Author: admin

为了建立检测牛源化脓隐秘杆菌抗体的间接ELISA检测方法，试验对分离的牛源化脓隐秘杆菌溶血素(pyolysihealth biomarkern, PLO)基因序列进行分析，截去信号肽与跨膜区域后进行碱基优化，合成PLO基因片段，连接至原核表达载体pET-30a中，转化至Arctic Express(DE3)大肠杆菌感受态后诱导表达并纯化，以纯化后的重组蛋白作为抗原包被96孔板，建立牛源化脓隐秘杆菌PLO抗体间接ELISA检测方法，确定检测方法的临界值、特异性、敏感性、重复性，并用建立的方法对临床血清样本进行检测。结果表明：成功构建了重组原核表达质粒pET30a-PLO,实现了重组蛋白在Arselleck MDV3100ctic Express(DE3)大肠杆菌感受态中的表达，并建立了用于检测牛源化脓隐秘杆菌PLO抗体的间接ELISA检测方法。该检测方法的临界值为0.354,与常见牛细菌selleck Erastin阳性血清无交叉反应，阳性血清稀释至320倍检测仍高于临界值；批内、批间检测变异系数均小于5%;对10份已知阳性血清进行检测，阳性检出率为100%,80份临床牛血清的阳性检出率为21.25%(17/80)。说明该方法具有良好的特异性、敏感性、重复性，可用于牛源化脓隐秘杆菌感染的快速检测与流行病学调查。

目的 探讨激励式康复管理联合渐进式阻力训练对乳腺癌化疗患者心理状态、上肢功能及生存质量的影响。方法选择如皋市人民医院2019年4月至2021年4月收治的乳腺癌化疗患者82例作为研究对象，通过数字表法随机分为2组，对照组实施常规护理+渐进式阻力训练，观察组在此基础上实施激励AM-2282小鼠式康复管理。观察2组患者入组和干预12周时心理状态、上肢功能及生存质量。结果 干预12周后，观察组患者中文版益处发现评定量表（beselleck HPLCnefit finding scale-the Chinese version, BFS-C）各因子评分及总分均高于对照组（P<0.05），上肢功能障碍评定量表（disability of the arm,shoulder and hand,DASH）Hepatoid carcinoma各因子评分及总分均低于对照组（P<0.05），生命质量测定量表（functional assessment of cancer therapy-breast, FACT-B）各领域评分及总分均高于对照组（P<0.05）。结论 乳腺癌患者在治疗期间开展激励式康复管理联合渐进式阻力训练，有助于提高患者训练积极性，促进训练效果有效提高，对改善患者上肢功能和生存质量均具有重要意义。

目的 探讨电针通过沉默信息调节因子(SIRT1)1-叉头状转录因子(FOX)O1通路激活自噬减轻神经病理性疼痛(NP)的机制。方法 实验分为假手术组寻找更多、模型组、电针组、电针+抑制剂组，每组12只。除假手术组外，其余各组建立坐骨神经慢性压迫损伤(CCI)所致NP大鼠模型，造模第7天电针组选用“环跳”“阳陵泉”穴电针针刺；电针+抑制剂组在电针组基础上分别在第7天、第10天、第14天脊髓鞘内注射SIRT1抑制剂EX-527;假手术组和模型组鞘内注射等体积二甲基亚砜(DMSO)。造模前、造模后给药前、给药后测定机械缩足反射阈值(MWT)和热刺激缩足反射潜伏期(PWTL);免疫荧光检测脊髓SIRT1蛋白表达情况；透射电镜下观察脊髓超微结构；Western印迹检测脊髓中微管相关蛋白1轻链(LC)3、SIRT1、FOXO1蛋白水平。结果 造模前，各组MWT、PWTL差异无统计学意义(P>0.05)。造模后给药前，与假手术组相比，模型组、电针组、电针+抑制剂组MWT、PWTL明显降低(P<0.05)。给药后，模型组出现线粒体肿胀破裂现象，且与溶酶体融合，未发现明显的自噬小体；电针组线粒体结构基本恢复，自噬小体数量多，双膜包裹里可见少量的内质网碎片；电针+抑制剂组自噬小体数量较电针组明显减少，自噬小体部分出现单膜结构。与假手术组相比，模型组MWT、PWTL、脊髓中SIRT1蛋白免疫荧光强度和蛋白水平、FOXO1、LC3Ⅱ蛋白水平、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ明显降低(P<0.05),LC3Ⅰ蛋白水平明显升高(P<0.05);与模型组相比，电针组MWT、PWTL、脊髓中SIRT1蛋白免疫荧光强度和蛋白水平、FOXO1、LC3Ⅱ蛋白水平、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ明显升高(P<0.05),LC3Ⅰ蛋白水平明显降低(P<0.05);与电针组相比，电针+抑制剂组MWT、PWTL、脊髓dermatologic immune-related adverse event中SIRT1蛋白免疫荧光强度和蛋白水平、FOXO1、LC3Ⅱ蛋白水平、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ明显降低(P<0.05),LC3Ⅰ蛋白水平明显升高(P<0.05)。结论 电针通过激活SIRT1-FOXOBarasertib供应商1通路激活自噬减轻NP,实现对NP大鼠的保护。

