诱导ROS生成,引起线粒体膜电位下降,诱发细胞凋亡。MTT实验表明BSN、NSN和PSN在正常细胞与癌细胞中暗毒性低,光毒性强。其中,BSN在癌细胞中的杀伤效果最佳,2μM的BSN在光照下使Hep G2细胞存活率下降至90%,表现出良好的PDT效果。为提升BSN的生物相容性和靶向能力,将BSN与DSPE-PEG_(2000)按1:1、1:2、1:3、1:4、1:5的质量比进行包裹,得到BSN@NP1、BSN@NP2、BSN@NP3、BSN@NP4和BSN@NP5。扫描电子显微镜(SEM)显示不同比例合成的纳米结构为棒状或不规则聚集体。以DPBF为指示剂计算得出BSN@NPs的Φ_Δ分别为0.25、0.23、0.46、0.41、0.36,包裹后的材料~1O_2生成效率明显提升。对比测试结果我们发现,按1:3质量比投料合成的纳米结构BSN@NP3分散均匀、结构稳定且~1O_2量子产率高。TMB显色实验表明其能够在肿瘤微酸性环境下光照诱导产生·OH,实验结果表明BSN@NP3可作为优良的光敏剂,兼具I型和II型光敏剂性能。分别在正常细胞与癌细胞中孵育后发现BSN@NP3能在癌细胞累积。BSN@NP3能定位到癌细胞的线粒体,光照下产生的ROS诱发细胞凋亡,引起线粒体损伤。加入30μM的BSN@NP3后光照,正常细胞存活率为90%,癌细胞存活率低至10%,实验表明,BSN@NP3能有效提升BSN对www.selleck.cn/products/MDV3100肿瘤细胞的靶向能力,降低对正常细胞的光毒性,在PDT过程中实现对肿瘤细胞的高选择性。基于电子推拉结构合成的含硒有机小分子光敏剂BSN、NSN与PSN均能在光照下产生ROS,其中BSN光毒性更强,对细胞的杀伤效果最好。通过DSPE-PEG_(2000)包裹后形成纳米结构增加了BSN的生物相容性,其中1:3投料合成的BSN@NP3不仅能提高~1O_2量子产率和·OH生成能力,同时增强了肿瘤靶向,有效提升了小分子光敏剂BSN的PDT性能。

目的 探讨自体动静脉内瘘（AVF）狭窄病变经皮腔内球囊扩张血管成形术（PTA）后初级通畅时间的影响因素。方法 收集2016年1月至2020年12月于重庆医科大学附属第一医院连续2次以上进行PTA治疗的202例AVF狭窄患者的临床资料，测量患者数字减影血管造影（DSA）下的狭窄部位、狭窄长度、狭窄程度以及治疗后的残余狭窄情况，分析AVF狭窄患者PTA术后对初级通畅时间的影响因素。结果 PTA术后6、12个月，202例AVF患者293处狭窄病变初级通畅率分别为62.4%(126/202)、23.8%(48/202)，不同性别、年龄、基础疾病、狭窄病变数量、狭窄程度、狭窄长度及球囊扩张后残余狭窄病变的初级通畅时间比较，差异均无统计学意义（P﹥0.05）；不同狭窄部位的初级通畅时间比较，差异有统计学意义（P﹤0.05）。128例单一病变患者分析ZD1839供应商结果显示，近吻合口静脉狭窄与回流静CH-223191 MW脉段狭窄的初级通畅时间比较，差异有统计学意义（P﹤0.05）；不同性别、年龄、基础疾病、狭窄长度、狭窄程度、残余狭窄病变的初级通畅时间比较，差异均无统计学意义（P﹥0.05）。202例患者中，59例患者有连续3次PTA治疗记录，按照首次PTA治疗后不同初级通畅时间将其分为<120 d组（n=20）、120～200 d组（n=21）、﹥200 d组（n=18），二次PTA后的初级Global oncology通畅时间分别为125.00(88.75,205.75)、200.00(122.00,299.00)、217.00(134.50,412.50)d,3组患者二次PTA后的初级通畅时间比较，差异有统计学意义（P﹤0.05）。结论 狭窄长度、狭窄程度对PTA治疗预后均无影响，病变位于回流静脉、首次PTA治疗后初级通畅时间短是预后不佳的重要因素，针对上述情况有针对性地采取个体化治疗方案，可能为患者带来更多收益。

