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JQ1目的 制备新型冠状病毒（SARS-Co V-2）的刺突蛋白（S）和核衣壳蛋白（N）重组抗原。方法 利用Blast程序检索目标序列SARS-CoV-2的S蛋白和N蛋白的同源序列，用SWISS-MODEL软件对目标序列进行结构建模，运用DISCO TOPE对S蛋白和N蛋白的B细胞抗原表位进行分析，选取抗原表位较多的序列进行合成；重组抗原分离纯化后制备兔抗新冠病毒蛋白多抗，用Western blot检测抗原SARS-CoV-2的S蛋白以及N蛋白免疫学活性；用ELISA法检测自制抗原与市售抗体的结合能力。结果 重组质粒pET-22b-SA、p ET-22b-SB、p ET-22b-SC、p ET-22b-NA、pET-22b-NB测序鉴定结果显示正确；Western blot结果显示，重组抗原与山羊抗兔IgG-HRP有特异性结合反应，表明具有良好的免疫学反应；ELISA法结果显示，重组抗原结合能力明General medicine显强于市售抗N蛋白抗原。结论 制备BYL719体内实验剂量的抗原与不同靶IgG和IgM结合能力强，特异性高，具有开发成检测血清SARS-CoV-2特异性IgG和Ig M抗体的试剂盒的潜力。