背景：脐带间充质干细胞已被证明对软骨损伤有治疗作用，外泌体是脐带间充质干细胞在体内发挥治疗作用的主要载体。课题组前期发现LncRNA H19是介导脐带间充质干细胞外泌体调控软骨细胞活性的重要活性分子，LncRNA H19non-infective endocarditis可以吸附miR-29b-3p从而促进软骨细胞的增殖再生，但是其下游机制仍未清楚。目的：从外泌体和LncRNAs角度揭示脐带间充质干细胞治疗软骨损伤的具体机制，为软骨损伤的治疗提供新的靶点。方法：构建稳定过表达LncRNA H19的脐带间充质干细胞，采用超速离心提取外泌体(H19-Exos)；采用透射电镜、纳米颗粒跟踪分析、Westernblot和外泌体摄取实验鉴定外泌体；通过Westernblot、qPCR和双荧光素酶报告基因系统检测miR-29b-3p过表达和沉默对TGF-β1/Smad3通路的影响；通过特异性TGF-β1/Smad3抑制剂在体内外反向验证H19-Exos对软骨再生的生物学作用。结果与结论：(1)H19-Exos在电镜下为典型的杯状，粒径在130 nm左右，均表达CD63、CD81和TSG1010特性蛋白；(2)过表达miR-29b-3p可以同时下调TGF-β1、Smad3的mRNA和蛋白水平，而沉默mselleck激酶抑制剂iR-29b-3p后，TGF-β1、Smad3的mRNA和蛋白水平上调；(3)双荧光素酶报告基因系统检测发现miR-29b-3p对下游靶基因TGF-β1和Smad3活性影响有显著差异；(4)膝关Belumosudil节腔内注射Ⅱ型胶原酶成功建立大鼠骨关节炎模型，H19-Exos可显著促进软骨再生，且特异性TGF-β1/Smad3抑制剂SB-431542在体内外均可阻断H19-Exos对软骨再生的生物学作用；(5)该研究系统论证了高表达LncRNA H19脐带间充质干细胞来源外泌体对软骨再生的促进作用，具体机制为LncRNA H19通过靶向miR-29b-3p/TGF-β1/Smad3通路促进软骨再生。

目的:探讨miR-7-5p靶向抑制REGγ对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231迁移和侵袭能力的调控作用。方法:培养乳腺癌MDA-MB-231细胞，设置阴性对照组、REGγ敲减组、miR-7-5p过表达组、miR-7-5p+REGγ同时过表达组。采用划痕愈合实验检测细胞的迁移能ABT-199溶解度力；Transwell实验检测细胞的侵袭能力；qRT-PCR检测REGγ和miR-7-5p的表达水平；荧光素酶报告基因检测miR-single-molecule biophysics7-5p靶向调控REGγ。结果:miR-7-5p可特异结合REGγ的3端非翻译区。与阴性对照组相比，敲减REGγ可抑制MDA-MB-231细胞的迁移及侵袭能力(P<0.05);过表达miR-7-5p可降低REGγ的表达水平(P<0.05),并抑制MDA-MB-231细胞的迁移及侵袭能力(P<0.05)。与过表达miR-7-5p相比，同时过表达miR-7-5p和REGγ可降低miR-7-5p对MDA-MB-231细胞迁移和侵袭能力的抑制作用(P<0.05)。结论:miR-7-5https://www.selleck.cn/products/LBH-589.htmlp能够抑制三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231的迁移和侵袭能力，机制可能与靶向调控REGγ的表达水平有关。

