Author: admin

目的 观察解毒通络生津方对干燥综合征（SS）模型NOD小鼠PD-1/PD-L1通路的影响，探讨其作用机制。方法 将24只8周龄雌性NOD小鼠随机分为3组，即模型组（Model）、解毒通络生津方组（TCM）、解毒通络生津方加抗PD-L1单抗阻断组（TCM+α-PD-L1），每组8只。另选8MK-4827只8周龄雌性ICR小鼠作为正常对照组（Ctrl）。12周龄时开始中药干预，TCM组按照每天24.4 g·kg~(-1)解毒通络生津方灌胃，TCM+α-PD-L1组在每天给予24.4 g·kg~(-1)解毒通络生津方Fer-1 NMR灌胃的基础上，腹腔注射抗PD-L1抗体，1周2次，每次100μg,Ctrl组和Model组给予同等剂量的生理盐水灌胃，实验期间记录各组小鼠第9、12、16、20周龄时的日均饮水量，干预8周后，小鼠统一麻醉下摘取颌下腺。HE染色观察各组小鼠颌下腺中炎症细胞浸润情况；流式细胞仪检测小鼠颌下腺CD4+CD25+Foxp3+PD-1+Treg细胞的表达；Western Blot检测小鼠颌下腺中PD-1、PD-L1和Foxp3蛋白的表达。结果 随着小鼠周龄的增长，Ctrl组小鼠日均饮水量基本不变，Model组小鼠的日均饮水量有明显上升趋势，TCM组小鼠日均饮水量下降，TCM+α-PD-L1组小鼠日均饮水量上升；与Model组比较，TCM组炎症细胞浸润灶明显减少（P<0.001）；与TCM组比较，TCM+α-PD-L1组炎症细胞浸润增多（P<0.001）；与Ctrl组比较，Model组CD4+CD25+Foxp3+PD-1+Treg的表达降低（P<0.001），与Model组比较，TCM组CD4+CD25+Foxp3+PD-1+Treg表达升高（P<0.01）；与TCM组比较，TCM+α-PD-L1组CD4+CD25+Foxp3+PD-1+Treg的表达降低（P<0.01）；与Ctrl组比较，Model组小鼠颌下腺中PD-1、PD-L1和Foxp3蛋白的表达降低（P<0.01）；与Model组比较，TCM组小鼠颌下腺中PD-1、PD-L1和Foxp3蛋白的表达升高（P<0.01）；与TCM组比较，TCM+α-PD-L1组小鼠颌下腺中PD-1、PD-L1和Foxp3蛋白的表达降低（P<0.001）。结论 解毒通络生津方可能通过PD-1/PD-L1信号通路促进SS模型小鼠Treg细胞活化，上调Foxp3的表达，增强Treg细胞抑制免疫炎症的作用，Infant gut microbiotaPD-1/PD-L1可能是解毒通络生津方治疗SS的一个作用靶点。

嫩度是消费者最重视的肉类食用品质之一,改善宰后嫩度最常用方式是4℃自然冷却成熟。由于动物宰后短时间内会流失大量血液,停止氧气摄入,随后动物肌细胞会进入不可逆的缺氧、缺血、缺乏能量的状态,机体为维持自身稳态发生“细胞凋亡”和“细胞自噬”。其中,细胞凋亡酶caspase-3促进肉嫩化的机制已被证实。此外,细胞自噬参与肌肉宰后成熟早期阶段,并与细胞凋亡协同作用促进肉嫩化。槲皮素对4℃贮藏期间羊肉、鸡肉品质和抗氧化作用具有积极的影响。但槲皮素对鸡肉宰后成熟阶段嫩度的作用机理尚不清楚。因此,为探究槲皮素对肉嫩度改善的作用机制,本研究以宰后成熟的鸡胸肉为研究对象,研究了槲皮素处理对宰后不同成熟时间(0 d、1 d、3 d和5 d)鸡肉的嫩度、氧化情况、肌原纤维结构、细胞凋亡酶caspase-3活性、钙蛋白酶μ-calpain表达以及线粒体通路和内质网通路相关调控因子、细胞自噬相关因子和PI3K/Akt/m TOR信号通路因子表达的影响,最后通过注射和浸渍两种处理,研究槲皮素对鸡肉宰后成熟阶段宏观品质的影响。确定槲皮素对鸡肉嫩度的改善作用及机制,进一步从自噬角度完善肉类宰后成熟机制,为肉类嫩度品质的调控提供理论指导。本研究的主要内容及结果如下:(1)探究槲皮素处理对宰后鸡肉嫩度、肌原纤维结构及氧化情况的影响:100μg/m L槲皮素处理宰后鸡胸肉,生理盐水处理作为对照。