蛋白赖氨酸乙酰化修饰在物种中广泛分布,参与蛋白质翻译、转录复制、新陈代谢、信号转导等多个重要的生物学过程,该修饰调控的分子机制是当前生物大分子修饰机理研究的热点问题。一方面,蛋白可以通过酶促或者非酶的化学反应将蛋白赖氨酸残基进行乙酰化修饰;另一方面,蛋白需要特异的赖氨酸去乙酰化酶(KDACs)对乙酰化修饰蛋白的功能进行可逆调控。目前,细菌中已确定功能的KDACs均与真核同源,包括Zn~(2+)依赖型Rp Lda(与II型KDACs同源)、Zn~(2+)依赖型Acu C(与I型同源)以及NAD~+依赖型Sirtuins(与III型同源)3种,是否还有其他类型的KDACs目前尚不可知。不同物种中蛋白赖氨酸乙酰化修饰的位点多达上百至数千个,而当前已知的细菌去乙酰化酶种类明显与修饰底物数量相差甚远,细菌内很可能还有一些未知的KDACs对特异的蛋白底物起作用以维持细胞的正常生理功能。因此,寻找新的细菌蛋白赖氨酸去乙酰化酶,研究其分子调控机制与其功能,是当前蛋白质乙酰化修饰调控领域一个重要研究内容之一。本论文以在水产养殖业中引起鱼类爆发SB431542说明书性流行病感染的人-畜-鱼共患重要病原菌嗜水气单胞菌为研究材料,发现该菌的Cob Q蛋白(Ah Cob Q,Uniport ID A0KI27,基因名AHA＿1389)是一类不依赖于Zn~(2+)、NAD~+以及ATP的去乙酰化酶,该蛋白与当前已知的所有KDACs没有同源性,且只在原核生物中存在,是一类新鉴定的去乙酰化酶。主要研究内容如下;(1)构建了ahcob Q缺失菌株,以野生型及经典去乙酰化酶ahcob B基因缺失菌株为对照,对ahcob Q突变株全菌蛋白的乙酰化修饰水平进行检测。结果发现,Δahcob Q与Δahcob B均能引起全菌蛋白乙酰化修饰水平升高,初步怀疑Ah Cob Q是去乙酰化酶;(Mercury bioaccumulation2)生物信息学分析发现Ah Cob Q由一个NTPase的domain(4-179aa)和一个未知功能区域(180-265aa)组成。同源比对分析发现该蛋白与目前已知的KDACs没有同源性,且在真核生物中没有同源蛋白,提示Ah Cob Q可能是一类新型KDAC;(3)对缺失菌生理表型的检测发现,缺失ahcob B后细菌生物被膜生成能力增强,而Δahcob Q则显著提高细菌运动能力以及铁离子利用能力、减弱生物被膜生成能力,两者对细菌生理表型的影响有显著不同;(4)通过体外去乙酰化修饰实验,发现Ah Cob Q可以在体外不依赖Zn~(2+)、NAD~+以及ATP对乙酰化修饰BSA蛋白(Kac-BSA)进行去乙酰化修饰,并可能依赖铁离子执行去乙酰化酶功能;(5)合成乙酰化修饰肽段,利用质谱技术确认Ah Cob Q确实可以将合成的乙酰化修饰肽段去乙酰化,从而排除其可能是水解酶的可能性;(6)利用定点突变等分子生物学技术手段确定Ah Cob Q的去乙酰化酶活性区域在195-245aa的未知功能区域内,并发现L196为Ah Cob Q关键酶活性位点之一。以上结果说明Ah Cob Q不需要依赖Zn~(2+)与NAD~+辅助就可以显著地去除Kac-BSA乙酰化修饰,且与目前已知的去乙酰化酶没有明显的同源性,是一类新的去乙酰基化修饰酶。(7)为进一步确认Ah Cob Q蛋白的去乙酰化酶活性及其生物学功能,本论文利用定量修饰蛋白质组学技术手段,比较ahcob B、ahacu C和ahcob Q分别缺失后,其乙酰化修饰蛋白底物及修饰位点的异同,结果发现Ah Cob Q共调控47个修饰蛋白的52个乙酰化修饰位点发生上调变化,其中与Ah Cob B共同调控的位点6个,与Ah Acu C共同修饰位点9个,三个蛋白共同调控的修饰位点共4个;(8)生物信息学分析发现,Ah Cob Q主要影响能量代谢以及转录翻译相关蛋白的乙酰化修饰变化;(9)通过蛋白定点乙酰化修饰和Western blotting等方法,发现Ah Cob Q确实可以在体外将上述乙酰化修饰底物蛋白去乙修饰。值得注意的是,Ah Cob Q不仅可以单独去除特定位点的乙酰化修饰,还可以与其他KDACs合作,共同调控同一个蛋白不同修饰位点或者相同位点的去乙酰化修饰;(10)进一步通过酶活测定实验发现,Ah Cob Q可以去除TCA循环中限速酶-异柠檬酸脱氢酶ICD的K388位点的乙酰化修饰,增强酶活性,从而参与细菌能量代谢的调控过程;(11)最后,通过缺失菌的斑马鱼攻毒实验发现,Ah Cob Q参与嗜水气单胞菌毒力的调控。进一步利用酶活测定与竞争ELISA技术手段,发现Ah Cob Q并不影响细菌毒力因子-烯醇化酶ENO的代谢酶活性,但可以通过去除ENO K195位点乙酰化修饰,增强ENO与人源纤溶酶原(PLG)的相互作用,提示Ah Cob Q可能通过正调控ENO-PLG之间的相互作用,促进病原菌降解破坏宿主细胞外基质进入胞内,从而入侵宿主。综上所述,本论文发现Ah Cob Q是一种新型去乙酰化酶,可以调控多种关键酶的活性,影响细菌的能量代谢、转录翻译与细菌毒力等多个生物学过程;同时确定了Ah Cob Q的活性区域与活性位点,提出调控细菌乙酰化修饰蛋白的分子新机制。以上研究拓展了对细菌去乙酰化酶的种类和依赖类型的认识,加深了对细菌蛋白乙酰化修饰如何调控蛋白的代谢与入侵宿主等重要生物学功能的理解,为更好地研STM2457究细菌如何通过调控蛋白的功能,适应外界环境变化并保持细菌生态位的动态平衡提供了新的方向,并为防治该致病菌的感染提供新的靶标与思路。

