目的 探讨精细化护理模式对青光眼合并高血压患者围术期血压的影响。方法 79例行手术治疗的青光眼合并高血压患者依据随机数字表法分为精细护理组40例及常规护理组39例,在围术期分别给予精细化护理及常规护理。使用高血压治疗依从性量表(TASHP)从遵医行为、不良行为、日常生活管理、烟酒嗜好管理4个维度评价患者治疗依从性;使用自我管理能力量表(ESCA)评价患者自我管理能力。对比2组患者术前1 d、术日清晨、返回病房、术后1 d血Medical error压情况。结果 干预后,精细护理组患者TASHP量表评分高于常规护理组(P<0.05);ESCA量表各项评分较干预前Y-27632分子式均显著提高并高于常规护理组(P<0.05);围术期各时间点血压均低于常规护理组(P<0.05)。结论 精细化护理模式可提高青光眼合并高血压患者围术期高血压治疗依从性及自我管理能力,对稳定患者围术期血压具Puromycin作用有积极作用。
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蔗糖磷酸化酶基因的挖掘,性质表征及合成α-熊果苷的研究
对苯二酚(Hydroquinone,HQ)作为一种天然高效的美白成分,曾被广泛添加于护肤品中,但其具有一定的细胞毒性。α-熊果苷作为HQ的天然衍生物,具有稳定性好,毒副作用少等优势,在化妆品、食品、医药等领域具有巨大的应用价值。目前通过酶法催化是普遍认可的一种最安全高效的合成α-熊果苷的方式。蔗糖磷酸化酶(Sucrose phosphorylase,简称SPase)是一种应用最广的合成α-熊果苷的酶,其原理是通过将蔗糖分子中的葡萄糖苷转移到HQ分子上从而得到α-熊果苷。但是目前已经筛选得到应用于α-熊果苷生产的SPase存在种类较少,催化活力不高的缺陷。因此,本研究的目的是从生物数据库中挖掘到一种新的高催化活性的SPase,对其进行酶学表征,并且将其应用于α-熊果苷的生物合成,最后通过半理性设计对其进行分子改造以提高其催化活性。具体研究内容如下:(1)本研究通过序列比对选择了五种不同微生物来源的SPase基因进行密码子优化以及合成,并且将合成得到的目的基因克隆到重组载体p ET20b(+)中,随后将重组质粒转入大肠杆菌细胞中表达,并通过引入诱导型分子伴侣质粒p G-Tf2表达分子伴侣蛋白Gro ES-Gro EL和Tf因子成功解决了SPase在大肠杆菌中的表达是以不可溶且无活性的包涵体形式存在的问题。成功构建了一Extra-hepatic portal vein obstruction个由5种SPase组成的小型酶库,用于筛选高催化性能的SPase。通过对粗酶液进行初步的催化性质分析VEGFR抑制剂,选择了合成a-熊果苷水平较高的来源于Paenibacillus elgii的SPase(Pe SP)作为出发酶进行后续的研究。通过共表达条件优化发现在OD_(600)为0.9时向培养基中加入终浓度为0.05 m M的IPTG和10 ng×m L~(-1)的四环素作为诱导剂,在20℃、180 rpm摇床培养20 h,蛋白的可溶性水平最高,Pe SP的粗酶液酶比活力从77.63U×mg~(-1)提高到了91.64 U×mg~(-1)。(2)对经纯化的重组Pe SP的酶学性质进行分析,结果表明其最适温度为35℃最适p H为7.0,在35℃的半衰期为3.6 h,在p H 6.5-8.5稳定性较好,对于高浓度金属离子较敏感。以蔗糖为底物的K_m、V_(max)、K_(cat)值分别为14.50 m M、227.27μmol×mg~(-1)×min~(-1)以及141.88 min~(-1)。