目的 探究促性腺激素释放激素类似物联合生长激素对性早熟Navitoclax女童性激素和骨代谢的影响。方法 选取2017年1月—2020年1月金华市中心医院收治的性早熟女童54例为研究对象，根据随机数字表法将其分为对照组(27例)和观察组(27例),对照组患儿给予促性腺激素释放激素类似物进行治疗，观察组患儿在其基础上加用生长激素。比较两组患儿治疗前后性激素水平、骨代谢相关指标水平、性发育相关指标水平及生长相关指标水平。结果 治疗前，对照组和观察组患儿卵泡刺激素(FSH)[(12.95±3.86)IU/L、(12.76±3.82)IU/L]、黄体生成素(LH)[(27.15±5.43)IU/L、(27.21±5.44)IU/L]及血清雌二醇(E_2)[(40.27±16.11)pmol/L、(40.55±16.23)pmol/L]水平比较，差异均无统计学意义(t=0.182、0.484及0.064,均P>0.05);治疗后6个月和12个月，两组患儿FSH、LH及E_2水平均显著低于治疗前，且观察组患儿FSH[治疗后6个月(3.41±1.72)IU/L、治疗后12个月(0.65±0.58)IU/L]、LH[治疗后6个月(5.25±1.07)IU/L、治疗后12个月(0.59±0.14)IU/L]及E_2水平[治疗后6个月(26.14±6.99)pmol/L、治疗后12个月(19.15±5.49)pmol/L]均显著低于对照组[治疗后6个月(4.53±2.27)IU/L、(7.27±1.65)IU/L及(30.52±17.83)pmol/L,治疗后12个月(1.04±0.75)IU/L、(1.01±0.21)IU/L及(23.47±6.51)pmol/L],差异均有统计学意义(治疗后6个月t=2.043、7.980及2.168,治疗后12个月t=2.137、8.647及2.636,均P<0.05)。治疗前，两组患儿Ⅰ型前胶原羧基端肽(PICP)、胰岛素生长因子-1(IGF-1)、Ⅰ型胶原羧基端肽β特殊Growth media序列(β-CTX)及骨钙素N端中分子片段(N-MID)水平比较，差异均无统计学意义(均P>0.05);治疗后6个月，两组患儿PICP、IGF-1及N-MID水平比较，差异均无统计学意义(均P>0.05),观察组患儿β-CTX水平显著高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05);治疗后12个月，两组患儿PICP、N-MID水平比较，差异均无统计学意义(均P>0.05),观察组患儿IGF-1、β-CTX水平显著均高于对照组，差异均有统计学意义(均P<0.05)。组内比较，对照组患儿治疗前后β-CTX和IGF-1水平比较，差异无统计学意义(P>0.05),PICP、N-MID水平显著降低，差异均有统计学意义(均P<0.05);观察组患儿治疗前后IGF-1水平比较，差异无统计学意义(P>0.05),PICP、N-MIDLEE011 molecular weight水平显著降低，β-CTX水平显著升高，差异均有统计学意义(均P<0.05)。治疗前，两组患儿Tanner分级、子宫体积及卵巢体积比较，差异均无统计学意义(均P>0.05);治疗后6个月和12个月，两组患儿Tanner分级、子宫体积及卵巢体积均显著低于治疗前，且观察组患儿Tanner分级、子宫体积及卵巢体积均显著低于对照组，差异均有统计学意义(均P<0.05)。治疗前，两组患儿BA、 PAH及HtSDSBA比较，差异均无统计学意义(均P>0.05);治疗后6个月和12个月，两组患儿BA比较，差异无统计学意义(P>0.05),观察组患儿PAH显著高于对照组，HtSDSBA显著低于对照组，差异均有统计学意义(均P<0.05)。组内比较，两组患儿治疗前后PAH、HtSDSBA均变化显著，差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 促性腺激素释放激素类似物联合生长激素能有效降低性早熟女童性激素水平，改善其骨代谢指标，抑制患儿性发育，促进患儿生长，疗效较好。

目的：本文旨在探讨TRIM24调控巨噬细胞极化在小鼠病毒性心肌炎（VM）中的作用及初步分子机制。方法：建立柯萨奇病毒(CVB3)诱导的VM小鼠模型，检测心肌组织中TRIM24的表达。体内实验观察CL13900TRIM24抑制对VM小鼠心肌炎严重性及心脏浸润巨噬细胞极化表型的影响。建立小鼠骨髓来源巨噬细胞（BMDMs）体外极化模型，观察TRIM24抑制在BMDMs向M1及M2极化中的作用，及其对BMDMs吞噬和杀菌功能的Immune check point and T cell survival影响。最后检测TRIM24抑制对STAT6总蛋白及磷酸化水平的影响。结果：TRIM24在VM小鼠心肌组织中显著高表达（P<0.001），抑制TRIM24能有效缓解VM，并促进心脏浸润巨噬细胞向M2极化。体外实验证实，TRIM24在BMDMs向selleck激酶抑制剂M2极化过程中显著下调（P<0.01），抑制TRIM24表达能促进巨噬细胞向M2极化并抑制其M1表型，同时伴随STAT6磷酸化水平显著升高（P<0.01）。结论：TRIM24抑制可通过激活STAT6信号通路调控巨噬细胞M2极化缓解VM。