目的：探究HCC脂肪酸代谢相关的预后lncRNA，并对免疫反应以及药物敏感性进行分析。方法：采用生物信息学获取TCGA数据库的HCC基因数据，筛选出最具预后特征的lncRNA并构建预后模型；利用ROC曲线、列线图验证模型准确性；再利用GO、KEGG对lncRNA进行生物学分析；然后，采用GSVA、TMB对HCC患者的免疫状态与突变基因进行分析；最后，利用TIDE评分对HCC患者的免疫治疗获益情况进行分析，以确定对HCC潜在有效的药物。结果：①selleckchem BAY 73-4506确定了4个与脂肪酸代谢相关的lncRNA(AC074117.1、TIntermediate aspiration catheterMCC1-AS1、LINC01063、MKLN1-AS)；②K-M曲线、ROC曲线证实了分期、风险评分可以评估HCC患者的预后；③列线图等证实了模型预测的准确性；④GO和KEGG分析证实了脂肪酸代谢相关lncRNA丰富的生物学功能；⑤GSVA分析显示浆细胞、B细胞、中性粒细胞、NK细胞与II型-IFN反应在两组风险人群中存在明显差异，TMB分析则显示低TMB低风险组的患者预后最好；⑥TIDE评分显示高风险组的TIDE评分明显高于低风险组，并筛选出了更适合高风险人群的5种抗癌药，分别是环巴胺、雷帕霉素、Proteasome抑制剂、紫杉醇、舒尼替尼。结论：4个脂肪酸代谢相关的lncRNA构建的预测更多模型有助于评估HCC患者的预后，并可能为HCC患者的临床应用以及免疫治疗提供见解。

目的 探讨淫羊藿苷是否通过自噬与凋亡途径保PF-6463922核磁护去卵巢大鼠骨质疏松及其机制。方法 将48只雌性SD大鼠随机分为假手术组、去卵巢组、阳性对照组（尼尔雌醇1 mg·kg~(-1)）和淫羊藿苷低、中、高剂量组（40、80、120 mg·kg~(-1)），每组各8只。除假手术组外，各组均进行去卵巢手术。术后灌胃给药12周后，采用双能X线吸收法检测骨密度，采用三点弯曲力学试验测量生物力学指标，采用酶联免疫吸附实验（ELISA）法检测血清骨代谢指标，采用蛋白免疫印迹法（Western Blot）检测自噬相关蛋白P62、自噬效应蛋白（Beclin-1）、LC3-Ⅱ以及凋亡相关non-primary infection蛋白胱天蛋白酶3(Caspase-3）、Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein,Bax）和B淋巴细胞瘤基因-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2）表达。结果 淫羊藿苷低、中、高剂量组大鼠骨密度、最大载荷、最大应力以及刚度均高于去卵巢组（P<0.05）；淫羊藿苷低、中、高剂量组大鼠血清抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）、Ⅰ型胶原交联氨基端肽（NTX-Ⅰ）水平均低于去卵巢组（P<0.05），骨钙素（OC）、骨碱性磷酸酶（BALP）水平均高于去Regorafenib试剂卵巢组（P<0.05）；淫羊藿苷低、中、高剂量组大鼠骨组织P62表达均低于去卵巢组（P<0.05),Beclin-1、LC3-Ⅱ表达均高于去卵巢组（P<0.05）；淫羊藿苷低、中、高剂量组大鼠骨组织Caspase-3、BAX表达均低于去卵巢组（P<0.05),Bcl-2表达均高于去卵巢组（P<0.05）。结论 淫羊藿苷对去卵巢大鼠骨质疏松具有保护作用，其机制可能与增强骨组织自噬水平以及抑制细胞凋亡有关。