目的 探讨年轻乳腺癌患者改良根治术后述情障碍与心理韧性水平的相关性。方法 前瞻性选取江西省妇幼保健院2018年12月—2020年12月收治的70例年轻乳腺癌患者作为研究对象，所有患者均行改良根治术治疗，术后采用多伦多述情障碍量表-20 (Toronto alexithymia scale-20,TAS-20)、心理韧性量表（connor-davidson resilience scale,CD-R ISC）进行评估，将70例乳腺癌患者分为无述情障碍组、中度述情障碍组、重度述情障碍组。比较3组CD-RISC评分情况，分析年轻乳腺癌患者改良根治术后述情障碍与心理韧性水平的相关性。结果 70例年轻乳腺癌患者TAS-20评分≤51分有24例，占34Burn wound infection.29%;52分≤TAS-20评分≤60分有32例，占45.71%;TAS-20评分≥61分有14例，占20.00%。3组年龄、婚姻状况、文化程度、工作情况、居住情况、乳腺癌部位、肿瘤分期、癌痛、医疗付费方式对比，差异无统计学意义（P>0.05）；无述情障碍组CD-RISC评分最高，中度述情障碍组次之，重度述情障碍组最低，差异有统计学意义（P<0.05）。经一般线性双变量Talazoparib配制Kendall tau-b直线相关检验，结果显示年轻乳腺癌患者改良根治术后述情障碍与心理韧性呈负相关（r=-0.676,P<0.001）。获悉更多结论 年轻乳腺癌患者改良根治术后述情障碍处于较高水平，且与心理韧性水平呈负相关，临床上可根据患者情况采取相应的干预措施，以提升心理韧性水平，减轻其述情障碍。

目的:系统整合儿童及青少年面对母亲罹患乳腺癌的心理体验，为制定有针对性的心理干预措施提供参考。方法:检索PubMed、Web of Science、EMtumour biologybase、the Cochrane Library、CINHAL、中国生物医学文献数据库、中国知网、万方数据库、维普数据库中有关儿童及青少年面对母亲罹患乳腺癌心理体验的质性研究，检索时限为建库至2021年10月24日。采用澳大利亚Joanna Briggs Institute(JBI)循证卫生保健中心质性研究质量评价标准评价文献质量，通过汇集性整合进行结果整合与分析。结果:共纳入10篇文献，提炼出55个研究结果，归纳形成10个类别，4个整合结果为：负性心理感受主导的复杂情绪体验；家BLZ945庭生活受到多重影响；不同类型的应对方式；应对母亲患乳腺癌过程中的益处。结论:医护人员应充分了解乳腺癌病人的儿童及青少年子女内心体验并予以更多重视，构建以家庭为中selleck心的干预方案，建立家庭支持系统，促进其身心健康发展。

目的探讨3.0T磁共振成像在诊断乳腺癌中的价值。方法收集120例乳腺肿块患者,采用美国GE公司Discovery750型号3.0T超导型磁共振扫描仪,先对患者行MRI平扫,再进行MRI功能成像检查,包括磁共振动态增强扫描(MRI-DCE)及弥散加权成像(DWI)。以穿刺活检病理诊断结果作为”金标准”,比较MRI平扫、MRI-DCE及DWI在乳腺癌诊断中的灵敏度、特异度、准确率、阳Pidnarulex性预测值及阴性预测值,比较乳腺癌与乳腺良性肿块患者的表观弥散系数(ADC),并比较MRI平扫、MRI-DCE及DWI对不同类型乳腺癌的诊断符合率。结果 MRI-DCE、DWlegal and forensic medicineI在乳腺癌诊断中的灵敏度、特异度、准确率、阳性预测值及阴性预测值均高于MRI平扫(均P<0.05),而MRI-DCE与DWI的灵敏度、特异度、准确率、阳性预测值及阴性预测值差异均无统计学意义(均P>0.05)。MRI-DCE、DWI对浸润性导管癌和浸润性小叶癌的诊断符合率均高于MRI平扫(均P<0.05),而MRI-DCE与DWI对浸润性导管癌和浸润性小叶癌的诊断符合率差异均无统计学意义(均P>0.05)。在不同b值的DWI图像更多中,乳腺癌患者的ADC值均低于乳腺良性肿块患者(均P<0.05)。结论 MRI-DCE及DWI对乳腺癌的诊断价值良好,可准确鉴别乳腺癌与乳腺良性肿块,还可对不同类型乳腺癌进行鉴别诊断。

目的探讨九项呼吸道病原体IgM抗体联合检测对治疗儿童呼吸道感染的指导意义。方法采用间接免疫荧光法检测2014年7月~2015年1月1 104例0~14周岁住院呼吸道感染患儿血清中九种病原体IgM,其中包括嗜肺军团菌-IgM(LP-IgM)、肺炎支原体-hepatocyte sizeIgM(MP-IgM)、Q热立克次体-IgM(COX-IgM)、肺炎衣原体-IgM(CP-IgM)、腺病毒-IgM(ADV-IgM)、呼吸道合胞病毒-IgM(RSV-IgM)、甲型流感病毒-IgM(IF A-IgM)、乙型流感病毒-IgFG-4592M(IFB-IgM)、副流感病毒1,2-IgM和3型(PIVS-IgM),记录患儿信息和检测结果,用统计学软件SGSK J4PSS进行卡方检验。结果1 104例患儿中病原体新近感染率为38.32%(423/1 104),其中CP-IgM阳性率最高为28.44%,其次乙型流感病毒-IgM为9.51%,混合感染率为26.24%,以肺炎支原体并发乙型流感病毒感染为主。总阳性感染人数中男性阳性率为36.40%(218/599),女性阳性率为40.60%(205/505),性别间差异无统计学意义(x~2=2.05,P=0.15)。结论九项呼吸道病原体IgM抗体联合检测具有操作简便,费用低,检测迅速和被检范围广等优点,对儿童呼吸道感染病原菌具有早发现、早诊断及早治疗的临床应用价值。

