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由严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-Co V-2)引起的冠状病毒肺炎疫情(COVID-19)导致了全球经济和健康受到购买Fer-1前所未有的冲击。由于RNA病毒的高突变速率,对抗体药物开发提出了新的挑战。考虑到新冠病毒首先引起的呼吸道感染以及生产成本、药物生物利用度、给药方式等情况,纳米抗体VHH具有尺寸小、研发速度快、可吸入给药、易于构建多价体防止免疫逃逸的优势,是新抗体研发的热点之一。但作为蛋白质药物种类之一,纳米抗体不可避免的面临着稳定性及半衰期等急需解决的问题。在本研究中,我们设计了两段多肽序列分别连接到两种靶向病毒RBD的纳米抗体VHH72及Nb21的末端,探究其对纳米抗体功能的影响。其中一段多肽设计为SARS-Cov-2 S蛋白上独特的宿主蛋白酶水解位点序列PS,以期竞争性抑制S蛋白酶解从而阻断病毒入侵的两个环节。另一段则是上述序列重排所生成的一段等分子量无意义多肽NC,用作对照。然后利用大肠杆菌系统表达纯化了四种抗体-多肽蛋白,即VHH72-PS,VHH72-NC,Nb21-PS,Nb21-NC。为了检测上述抗体-多肽蛋白的病毒中和能力,利用慢病毒构建了过表达ACE2的HEK29optimal immunological recovery3T细胞系作为靶细胞Staurosporine并包装了表面带有S蛋白的假病毒。结果发现:1.在中和能力高的Nb21纳米抗体后添加PS或NC均未显著改变其中和能力,Nb21-NC的EC_(50)略小于Nb21-PS。2.在无中和能力的单价VHH72末端添加多肽可使其获得中和能力,VHH72-NC的EC_(50)小于VHH72-PS的,表明NC序列的提高效果更为显著。

目的 观察冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)及高血压患者平板运动试验中运动时间及血压变化的特点，并分析冠状动脉(冠脉)狭窄程度与运动时间及血压变化的关系。方法 选取2018年1月至2020年8月于郑州大学第一附属医院行平板运动试验的患者310例，其中105例患者行冠脉CTA，195例患者行冠脉造影，根据造影结果和病史分为四组，A组(对照组)：正常人群，62例；B组(单纯高血压组)，53例；C组(冠心病不合并高血压组)，80例；D组(冠心病合并高血压组)115例；记录患者运动试IACS-10759细胞培养验前静息血压，运动LY-188011研究购买中峰值血压，恢复6 miBiosimilar pharmaceuticalsn血压及运动时间，计算C、D两组改良Gensini评分，并分析该评分与运动时间、峰值血压及恢复6 min后血压的关系。结果 C组运动时间最短，与其他各组比较差异均有统计学意义(P<0.05)；B组运动时间最长，与C组及D组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。B组，C组及D组静息血压，峰值血压和恢复6 min后血压均较对照组明显升高，且具有统计学意义(P<0.05)。C组和D组的改良Gensini评分与运动时间、峰值收缩压，舒张压，恢复6 min后收缩压，舒张压均无明显相关性(相关系数r<0.15，P>0.05)。结论 冠心病患者运动耐力降低；高血压，冠心病患者的血压在运动和恢复中均较正常人明显升高；冠脉狭窄程度与运动时间及运动血压变化无明显相关性。