目的 观察康妇炎胶囊联合抗生素治疗盆腔炎性疾病(PID)的效果。方法 选取2019年5月至2021年3月商丘市中心医院收拾的92例PID患者为研究对象，按照随机数字表法分为对照组和康妇炎组，每组46例。对照组采用抗生素治疗，康妇炎组在对照组用药基础上应用康妇炎胶囊。比较两组疗效、各项临床体征(下腹坠痛、子宫活动差、子宫附件压痛、盆腔积液)、治疗前后炎性因子[白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-2(IL-2)]及不良反应发生selleck HPLC率。结果 与对照组[76.09%(35/46)]相比，康妇炎组治疗总有效率[96.65%(44/46)]高(P <0.05)。康妇炎组的盆腔积液发生率[0.00%(0/46)]、子宫活动差发生率[4.35%(2/46)]、附件增厚发生率[2.17%(1/46)]、下腹坠痛发生率[0.00%(0/46)]与对照组[10.87%(5/46)、13.04%(6/46)、8.70%(4/46)、8.70%(4/46)]比较，差异未见统计学意义(P> 0.05)。与对照组比较，康妇炎组治疗后Medication-assisted treatmentIL-1低，IL-2高(P <0.05);与对照组[17.39%(8/46)]比较，康妇炎组不良反应发生率[4.35%Protein Tyrosine Kinase抑制剂(2/46)]低(P <0.05)。结论 康妇炎胶囊联合抗生素治疗PID可提高疗效，缓解临床症状且能够减轻炎症，降低不良反应发生率。

目的:探讨增强CT在肝脏肿瘤的鉴别诊断中的应用。方法:选取2021年1月—2022年6月期间于徐州医科大学附属沭阳医院初次就诊且诊断为肝脏肿瘤的患者56例为研究对象,均进行增强CT扫描及病理活检检查,分析增强CT扫描图像特征及其诊断的特异度、灵敏度、准FG-4592分子量确率。结果:病理活检结果显示,56例患者中恶性肿瘤为48例,其中包括31例肝细胞癌、11例转移性肝癌、6例胆管癌;良性肿瘤8例,其中包括4例肝血管瘤、2例肝脏结节性增生、1例肝囊肿、1例肝腺瘤。CT增强扫描检查结果显示,56例患者中恶性肿瘤44例,其中29例肝细胞癌、autoimmune thyroid disease10例转移性肝癌、5例胆管癌;良性肿瘤12例,其中包括3例肝血管瘤、5例肝脏结节性增生、2例肝囊肿、2例肝腺瘤。以病理活检结果为金标准,CT增强扫描检查对肝脏肿瘤的诊断的特异度为75.00%(6/8),灵敏度为87.50%(42/48Liraglutide),准确率为85.71%(48/56)。结论:采用增强CT对肝脏肿瘤的诊断具有很高的诊断效能,能清晰地显示肝脏肿瘤周边组织侵犯及血管分布情况,为临床诊断及治疗提供准确的诊断依据。

目的 观察脓毒症肠道功能障碍小鼠肠组织多肽谱差异表Captisol NMR达，探索脓毒症肠道功能障碍机制。方法 采用盲肠结扎穿孔法建立脓毒症肠道功能障碍小鼠模型，分假手术组（n=3）和脓毒症组（n=3），取回肠组织，运用液相色谱串联质谱法检测肠组织多肽谱，差异表达内源性多肽进行生物信息学分析，推断其在脓毒症肠功能障碍中的作用。结果 共鉴定到458条多肽序列，涉及129个前体蛋selleckchem Trichostatin A白，得出差异上调的多肽有101个，下meningeal immunity调的多肽有9个，差异内源性多肽可能通过调控代谢途径、抗原处理和呈递、氧化磷酸化、MAPK信号通路、细胞凋亡等参与脓毒症肠道功能障碍的发生发展，并预测出脓毒症肠道功能障碍相关的15条内源性多肽。结论 发现了15条差异表达内源性多肽，可能是参与脓毒症肠道功能障碍的关键生物活性多肽，为脓毒症肠道功能障碍的防治提供了新的方向。