结果显示,Intrapartum antibiotic prophylaxis槲皮素可极显著降低宰后成熟期间鸡肉的剪切力(p<0.01),宰后1 d、3 d和5 MRTX1133供应商d分别降低了45.20%,40.17%和18.72%;提高MFI值,宰后1 d和5 d分别提高了20.23%和13.33%;H&E染色和透射电镜结果表明槲皮素可促进肌原纤维裂解,免疫印迹分析结果发现槲皮素可促进troponin-T的降解,以及μ-calpain和caspase-3的激活,此外,槲皮素可降低肌肉宰后成熟期间ROS和MDA含量,提高SOD活性,说明槲皮素可减弱宰后储存引起的氧化应激,恢复肌肉组织中的氧化还原平衡,促进肌原纤维裂解,改善鸡胸肉嫩度。(2)探究槲皮素处理对细胞凋亡、细胞自噬相关信号因子的影响:利用100μg/m L槲皮素处理宰后成熟期间不同时间点(0 d、1 d、3 d和5 d)鸡胸肉,借助免疫印迹分析检测发现槲皮素可显著提高宰后成熟期间鸡胸肉线粒体通路中Bax/Bcl-2比例,cleaved-caspase-9和cleaved-caspase-3的表达(p<0.05),提高内质网通路中Bi P和XBP1表达,促进IRE1磷酸化,降低pro-caspase-12表达。表明槲皮素可以通过激活细胞凋亡通路中线粒体通路和内质网通路,抑制PI3K/Akt/m TOR通路,促进细胞凋亡和自噬的发生。此外,cleaved-caspase-3免疫组化图像和LC3II免疫荧光结果进一步证明了这一论断。(3)探究槲皮素处理对宰后成熟期间鸡胸肉宏观品质的影响:分别采用槲皮素(100μg/m L)注射和浸渍的方式处理宰后成熟不同时间点(0 d、1 d、3 d和5 d)的鸡胸肉组织,结果表示,槲皮素可提高鸡胸肉的亮度(L*值)和红度(a*值),降低黄度(b*值),延缓成熟期间产生的脂肪氧化,降低蒸煮损D-Lin-MC3-DMA失和剪切力,但对p H值和滴水损失无显著影响,通过对炸制的鸡胸肉进行感官评价,发现槲皮素注射和浸渍可改善鸡胸肉色泽,减少腥味,提高嫩度,改善鸡胸肉的感官品质。

背景脑小血管病(Cerebral small vessel disease,CSVD)是指一组由不同病因所致的、脑小血管和脑实质受累的、以反复脑卒中发作和血管性认知障碍为特征的综合征。NOTCH3基因突变引起的伴皮质下梗死和白质脑病的常染色体显性遗传性脑动脉病(Cerebral autosomal dominant arteriopathy with subcortical infarcts and leukoencephalopathy,CADASIL)是最常见的单基因遗传性CSVD,以偏头痛、反复发作性缺血性脑卒中、认知障碍和情感障碍为常见症状。然而,在临床实践中发现部分具有CADASIL相似临床表型的患者并未携带NOTCH3基因突变,而是携带HTRA丝氨酸蛋白酶1(Htr A serine protease-1,HTRA1)基因杂合突变。这种由HTRA1基因杂合突变引起的、发病较晚的、常染色体显性遗传模式的CSVD称为HTRA1相关脑小血管病(HTRA1-Cerebral small vessel disease,HTRA1-CSVD)。研究表明,近5%的具有家族史的CSVD与HTRA1基因杂合突变有关,但目前对HTRA1-CSVD的临床认知有限,且它的发病机制并不十分清楚。目的对临床上疑似CADASIL但NOTCH3基因2-24号外显子致病突变检测为阴性的河南汉族CSVD患者进行HTRA1基因筛查,分析并总结HTRA1-CSVD患者的临床特征。研究HTRA1基因杂合突变对细胞表型的影响,探讨HTRA1-CSVD可能的发病机制,为阐明疾病的发生发展以及寻找潜在靶向药物提供理论依据。方法首先采用Sanger测序以及全外显子组测序对临床上疑似CADASIL但NOTCH3基因2-24号外显子致病突变检测为阴性的130例河南汉族CSVD患者进行HTRA1基因全部外显子的筛查,对筛查到的HTRA1基因杂合突变进行生物信息学分析以及致病性评估。回顾性分析了HTRA1-CSVD患者详细的临床资料,并总结临床以及影像学特征。最后,体外构建野生型(Wild type,WT)、突变型(G283R和S328A)HTRA1过表达质粒,转染人胚胎肾293T(Human embryonic kidney 293T,HEK 293T)细胞,并观察HTRA1基因杂合突变对HTRA1蛋白酶活性、TGF-β1信号传导及细胞凋亡的影响。