目的 构建并验证肝癌患者经肝动脉化疗栓塞术(TACE)后感染风险预测模型。方法 回顾性收集2016年1月—2018年3月某院1 043例肝癌行TACE手术患者的临床资料，根据TACE后是否发生感染分为感染组及未感染组，采用logistic回归分析筛选肝癌患者TACE后感染的危险因素并构建列线图模型，采用Bootstrap法对模型进行内部验证。收集2020年1—7月该院349例肝癌行TACE患者作为验证集对模型进行外部验证，采用C-统计量、校准曲线评价模型的预测性能。结果 1 043例肝癌患者接受TACE后感染105例，感染发生率为10.07%。胆道介入手术史、最大肿瘤直径>5 cm、腹腔积液、肝癌破裂出血、碘化油剂量>12 mL及加用补充栓塞材料是TA更多CE后感染的独立危险因素(均P<0.05),既往TACE史为TACE后感染的保护因素(P<0.05)。肝癌患者TACE后感染风险预测模型为Logit(P)=-4.403+1.874×胆道介入手术史-1.101×既往TAMRTX1133抑制剂CE史+1.253×最大肿瘤直径>5 cm+1.163×腹腔积液+1.346×肝癌破裂出血+0.901×碘化油剂量>12 mL+1.369×加用补充栓塞材料。该模型C-统计量为0.857,95%CI为0.822～0.892,约登指数最大值为0.596,临界值为0.109,灵敏度为84.8%,特异度为74.8%。内、外部验证C-统计量分别为0.847、0.829,校准曲线和Brier得分均显示模型拟合良好。结论 研究构建的肝癌患者TACE后感染风险预测模型的区分度及校ventriculostomy-associated infection准度良好，可作为临床上肝癌患者TACE后感染的预测工具。

淮山(Dioscarea opposita)又名山药,为多年生草本植物薯蓣的根茎,也是我国传统的药食同源食物。生物活性肽是一类有益于生命机体的肽类化合物,由于肽类物质结构类型丰富且具有多种生理活性,是一种极具发展前景的功能因子,也是当前国际食品界争相研究的对象之一。本研究以淮山为原料,经单因素及响应面试验得到超声预处理制备淮山多肽制备的优化工艺;利用体外模型,探究了淮山多肽促肠道益生菌生长作用,分析了淮山多肽发酵肠道益生菌发酵产物短链脂肪酸,并进一步探讨了不同分子量范围淮山多肽对婴儿适用乳酸菌体外促生长作用的影响,分析了淮山多肽的氨基酸组成。以期为淮山多肽的开发和利用提供参考。主要研究结果如下:1.淮山多肽制备工艺的建立:采用碱溶酸沉法提取的淮山粗蛋白为原料,以水解度为指标,在蛋白酶种类确定的基础上,通过单因素实验和响应面优化超声预处理淮山蛋白酶解制备多肽的工艺条件为:淮山蛋白经过超声功率375 W及超声温度45℃预处理25 min后,采用胃蛋白酶添加量3000 U/g、酶解时间1 h的酶解工艺,该最优条件下的水解度为24.96±0.14%,与预测值24.94%基本一致,相较于未使用超声波的制备工艺,相对百分比提高了12.38%。2.淮山多肽促益生菌增殖效果的评价:将超声预处理制备的淮山多肽用于乳酸菌和双歧杆菌的培养,研究其对乳酸菌和双歧杆菌的体外增殖效果影响。结果表明:淮山多肽对人体常见益生菌干酪乳杆菌、植物乳杆菌、两歧双歧杆菌及婴儿适用益生菌嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、发酵乳杆菌、短双歧杆菌等7种益生菌具有显著的体外促增殖作用,在实验添加量范围内,培养液中活菌数和OD_(600)值总体与淮山多肽浓度呈正相关,而p H值与之基本呈负相关。CHIR-99021培养结束时,在添加4 mg/m L的淮山多肽培养液中,上述7种益生菌的OD_(600)值相较基础培养液分别提高111%、108%、107%、109%、125%、113%和106%;p H下降102%、102%、101%、103%、109%、1potentially inappropriate medication03%和105%;活菌数提高221%、135%、150%、139%、141%、117%和120%。3.淮山多肽模拟肠道发酵产物的分析:运用体外模拟肠道内环境的方法,分析干酪乳杆菌、保加利亚乳杆菌、植物乳杆菌、两歧双歧杆菌四种人体常见益生菌以及鼠李糖乳杆菌、嗜酸乳杆菌、发酵乳杆菌、短双歧杆菌四种婴儿适用的益生菌发酵淮山多肽产生乙酸、丙酸、丁酸的含量。结果发现:乳酸菌和双歧杆菌体外发酵淮山多肽的主要产物是乙酸、少量丙酸和丁酸。干酪乳杆菌、植物乳杆菌、保加利亚乳杆菌、鼠李糖乳杆菌和嗜酸乳杆菌的乙酸含量均在24 h时达到最大值,分别为6.150 mg/m L、6.254 mg/m L、5.376 mg/m L、5.034 mg/m L和6.280 mg/m L,发酵乳杆菌和PEG300化学结构短双歧杆菌的乙酸浓度在48 h最大,分别为5.169 mg/m L和4.940 mg/m L,两歧双歧杆菌的乙酸含量在12 h达到最大值5.003 mg/m L。4.不同分子量范围淮山多肽的促益生菌增殖效果的探究:通过膜分离得到分子量小于3 ku、3～10 ku和大于10 ku的3个淮山多肽组分,分别研究其对鼠李糖乳杆菌、嗜酸乳杆菌、发酵乳杆菌、短双歧杆菌四种婴儿适用益生菌体外生长的影响,进一步探讨淮山多肽对益生菌体外促增殖作用。结果表明:分子量小于10 ku淮山多肽组分促益生菌生长作用显著优于分子量大于10 ku组分。分子量小于3 ku的淮山多肽对发酵乳杆菌和短双歧杆菌的促增殖效果最佳,活菌数分别为分子量大于10ku淮山多肽的1.11倍和1.13倍;p H显著低于分子量10 ku以上的淮山多肽。而分子量范围为3～10 ku的淮山多肽对鼠李糖乳杆菌和嗜酸乳杆菌的促增殖作用最好,活菌数分别分子量大于10 ku的淮山多肽1.78倍和1.12倍;p H显著低于分子量10 ku以上的淮山多肽。5.淮山多肽氨基酸组成分析及其对益生菌促生长作用的影响:分子量小于3 ku、3～10 ku、大于10 ku淮山多肽均含有谷氨酸、天冬氨酸、苏氨酸和丝氨酸等17种氨基酸,随着淮山多肽组分分子量的减小,谷氨酸、天冬氨酸、亮氨酸和苯丙氨酸等氨基酸的含量增加。分子量小于10 ku淮山多肽组分促益生菌生长作用优于分子量大于10 ku组分,与其中谷氨酸、天冬氨酸和苯丙氨酸含量较高有关。