在过去的几年中,诸如光热治疗(PTT)和光动力治疗(PDT)的光疗法在癌症治疗中得到了迅速发展。采用近红外荧光成像实时监控药物在肿瘤部位的积累与代谢,并在荧光成像的引导下进行近红外光激发,从而精确控制肿瘤部位的光治疗,是肿瘤治疗的重要手段。然而,对于成像引导的光治疗还存在许多问题:如有机探针的疏水性、靶向性差、信噪比低及较浅的组织穿透深度等。纳米材料由于其优异的特性,可将具有各种功能的化学分子结合,构建出多功能水溶性纳米探针,实现药物在体内的可CX-5461采购视化递送以及高效的光学治疗。氟硼二吡咯(BODIPY)衍生物是一类重要的有机染料,由于其独特的化学和物理特性以及丰富的结构修饰在生物成像和癌症治疗中得到了广泛的应用。在本论文中,通过在BODIPY骨架引入不同的修饰基团,一方面实现了更优异的荧光成像性能;另一方面,通过改变BODIPY分子的激发态弛豫路径,产生活性氧物质或者热量分别用于PDT和PTT。结合响应性的两亲聚多肽构建出的具有成像及光疗性能的智能纳米粒子在肿瘤成像及治疗中具有良好的应用。大多数荧光团的荧光成像都会受到指定区域以外的非特异性背景信号的干扰,而差的成像对比度会影响肿瘤治疗的准确性。在论文第二章中,我们通过在BODIPY骨架中位引入二甲氨基苯基,设计出酸性条件下可激活荧光及PDT功效的BODIPY染料(BDPI)。重原子碘的引入,使得BDPI的单线态氧(1O2)量子产率高达0.818。用pH敏感的两亲性聚多肽POEMA23-PE9包裹BDPI,获得双pH响应的智能纳米粒子(BDPINPs)。体内研究表明,BDPINPs在肿瘤酸性微环境中能够解体并释放出BDPI分子。BDPI在溶酶体(pH=4.0-5.5)中能够发生质子化,实现肿瘤内近红外荧光的“关-开”转换。同时促进1O2的产生,实现了对肿瘤的特异性和选择性成像及治疗。与近红外光(NIR,650-1700 nm)成像相比,近红外第LGX818体内二窗口(NIR-II,1000-1700nm)成像,可以实现更高的荧光成像对比度及更深的穿透深度。调整染料聚集方式被证明是实现吸收和发射光谱红移的有效策略。在第三章中,我们通过半乳糖分子修饰的BODIPY(Gal-BDP)利用分子间氢键(H-bond)和π-π相互作用成功在水中形成Gal-BDP的J-聚集体(J-NPs),J-NPs具有更长的吸收(λabs=815 nm)和发射(λem=1060 nm)波长。在808 nm激光下,J-NPs的光热转换效率(PCE)高达55%。此外,由于半乳糖对肝癌细胞的靶向作用,通过NIR-Ⅱ荧光在细胞水平上观察到肝癌细胞对颗粒更快的吸收。将J-NPs注入肿瘤后,实现NIR-Ⅱ荧光成像辅助的肝癌肿瘤的光热治疗。然而,Gal-BDP J-NPs的稳定性问题限制其进一步应用。同时,我们发现Gal-BDP的聚集方式可通过溶液的pH进行调控。所以,在第四章experimental autoimmune myocarditis中,我们分别用不同聚合物包裹Gal-BDP后形成了以H-聚集为主的P-ipr@Gal NPs和以J-聚集为主的PAsp@Gal NPs。在肿瘤酸性微环境下,由于聚合物载体P-ipr及染料分子Gal-BDP的酸响应性,P-ipr@Gal NPs实现了从H-聚集到J-聚集的转变。该过程明显增强了红移的吸收和荧光发射(λabs=830 nm,λem=1060 nm),同时伴随着PCE的提高,实现了小鼠酸性肿瘤区域特异性的NIR-Ⅱ成像及其引导的光热治疗。此外,PAsp@Gal纳米粒子具有良好的J-聚集特性,在肿瘤的NIR-Ⅱ荧光成像和PTT治疗(PCE=46%)方面具有很好的应用。对于PTT来说,通常需要将肿瘤组织温度升高到50℃以上,而如此高的温度可能会对正常的组织造成损伤。因此,相对低温的光热疗法(MPTT)受到越来越多的关注。