优化重组Pe SP生物催化合成α-熊果苷的反应条件,发现在30℃,p H 7.0的条件下,利用摩尔比为5:1的蔗糖与HQ通过200U×m L~(-1)的Pe SP催化反应25 h可获得的a-熊果苷最高产量为52.60 mg×m L~(-1),HQ转化率为60.9%。(3)为提高Pe SP的催化能力,对其进行了半理性改造。通过对影响Pe SP活性最明显的3个氨基酸残基进行定点饱和突变,获得了两个活性提高的突变体(K160E和R348I),对突变体进行酶学性质分析与合成熊果苷条件优化。发现突变体K160E和R348I的比活力分别为215.42 U×mg~(-1)和202.36 U×mg~(-1),提高到了原来的1.27和1.19倍,突变体的K_(cat)值分别为204.25 min~(-1)和173.92 min~(-1),提高到原来的1.44和1.22倍,说明突变体相对于野生型Pe SP来说对底物的亲和性都有所提高,但是突变体的热稳定性相比野生型都有所下降。突变体转化HQ合成a-熊果苷的最高产量分别为65.73 mg×m L~(-1)和58.73 mg×m L~(-1),提高到原来的1.25倍和1.12倍,HQ转化率分别为79.01%和70.60%,提高到原来的1.09倍和1.06倍。此外,本研究还对影响Pe SP稳定性的关键氨基酸残基进行了分析,找到了对Pe SP热稳定性影响较大的氨基酸VX-445试剂残基,为优化SPase稳定性提供了参考。
植物工厂模式下LED光质对水培韭菜生长、风味及品质的影响
为探究植物工厂中适合韭菜生长的最佳光质,本试验以韭菜品种‘791’为材JNJ-42756493体内料,设置白光、红光、蓝光和绿光4种光质处理,研究不同LED光质对水培韭菜生长、产量、营养成分和风味品质的影响。结果表明,与白光相比,红光处理下韭菜叶宽、产量和根系活力分别提高17.0%、31.6%和9.2%,总酚和类黄酮含量分别提高28.6%和40.9%,并抑制韭菜株高和假茎粗的增加;蓝光处理下韭菜生长更加健壮,产量较高,可溶性蛋白、酶促丙酮酸、VC含量最高,总酚、类黄酮含量较高,diagnostic medicine纤维素、硝态氮含量最少。电子鼻传感器显示,氮氧化物(W5S)、硫化合物(W1W)、芳烃化合物和硫的有机化合物(W2W)各风味物质在蓝光处理下相对电导率值最高,表明蓝光处理能提高韭菜风味获悉更多品质含量。综合分析认为,韭菜生产中使用蓝光进行处理能实现较高产量、最优品质及风味的有机结合。
BoTCP在芥蓝叶片发育过程中的作用机制
叶片作为光合作用的功能器官,对植物的生长发育至关重要,影响叶菜的产量和风味品质。芥蓝属于中国特产的十字花科芸Emricasan溶解度薹属甘蓝类蔬菜,其食用部位为肥嫩的菜薹和嫩叶。然而,在芥蓝生长过程中叶片发育及形态建成的转录调控机制仍然知之甚少,因而研究芥蓝叶片发育及形态建成的分子机制具有重要意义。本文以‘香菇’芥蓝(Brassica oleracea cv.‘Xiang Gu’)为实验材料,首先结合叶片转录组分析代谢通路的差异表达基因,然后选择关键基因进行生物信息学分析。其次针对关键成员进行启动子载体、基因过表达载体及基因敲除载体的构建等功能验证实验,接着对关键基因的潜在上下游调控通路进行酵母单杂交和蛋白互作等验证实验。最后观测转基因植株表型变化及相关基因表达情况,从表观遗传学和分子生物学上阐明关键基因在叶片发育过程中的作用机制。主要研究结果包括以下四个方面:1基于转录组测序分析芥蓝叶片发育过程中代谢通路差异表达基因为了探究‘香菇’芥蓝(XG)叶片发育及变态叶形态建成的主要影响因素,针对‘香菇’芥蓝叶片生长发育共12个样品测序分析。