使用Graph Pad Prism 8.0软件进行统计学分析和绘图。数据采用未配对t检验和单因素方差分析进行比较更多,并以平均值±标准差表示。p<0.05被认为差异具有显著性。结果本研究发现了6种HTRCross-species infectionA1基因杂合突变,分别是c.242G>A(p.G81D),c.412C>T(p.R138C),c.715G>A(p.E239K),c.847G>A(p.G283R),c.923G>C(p.G308A)和c.992C>T(p.P331L),其中5种突变为首次报道。6例携带HTRA1基因杂合突变的患者,分别来自6个无相关家系,其中2例女性,4例男性。首次缺血性脑卒中年龄为42～71岁,均存在脑卒中或血管性痴呆的家族史。临床特点主要是复发性缺血性脑卒中(5例),认知功能障碍(5例),情绪障碍(4例),脱发(2例)及脊椎病(4例)。磁共振成像(Magnetic resonance imaging,MRI)显示6例患者均有脑白质高信号和腔隙性脑梗死,5例有脑微出血,4例有脊椎受累。我们通过体外实验发现G283R突变组HTRA1蛋白酶活性较WT HTRA1组明显降低(p<0.0001),与S328A突变组HTRA1蛋白酶活性相当,这可能与G283R突变对WT HTRA1蛋白酶产生了显著的www.selleck.cn/products/empagliflozin-bi10773显性负效应(p<0.05)有关。与WT组相比,G283R突变组中TGF-β1/Smad信号传导上调(p<0.05),cleaved caspase3蛋白和BAX蛋白的表达水平升高(p<0.05),而BCL-2蛋白的表达水平降低(p<0.01),细胞内线粒体膜电位明显降低(p<0.01),细胞凋亡水平显著增加(p<0.01)。而这些改变可以被SB431542(TGF-β1/Smad信号通路抑制剂)明显改善(p<0.05)。结论1、对临床疑似CADASIL的CSVD患者,当NOTCH3基因2-24号外显子致病突变检测为阴性时,需要进行HTRA1基因的筛查。2、G283R HTRA1杂合突变通过产生显性负效应引起HTRA1蛋白酶活性丧失,导致TGF-β1/Smad信号传导上调,进而可能通过线粒体功能障碍诱导细胞凋亡。3、TGF-β1/Smad信号传导抑制剂有望成为治疗HTRA1-CSVD的潜在治疗药物。

目的:本研究通过建GSKJ4立血管紧张素Ⅱ诱导的AAA小鼠模型,观察MMP-2/MMP-9、CD147、Cy PA表达变化及凋亡、自噬的变化,研究Ang Ⅱ诱导主动脉瘤形成过程中血管平滑肌细胞自噬的作用。方法:采用35-48日龄SPF级成年雄性健康AP OE~(-/-)小鼠,适应性饲养至10周龄后为实验分组为对照组(A组):APOE组;实验组(B组):Ang Ⅱ诱导APOE组;每组6只,共12只。B组采用皮下埋植Ang Ⅱ缓释泵[1,00ligand-mediated targeting0 ng/min/kg]建立动物AAA模型,A组皮下埋植同等剂量的生理盐水泵。28 d后取腹主动脉,于4%多聚甲醛中及4%戊二醛中保存。免疫荧光测定α-SMA和Beclin-1和Bcl-2检测斑块内血管平滑肌自噬凋亡情况,QPCR检测MM P-2/MMP-9的水平;WB检测CD147、Cy PA蛋白表达,透射电镜检测观察血管斑块内细胞自噬。结果:肉眼观察到Ang Ⅱ干预的APOE缺陷小鼠腹主动脉瘤体形成,造模成功;Ang Ⅱ诱导的apo E缺陷小鼠的腹主动脉瘤模型与对照组相比,Be clin-1表达水平减少,Bcl-2表达水平增加,血管斑块内细胞自噬体的形成减少,主动脉MMP-2Crizotinib生产商和MMP-9 m RNA水平增加,CD147和Cy PA蛋白表达升高。结论:Ang Ⅱ诱导的AAA形成过程中血管平滑肌自噬减少,凋亡增多。Ang Ⅱ诱导的apo E缺陷小鼠的VSMC的凋亡、自噬抑制可导致腹主动脉瘤的形成。MMP-2/MMP-9 m RNA水平增加及Cy PA、CD147高表达可能与血管平滑肌细胞中自噬抑制而导致的腹主动脉瘤形成有关。