本研究运用网络药理学和分子对接的分析方法，探究杜仲防治骨质疏松的分子作DNA/RNA Synthesis抑制剂用机制。通过TCMSP、GeneCards、OMIM以及DrugBank数据库分别对杜仲的入血有效活性成分、作用靶点以及与骨质疏松有关的疾病靶点进行汇总与筛选。将杜仲的有效活性成分与作用靶点经Cytoscape处理建立起药物靶点的网络关系图，找到药物疾病的共同作用靶点；通过STRING平台建立这些靶点的蛋白质言进行关键靶点的基因本体（Gene Ontology, GO）功能和京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG）信号通路富集分析，并将分析数据可视化，最后利用AutoDock进行分子对接验证。结果显示筛选后共得到25个杜仲的有效活性成分和202个预测作用靶点，对应的主要化学成分为槲皮素、山柰酚和?-谷甾醇，与骨质疏松有关的疾病靶点共计4 603个，与杜仲有共计144个共同作用靶点，在这144个关键靶点的PPI网络中筛选后得到14个关键靶点。关键靶点的基因富集结果显示，PTGS2、HSP90AA1、PPARG、ESR1和JUN等核心靶点主要通过影响细胞增殖以及各类应激反应等VX-661体内生物进程来Infected subdural hematoma防治骨质疏松，这些基因大多数集中出现在IL-17、TNF以及雌激素信号通路中。本研究初步证实杜仲以多成分、多靶点作用于多进程、多通路的方式参与了骨质疏松的防治，为有关防治骨质疏松的新药研发提供了理论基础。