近年来,含有二硫键的多肽因其具有良好的生物活性而被广泛应用于医药、卫生、食品等领域。其中二硫键的定向合成是此类多肽合成过程中的难点,也是该领域的研究热点。目前,多肽两对二硫键的合成存在一定的局限性,如反应条件苛刻、反应时间长、产生异构体等问题。因此,研究简易、高效的多肽两对二硫键的合成方法至关重要。研究了trans-[Pt Br_2(CN)_4]~(2-)同时氧化脱除半胱氨酸侧链巯基乙酰氨基甲基(Acm)MRTX1133化学结构和1,3-噻唑烷-4-羰基(Thz)直接生成多肽分子内二硫键的反应。该反应的计量关系为1:1。该反应能够在水溶液中进行,反应速率快。利用高效液相色谱仪研究了该反应的反应机理。该反应通过Pt(IV)配合物的轴向配体Br~-先与Thz保护基中硫原子形成Pt-Br-S桥,进而发生一步两电子转移,生成–SBr中间体,然后与Acm保护的巯基反应,脱除Acm保护基的同时生成二硫键。利用trans-[Pt Br_2(CN)_4]~(2-)与L-硒代蛋氨酸氧化物(Met Se O)联用,在水溶液中,一锅法,定向合成了蜂毒明肽中的两对二硫键,蜂毒明肽的产率为42%。并利用trans-[Pt Br_2(CN)_4]~(2-)能够同时脱除多肽侧链巯基两个Acm保护基生成二硫键的反应,与Met Se O联用,成功合成了平行催产素二聚体的两对分子间二硫键。平行催产素二聚体的产率为56%。研究了二硫化四甲基秋兰姆和二硫化四乙基秋兰姆这两种秋兰姆二硫化物氧化半胱氨酸侧链巯基生成多肽分子内二硫键的反应。该反应在室温下,水溶液中进行,反应速率快,15 min内将还原型多肽氧化为含分子内二硫键的多肽,生成的含二硫键的多肽纯度高,且反应对蛋氨酸残基没有影响。研究了秋兰姆二硫化物直接氧化树脂负载的含有两个巯基的多肽生成催产素二硫键的反应,切割后,生成的催产素的纯度为86%。利用停止-流动光谱仪研究了秋兰姆二硫化物和还原型多肽的模型化合物二巯基苏糖醇(DTT)的反应动力学,结果表明:该反应对[秋兰姆二硫化物]和[DTT]均为一级反应。利用秋兰姆二硫化物与trans-[Pt Br_2(CN)_4]~(2-)联用,在水溶液中,一锅法定向合成了蜂毒明肽、α-芋螺毒素SI的两对分子内二硫键。蜂毒明肽、α-芋螺毒素SI的产率分别为41%和70%。利用此方法,一锅法定向合成了平行催产素二聚体的两对分子间二硫键,平行催产素二聚体产率为55%。研究了N-氯代丁二酰亚胺(NCS)和N-溴代丁二酰亚胺(NBS)这两种N-卤代丁二酰亚胺(NXS)脱除多肽侧链巯基两个Acm保护基形成二硫键的反应。该反应可在室温下,水溶液中进行,合成的含二硫键的多肽纯度>80%。NXS也能同时氧化脱除半胱氨酸侧链巯基乙酰氨基甲基(Acm)和1,3-噻唑烷Ferrostatin-1分子量-4-羰基(Thz)保护基合成多肽分子内二硫键。当多肽中存在巯基时,NXS能够脱除半胱氨酸侧链巯基叔丁基(t Bu)生成催产素分子内二硫键。生成的催产素纯度为91%。提出了NXS脱除Acm、Thz、t Bu生成二硫键的反应机理,即NXS中的卤原子进攻半胱氨酸侧链的硫原子,Desiccation biology生成锍阳离子中间体,然后,发生电子转移脱除Acm或Thz保护基,生成SX中间体,再与另一分子的Acm保护的巯基反应,生成二硫键。利用NXS与Met Se O或秋兰姆二硫化物联用,一锅法定向合成了α-芋螺毒素SI、α-芋螺毒素IMI、蜂毒明肽的两对二硫键,产率均在40%以上。