目的 构建可溶性血管内皮生长因子受体1(sFlt-1)/胎盘生长因子（PlGF）预测双胎妊娠子痫前期发生的风险模型。方法 选取2018年12月—2021年6月在海南西部中心医院和儋州市人民医院就诊的双胎妊娠孕妇216例，根据是否发生子痫前期将其分为正常组（170例）、子痫前期组（46例），根据子痫前期发生时间将子痫前期组分为早发型子痫前期组（21例）、晚发型子痫前期组（25例）。比较正常组、早发型子痫前期组、晚发型子痫前期Autoimmune recurrence组不同妊娠时期血清sFlt-1/PlGF；比较正常组、子痫前期组临床资料及sFlt-1/PlGF；采用逐步多因素Cox风险比例回归模型分析双胎妊娠孕妇发生子痫前期的危险因素，构建双胎妊娠孕妇发生子痫前期的指数方程，并采用受试者工作特征（ROC）曲线评估预测模型对子痫前期的预测价值。结果 正常组、早发型子痫前期组、晚发型子痫前期组12～14周、20～24周、28～32周血清sFlt-1/PlGF比较，采用重复测量设计的方差分析，结果：(1)不同时间点血清sFlt-1/PlGF有差异（F=385.642,P=0.000）；(2)3组孕妇血清sFlt-1/PlGF有差异（F=267.241,P=0.000），早发型子痫前期组血清sFlt-1/PlGF较高；(3)3组孕妇血清sFlt-1/PlGF变化趋势有差异（F=342.524,P=0.000）。与正常组比较，子痫前期组孕前BMI、高血压占比、MAP、PI及20～24周、28～32周血清sFlt-1/PlGF升高（P <0.05）。逐步多因素Cox风险比例回归模型分析结果显示，高血压[H^R=2.963(9DNA Damage/DNA Repair抑制剂5%CI:1.854,2.939)]，以及孕前BMI[H^R=3.662(95%CI:2.104,5.220)]、MAP[H^R=3.515(95%CI:1.523,5.507)]、PI[H^R=2.683(95%CI:1.359,4.007)]、20～24周血清sFlt-1/PlGF[H^R=4.674(95%CI:2.379,6.969)]、28～32周血清s Flt-1/PlGF高[H^R=3.706(95%CI:1.654,5.758)]是双Barasertib MW胎妊娠孕妇发生子痫前期的危险因素（P <0.05）。双胎妊娠孕妇发生子痫前期的指数方程为PI=0.412X1+0.579X2+0.485X3+0.418X4+0.167X5+0.879X6,AUC为0.861(95%CI:0.752,0.970)，敏感性为0.922(95%CI:0.887,0.957)，特异性为0.863(95%CI:0.785,0.941)，约登指数为0.785。结论 孕20～24周、28～32周血清sFlt-1/PlGF高是双胎妊娠孕妇发生子痫前期的危险因素，妊娠中后期监测该指标可有效预测双胎妊娠子痫前期。

目的：观察红芪多糖(HPS)对糖尿病肾病db/db小鼠JAK2/STAT3信号通路的影响。方法：将50只db/db小鼠按体质量随机分为模型组、厄贝沙坦组、HPS高、中、低剂量组，每组10只；另取10只C57BL/6小鼠作为正常组。正常组和模型组给予5 mL·kg~(-1) ·d~(-1)蒸馏水，厄贝沙坦组给予22.75 mg·kg ~(-1)·d~(-1)厄贝沙坦悬溶液，高、中、低剂量组分别给予200、100、50 mg·kg~(-1)·d~(-1 )红芪多糖悬溶液，6组小鼠每日灌胃一次，连续给药12周。检测各组小鼠血糖(GLU)、24 h尿蛋白(UTP)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、尿酸(UA)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)，过碘酸雪夫反应(PAS)、马松(Masson)染色观察肾脏组织病理变化，蛋白免疫印迹法(Western bloPexidartinibt)、实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-timEpigenetics抑制剂e PCR)检测肾脏中Janus激酶2(JAK2)、信号转导子和转录激活子3(STAT3)、细胞信号转导抑制因子3(SOCS3)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白及mRNA的表达水平。