目的 研究口服直接抗病毒药物(direct-acting antiviral, DABT-263AA)不同组合的抗病毒治疗方案，治疗中国南方地区GT3型丙型肝炎病毒感染患者的疗效及安全性。方法 采用回顾性研究方法，纳入40例GT3型、初治、伴或不伴(失)代偿期肝硬化的慢性丙型肝炎患者，分别接受不同的DAA治疗方案联合利巴韦林进行抗病毒治疗，包括：利托那韦增强的达诺瑞韦+索磷布韦+利巴韦林(DNVr+SOCL13900F+RBV),索磷布韦+维帕他韦+利巴韦林(SOF+VEL+RBV),索磷布韦+达拉他韦+利巴韦林(SOF+DCV+RBV)治疗12/24周。评估患者12/24周治疗结束后获得的持续病毒学应答(SVR12)、治疗过程中安全性及随访过程中出现不良事件情况。结果 本研究纳入了40例GT3型的慢丙肝患者，其中20%(8/40)存在代偿期肝硬化、5%(2/40)存在失代偿期肝硬化；5%(2/40)合并肾功能异常、5%(2/40)为肾移植术后、10%(4/40)合并乙型肝炎感染。40例患者接受12周或24周治疗方案，其中以SOF+DCV+RBV方案治疗失代偿性肝硬化患者，疗程为24周，非失代偿期肝硬化患者治疗疗程均为12周。在治疗的4、12周，DNVr+SOF+RBV组病毒学应答率分别93.3%、100%,与另外两组相比病毒学应答率差异无统计学意义(P=0.6Biomass fuel44,P=0.567),在治疗结束后第4、12周的随访时，DNVr+SOF+RBV组的病毒学应答率均为100%。与另外两组相比病毒学应答率差异无统计学意义(P=0.567)。各组治疗结束后肝癌发生率以及HCV RNA复阳率之间的比较均差异无统计学意义(P=0.567,P=0.285)。结论 以DNVr为基础的DAA抗病毒治疗方案，SVR12可达到100%,且安全性较高、不良反应较少。但仍需进行更大规模的研究，进一步评估以DNVr为基础的方案治疗GT3型慢丙肝患者的疗效及安全性。

目的探讨专科护士主导的精细化健康教育对ABT-199体内儿童尿道下裂术后并发症预防的应用效果。方法选取2019年7月-2021年6月期间收治在上海市儿童医院泌尿科行尿道下裂手术患儿656例作为研究对象,患儿均为男性。年龄2-12岁(4.2±1.1),其中2020年7月-2021年6月期间收治的患儿335例为观察组,年龄(4.3±1.3)岁,在传统护理Use of antibiotics的基础上实施专科护士主导的精细化健康教育措施,与2019年7月-2020年6月期间行尿道下裂手术患儿321例给予传统护理干预措施的对照组对比,评估两组术后1年内尿瘘、尿道狭窄的发生率、抗生素使用时间及患者住院时间。结果 656例儿童尿道下裂中对照组321例、观察组335例,观察组术后1年内出现尿瘘15例(4.48%),尿道狭窄5例(1.49%);其术后尿瘘和尿道狭窄发生率明显低于对照组(P<0.05寻找更多);观察组的抗生素使用时间为(10.02±1.20)天,患者住院时间为(11.26±1.51)天,其抗生素使用时间、患者住院时间明显少于对照组(P<0.05),差异有统计学意义。结论实施专科护士主导的精细化健康教育,可有效降低儿童尿道下裂术后尿瘘和尿道狭窄的发生率,并缩短抗生素使用时间和患者住院时间,提升儿科专科护理内涵。

目的 对比肝动脉化疗栓塞术(TACE)序贯联合CT引导肝肿Co-infection risk assessment瘤微波消融术(MWA)治疗大肝癌与单纯TACE治疗大肝癌的临床疗效与安全性。方法 采用回顾性分析，共选取60例于潍坊市中医院肝病科就诊治疗的大肝癌患者，根据其治疗方式不同分为TACE序贯微波消融联合Staurosporine治疗组36例和单纯TACE对照组24例，比较两组治疗后1年、3年、5年生存率、有效率、复发率、AFP下降水平以及副作用、并发症的发生率。结果 联合组疾病控制率(88.9%)优于对照组(62.5%),差异有统计学意义(P<0.05);两组患者1年、3年、5年生存率：联合组97.2%,69.4%,25%,对照组83.3%,41.7%,12.5%,中位生存期分别为44个月和28个月，差异有统计Talazoparib使用方法学意义(P<0.05);联合组AFP术后1个月水平(102.87±17.95)mg/ml与对照组AFP术后1个月水平(97.71±20.14)mg/ml比较，差异无统计学意义(P>0.05);联合组1年复发2例(5.6%),3年复发9例(25%),5年复发19例(52.8%),对照组1年复发3例(12.5%),3年复发10例(41.7%),5年复发15例(62.5%),差异无统计学意义(P>0.05);两组术后副作用及并发症比较，差异无统计学意义(P>0.05)。结论 (1)两组在疾病控制率、生存率等方面存在差异，TACE序贯微波消融术联合治疗对控制肿瘤发展有更好的疗效；(2)两组在治疗后AFP下降水平、复发率方面无明显差异，安全性均可。(3)TACE序贯联合CT引导下微波消融术可作为大肝癌的临床常规治疗手段，但治疗后应注意加强保肝治疗。