在第五章中,我们将具有良好NIR-Ⅰ/Ⅱ荧光及光疗性能的探针Ahx-BDP和抗糖酵解试剂2-脱氧-D-葡萄糖(2DG)共同引入到两亲性聚多肽侧链中,制备了多功能的纳米粒子pDG@Ahx。该纳米粒子不仅可以实现NIR-Ⅱ荧光引导的不同激发波长(730 nm,808 nm)下的PDT/PTT协同治疗,而且可以在酸性条件2DG释放的情况下,增强肿瘤对温度的热敏性,达到饥饿/MPTT/PDT的协同疗效。活体实验表明,在730nm光照下,pDG@Ahx可以在温和光热条件下实现有效的肿瘤治疗。在整篇论文中,我们通过对BODIPY骨架和两亲性聚多肽载体的设计,制备出一系列具有优异成像和治疗性能的智能纳米体系,在肿瘤的实时可视化和原位诊疗方面具有很好的应用前景。

脓毒症(Sepsis)是一种由宿主对感染反应失调导致的危及生命的器官功能障碍综合症。脓毒症的过度炎症阶段发生的细胞因子风暴会导致多器官功能障碍甚至机体死亡。目前,开发脓毒症治疗药物仍面临巨大挑战。研究表明,喜树碱(Camptothecin,CPT)可以通过抑制拓扑异构酶I(Top1)的活性减轻炎症反应。但溶解性差、对非靶细胞的高毒性和体内活性低限制了CPT的临床应用。大量研究表明构建CPT前药是提高其治疗活性的有效策略之一。L型氨基酸的生物相容性较好,并且能够大大提高母体药物的溶解性,因此被广泛应用于前药的研究。十八烷二酸常用于药物的修饰,以改善药物的药代动力学特征,提高药物的治疗活性。因此,本研究将5种L型氨基酸(谷氨酸、精氨酸、赖氨酸、丝氨酸和缬氨酸)及十八烷二酸与CPT偶联,构建了6种前药化合物——CPTL-7、CPTL-8、CPTL-9、CPTL-10、CPTL-13和CPTL-14,并从物理化学特性、体内和体外实验三个方面探究脂肪酸修饰的喜树碱-氨基酸前药的抗炎活性。在偶联氨基酸和十八烷二酸后,类似物的溶解度较CPT有一定提高。引入赖氨酸的CPTL-9和丝氨酸的CPTL-10的溶解度分别比CPT提高了4倍和7倍。MTT试验结果表明,所有类似物对小Imidazole ketone erastin鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW 264.7)的细胞毒性均低于CPT,其中引入谷氨酸的CPTL-7的毒性下降了8.4倍,CPTL-9下降了2倍。此外,类似物均能够有效抑制脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激后RAW 264.7产生的一氧化氮(Nitric oxide,NO)。在对LPS刺激后的RAW264.7细胞内促炎细胞因子表达的检测中,CPTL-7和CPTL-9能够显著抑制IL-1β、IL-6和TNF-α的表达。最大耐受剂量实验(Maximum tolerated dose,MTD)的结果表明,除了CPT(MTD为12 mg/kg)和CPTL-10(MTD为16 mg/kg)具有较高的毒性外,其它类似物的MTD均高于32 mg/kg,这表明脂肪酸和氨基酸的共同修饰可以降低CPT的体内毒性。在LPS诱导的脓毒症小鼠模型中,CPTL-7和CPTL-9可以在1 mg/kg的剂量下显著提高脓毒症小鼠的存活率,而其他类似物并未表现出明显的治疗活性。另外,组织病理切片结果表明CPTL-7和CPTL-9可以明显降低LPS对小鼠组织器官的损伤。并且,酶联免疫吸附测定(Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay,ELISA)试验结果表明,CPTL-9可以显著降低血浆中IL-6和TNF-α的蛋白水平。在对给药剂量和给药频次进行优化后,虽然未达到预期的治疗效果,但CPTL-7和CPTL-9仍使脓毒症小鼠的存活率显著提高。总之,本研究发现脂肪酸和氨基酸的组合修饰可以显著降低CPT的体内毒性。尽管所有类似物都表现出一定的体外抗Eukaryotic probiotics炎活性,但只有CPTL-7和CPTL-9的体内抗炎活性较CPT有显著提高。这可能是不同的药代动力学特征影响了不同类似物的体内抗炎活性,这还需要进一步证明。尽管如此,较低的体内毒性www.selleck.cn/products/PD-0325901和较高的体内抗炎活性可以使CPTL-7和CPTL-9成为脓毒症治疗的潜在化合物。此外,本研究还为发展新型的脓毒症治疗药物提供了一种新的修饰策略。