结果：治疗12周后，与正常组比较，模型组小鼠肾脏组织病理超微结构病变显著，其GLU、24 h UTP、Scr、BUN、UA、TG、TC水平均升高(P<0.01)；与模型组比较，红芪多糖高、中剂量及厄贝沙坦组小鼠肾脏组织病理超微结构均得到一定程度改善，其GLU、24 h UTP、Scr、BUN、UAClinical microbiologist、TG、TC水平均降低(P<0.05)；与正常组比较，模型组SOCS3蛋白及mRNA表达水平下降，JAK2、STAT3、TNF-α蛋白及mRNA表达水平升高(P<0.01)；与模型组比较，红芪多糖高、中剂量及厄贝沙坦组SOCS3蛋白及mRNA表达水平升高，JAK2、STAT3、TNF-α蛋白及mRNA表达水平降低(P<0.05)。结论：红芪多糖可在一定程度上减轻糖尿病肾病的肾损伤，其机制可能与抑制JAK2/STAT3信号通路激活有关。

目的：观察2型糖尿病大鼠的心肌微血管病变，并探讨其病理机制。方法：18只雄性SPF级SD大鼠根据体质量均衡原则分为正常组(8只)和模型组(10只),正常组予以普通饲料喂养，模型组予以高脂饲料喂养，4周后，模型组大鼠禁食12 h,腹腔注射35 mg·kg~(-1)链脲佐菌素(streptozotocin, STZ)建立2型糖尿病大鼠模型。模型成功后，正常组给予普通饲料、模型组给予高脂饲料继续喂养，12周后测量大鼠的体质量(body weight, BW);口服糖耐量实验检测大鼠血糖变化，并计算曲线下面积(area under curve, AUC);超声心动图检测大鼠的左心室射血分数(ejection fractions, EF)和短轴缩短率(short-axis fractional shortening, FS);HE染色观察大鼠心肌组织结构变化；Masson染色观察大鼠心肌纤维化情况，计算胶原容积分数(collagen volume fraction, CV获悉更多F);免疫组化法检测心肌组织血小板内皮细胞黏附分子-1(platelet-endothelial cBioclimatic architectureell adhesion molecule-1,PECAM-1,又名CD31)蛋白表达水平；麦胚凝集素(wheat germ agglutinin, WGA)染色检测心肌细胞面积；Wes全自动蛋白质印迹定量分析系统检测心肌组织中血管内皮Lapatinib说明书生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、磷酸化血管内皮生长因子受体2(phospho-VEGF receptor 2,p-VEGFR2)、血管生成素-1(angiopoietin-1,Ang-1)、酪氨酸激酶受体-2(tyrosie kinase with Ig and EGF homology domain, Tie-2)蛋白表达水平。结果：与正常组相比，模型组大鼠7天空腹血糖、12周空腹血糖、AUC、CVF、心肌细胞面积显著升高(P<0.01),12周BW、EF、FS及CD31、VEGF、p-VEGFR2、Ang-1、Tie-2蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。HE染色及Masson染色显示：正常组大鼠心肌细胞排列整齐，细胞形态正常、边界清晰，间质和周围血管无明显蓝色胶原纤维，心肌组织分布均匀；模型组大鼠心肌组织染色不均匀，肌束排列紊乱，心肌组织尤其是微血管周围有大量胶原纤维沉积，出现大量结缔组织增生。结论：2型糖尿病大鼠出现明显的心肌微血管病变，其病理机制可能与血管生成受损有关。