目的：探讨激励式干预联合临床护理路径对冠心病患者介入治疗围术期情绪状态的影响。方法：选取2018年3月—2020年6月河南科技大学第一附属医院收治的120例经皮冠状动脉介入治疗（PCI）的冠心病患者作为研究对象，随机分为对照组和观察组，每组各60例。对照组围术期实施临床护理路径干预，观察组围术期在临床护理路径干预基础上实施激励式干预。比较两组患者围术期血压心率变化、干预前后焦虑自评量表（SAS）评分和抑郁自评量表（SDS）评分、术后生活质量、护理满意度。结果：两组患者围术期干预前、术前1 d、干预后此网站收缩压、舒张压和心率指标比较，差异无统计学意义（t=0.891、0.792、0.780、1.213、1.541、1.090、0.972、0.963、1.445,P>0.05）。干预前，两组患者SAS、SDS评分比较，差异无统计学意义（t=1.235、0.956,P>0.05）；干预后，两组患者SAS、SDS评分均比干预前降低，且观察组低于对照组，差异有统计学意义（t=5.475、5.605,P<0.05）。观察组生活质量评分中的生理功能、心理功能、社会功能及总体生活质量各Pathologic response维度评分均显著高于对照组，差异有统计学意义（t=3.499、6.221、12.288、9.275,P<0.05）。观察组理论知识、护理水平、服务态度和环境护理评分均显著高于对照组，差异有统计学意义（t=Angiogenesis抑制剂8.612、7.983、7.622、8.511,P<0.05）。结论：激励式干预联合临床护理路径干预能够有效改善冠心病患者介入治疗围术期生理、心理状态，减轻负性情绪，提升患者生活质量，提高护理满意度。

【目的】探究蝎毒多肽Ctry2459抗白色念珠菌的作用机制。【方法】采用肉汤稀释法并结合平板计数法测定蝎毒多肽Ctry2459对白色念珠菌的最小抑菌浓度和最小杀真菌浓度；通过平板计数法绘制蝎毒多肽Ctry2459对白色念珠菌的时间-杀菌动力学曲线；通过PI吸收实验检测蝎毒多肽Ctryselleck抑制剂2459对白色念珠菌细胞膜完整性的影响；通过核酸阻滞实验检测蝎毒多肽Ctry2459与核酸间是否具有结合作用；通过流式细胞技术检测蝎毒多肽Ctry2459对白色念珠菌活性氧、线粒体膜电位寻找更多以及凋亡/坏死的影响。【结果】蝎毒多肽Ctry2459对白色念珠菌的最小抑菌浓度和最小杀真菌浓度分别为25μg/mL和50μg/mL。蝎毒多肽Ctry2459对白色念珠菌的杀菌作用具有时间和浓度依赖性，并可通过直接破坏细胞膜的完整性以及通过ROS介导的线粒体失能导致细胞坏死的方式genetic gain杀灭白色念珠菌细胞。【结论】蝎毒多肽Ctry2459可以作为抗白色念珠菌药物研发的候选分子或者分子模板。

目的：评定动态心电图检查与常规心电图检查于心脏相关疾病诊断的应用效果。方法：选取2021年1～12月经冠状动脉造影检查确诊的冠心病者100例，均施以动态心电图检查与常规心电图检查方案，评定心肌缺血、心律失常诊断准确率、ST段检出情况、检出部位以及心律失常具体类型等2种方法检查结果的差异性状况。结果：经动态心电图检查显示其心肌缺血检出率Taurine生产商、心律失常检出率均高于常规心电图检查的结果（P<0.05）；经动态心电图检查显示其ST段抬高、ST段压低的检出率均高于常规心电图（P<0.05）；经动态心电图检查显示其ST异常侧壁检出率明显高于常规心电图检查（P<0.05）；经动态心电selleck合成图检查显示其左束支阻滞、右束支阻滞、房室传导阻滞、室性早搏与房性早搏的二/三联律检出率均高于常规心电图检查（P<0.05）。结论：开展冠心病诊断中施以动态心电图检查方案与常规心Cardiac Oncology电图检查方案均能获取一定的疾病诊断效果，其中动态心电图的应用，能较好检出疾病，提高疾病诊治的效果，意义重大。