厌氧消化是实现餐厨垃圾资源化利用和无害化处理的有效手段。然而，selleckchem LY294002餐厨垃圾中含有的大量的异源物质将对厌氧体系产生潜在影响。主要探究了典型异源物质（NaCl、调味剂等）对餐厨垃圾厌氧消化效能的影响。分析发现，异源物质主要通过影响微生物群落结构（如甲烷鬃毛菌属、甲烷杆菌属、甲烷八叠球菌属等产甲烷菌）、代谢活性（如细胞膜通透性、渗透压和关键酶活性等）、微生物代谢功能和及关键功能基因的表达（如ACAS和mcrA等）方式对餐厨垃圾厌氧消化效能产生抑制。然而通过采用物理（如热、超声、生物炭吸附等）、化学（如酸、碱、高级氧化技术等）、生物（如功能菌富集、微生物驯化、酶等）等预处理手段可有效削减和调控餐厨垃圾的Genetic basis消化效能。最后，针对多种异源物质的协同影响以及源头分类、生化调控优化技术的结合和开发等角度进行了展望，为餐厨垃圾厌氧消化效能的进一步提升提供VX-445体内实验剂量理论指导。

唾液酸苷酶参与了复制后的病毒的解离与释放过程,研发临床应用稳定、选择性高、抑制活性好的唾液酸苷酶抑制剂具有重要的医药研究价值。与唾液酸氧苷、氮苷、硫苷相比,唾液酸碳苷化合物具有稳定的化学结构,能够适应多种生理环境下的水解过程,也是抵御唾液酸苷酶水AY-22989溶解度解的优良底物。本文首先利用计算机辅助药物设计的方法,构建结构多样的唾液酸碳苷衍生物,并用分子对接的方法预测其生物活性;其次应用我们课题组发展的唾液酸碳苷合成方法,选取预测活性较好的底物开展糖化学合成研究,完成了若干重要唾液酸分子的制备,最后针对所selleckchem Pexidartinib合成的唾液酸碳苷进行酶活以及细胞水平的抗病毒活性研究。基于对唾液酸配体结合域的详细分析,我们在设计构建唾液酸碳苷时引入了芳环、羟基synthesis of biomarkers、氨基等药效团,期望通过其与唾液酸苷酶配体结合域中残基之间的π-π作用、π-阳离子作用、氢键作用或静电作用,增强底物与唾液苷酶之间结合作用。分子对接结果显示这些化合物具有优于或相当于上市药物的唾液酸苷酶抑制活性。我们从所设计的新化合物中挑选了五个预测活性较好的目标物,使用了唾液酸对甲基苯硫苷、磷酸酯为供体,三丁基锡烯丙基为受体进行自由基反应生成了唾液酸烯丙基苷化合物1-8,接着化合物1-8与一系列不同的端烯发生CM完成了目标分子的全合成。此外,依据文献报道以及我们课题组的前期研究,簇合物可能较其单体表现出更佳的生物活性,因此本文还设计合成了唾液酸碳苷二聚体、三聚体、以及纳米金负载唾液酸碳苷化合物,并对其活性进行了探索研究。活性测试结果显示,当在唾液酸C2位用碳苷引入萘环或形成三聚体得到的唾液酸碳苷化合物具有良好的唾液酸苷酶抑制活性,纳米金负载唾液酸碳苷类化合物的活性还在探索中。