目的 探讨宫颈癌患者血清白细胞介素33(IL-33)、黏蛋白1(MUC-1)及细胞角蛋白19(CK19表达与细胞凋亡的相关性。方法 选择2019年1月至2021年1月于淮安市第一人民医寻找更多院进行治疗的85例宫颈癌患者为试验组进行研究，并选择同期在本院进行体检的健康妇女80例作为对照组，分析两组血清IL-33、MUC-1及CK19的水平变化情况，并分析其和细胞凋亡、临床病理因素之间的关系。结果 试验组患者血清IL-33、MUC-1及CK19水平均显著性高于对照组，差异均有统计学意义（P <0.05）；试验组细胞凋亡指数为（6.32±1.60），显著高于对照组的（2.37±0.71），差异有统计学意义（P <0.05）；不同年龄、不同肿瘤分化genetic mutation程度、不同病理类型及有无淋巴结转移之间血清IL-33、MUC-1及CK19水平比较差异均无统计学意义selleck NMR（P>0.05）；临床Ⅰ～Ⅱ期患者血清IL-33、MUC-1及CK19水平显著低于临床Ⅲ～Ⅳ期患者，差异均有统计学意义（P <0.05）；在相关性分析结果中显示，血清IL-33、MUC-1及CK19和细胞凋亡、临床分期之间均呈正相关（P <0.05）。结论 在宫颈癌患者中血清IL-33、MUC-1及CK19的异常表达参与了疾病的发生与发展，同时对宫颈癌组织细胞凋亡发挥着一定的影响作用，而本次研究也为靶向药物治疗宫颈癌提供了新思路。

研究黄刺多糖对链脲佐菌素(STZ)诱导的Ⅰ型糖尿病大鼠的糖脂代谢的调节作用,以期为预防及治疗糖尿病提供理论支持。采用STZ诱导的Ⅰ型糖尿病大鼠模型,糖尿病模型大鼠随机分为模型对照组、多糖低剂量组(BDPs-L)、中剂量组(BDPs-M)、高剂量组(BDPs-H),灌胃28 d后,监测大鼠体重及血糖变化,测定血脂水平、脂代谢酶活性及体内抗氧化酶活等指标。结果表明:黄刺多糖给药第28天,与模型组相比BDPs给药组的血糖、血脂水平均显著降低(P <0.05或P <0.01),其中高剂量组血糖下降39.16%,血脂(TC,TG,LDL-C,VLDL)水平分别降低39.79%,57.53%,45.80%和57.53%;而BDPs给药组的血清胰岛素水平、LG水平有所增加(P <0Schmidtea mediterranea.05或P <SAG试剂0.01),其中高剂量组大鼠的血清胰岛素水平增加1.28倍(P<0.01),LG水平增加89.79%(P <0.01)。研究还发现BDPs组的AST和ALT活性相比阳性药组,均有不同程度的降低(P <0.05或P <0.01)。相比模型组大鼠,经BDPs治疗后大鼠血清和胰腺此网站中的CAT,SOD和GSH-Px酶以剂量依赖性方式显著增加(P<0.05或P <0.01),MDA含量显著减少(P <0.05)。病理切片结果表明黄刺多糖能够改善STZ诱导的糖尿病大鼠肝脏病变及胰岛损伤。说明黄刺多糖可以改善糖尿病大鼠的糖脂代谢,通过改善Ⅰ型糖尿病大鼠氧化应激从而保护胰岛β细胞的损伤。

核纤层蛋白B1 (nuclear lamina protein B1，LMNB1) 高表达于肝癌组织AIDS-related opportunistic infections中，通过敲低LMNB1探讨其对肝癌细胞增殖的影响及其机制。利用siRNA在肝癌细胞中敲低LMNB1，Western blotting检测敲低效果，使用端粒重复序列扩增法（telomeric repeat amplification protocol assay，TRAP）检测其端粒酶活性变化，购买Regorafenib利用qPCR检测其端粒长度变化，并通过CCK8、克隆形成、Transwell、划痕实验检测其生长，侵袭和迁移能力变化。利用慢病毒系统构建稳定敲低LMNB1selleckchem RSL3的HepG2细胞，检测其端粒长度及端粒酶活性变化，SA-β-gal衰老染色检测细胞衰老情况，通过裸鼠皮下成瘤实验及对肿瘤后续的组化染色，SA-β-gal衰老染色，端粒荧光原位杂交检测其对成瘤性的影响。最后利用生信分析的方法寻找LMNB1在临床肝癌组织中表达情况，及其与临床分期，病人生存的关系。HepG2和Hep3B中敲低LMNB1后端粒酶活性显著降低，细胞增殖、迁移和侵袭能力显著降低，细胞和裸鼠成瘤实验证明稳定敲低LMNB1后端粒酶活性降低的同时端粒长度缩短，细胞发生衰老，此外细胞成瘤性降低，KI-67表达降低，生信分析结果显示LMNB1高表达于肝癌组织，且与肿瘤分期和患者生存相关。LMNB1在肝癌细胞中过表达，其有望成为评估肝癌患者临床预后的指标和精准治疗的靶点。