发现4个比较组DE-m RNAs的KEGG主要富集在植物激素信号转导通路。基于WGCNA及Cytoscape基因共表达网格分析,发现植物激素信号传导关键基因主要与RNA结合、细胞分裂素、赤霉素、生长素和TCP蛋白结构域相关。2芥蓝BoTCP家族全基因组鉴定及表达分析为明确芥蓝TCP家族相关基因在叶片发育中的功能,本研究基于甘蓝基因组数据,分析鉴定出芥蓝TCP基因家族有40个成员,参考拟南芥同源TCP基因注释及拟南芥数据库基因的相对表达量,初步选取BoTCP21和BoTCP25基因,采用q RT-PCR分析。结果表明:BoTCP21和BoTCP25均在叶片中大量表达,但二者在真叶不同部位的表达模式存在差异。为了进一明确TCP基因家族中参与叶片发育的基因,采用生物信息学方法并结合q RT-PCR对BoTCP家族进行了全面分析。结果显示:40个BoTCP都属于非分泌亲水性蛋白,分别定位在8条染色体上;系统进化树构建和亲缘关系分析将芥蓝中的BoBiomedical ResearchTCP成员归为三类,其中PCF亚家族有19个成员,CYC亚家族8个,CIN亚家族13个。q RT-PCR结果表明:BoTCP21和BoTCP25在真叶和薹叶中具有较高的表达量,BoTCP14在开花结荚的植株根部表达量较高,而BoTCP16则在抽薹植株的根部表达量最高,说明BoTCP家族成员在组织部位表达存在时空特异性且广泛参与了植株的形态建成和器官发育。3 BoTCP25在芥蓝叶片发育调控中的功能在前期的研究中,我们已经鉴定了BoTCP25在芥蓝叶片中的高表达。为了了解BoTCP25在叶片中的功能,我们克隆了BoTCP25并构建了相关的载体。亚细胞定位分析表明,BoTCP25定位于细胞核内,而对BoTCP25启动子转化的拟南芥植株的GUS染色表明,BoTCP25在整个生长过程中广泛表达。我们还获得了过表达的BoTCP25转基因拟南芥和芥蓝植株,表型分析显示,异源过表达TCP25促进了拟南芥叶片数量和叶面积的增加,而过表达TCP25则影响了芥蓝变态叶的位置和数量,同时导致幼叶向下卷曲。酵母单杂交实验证实BoTCP25可以与BoNGA3的启动子结合。此外,pre-mi R319的表GW-572016采购达模式与BoTCP25和BoNGA3的表达模式相反,暗示它们可能形成一个mi R319a-BoTCP25-BoNGA3模块,共同参与芥蓝叶片发育及形态建成的调控。此外,BoTCP25的表达响应激素元件,如乙烯和生长素。综上所述,我们的研究表明,mi R319a-BoTCP25-BoNGA3模块在植物叶片发育和形态建成中起着重要作用。4突变体tcp16和mir319a在芥蓝的功能分析前期通过生物信息学分析,发现BoTCP16和BoTCP25与mi R319a存在靶向调控关系且蛋白预测分析BoTCP蛋白与BoARF4蛋白可能存在互作关系。通过构建相关敲除载体并转化拟南芥和‘香菇’芥蓝,我们发现拟南芥tcp16突变体植株变小叶片数量减少且不存在主薹,相反mir319a突变体植株叶片增多而抽薹时间延迟;同时对突变体tcp16‘香菇’芥蓝植株表型观测,发现突变体植株叶片及变态叶数量减少,同时株型矮化表现为植株株高、株幅和节间长度均显著降低。q RT-PCR分析表明BoTCP16在突变体叶片部位的表达均下调,这与BoTCP25和BoARF4表达模式相似。通过双分子荧光互补证实了BoTCP16蛋白与BoARF4蛋白存在互作关系,外源添加生长素抑制剂NPA表明生长素对叶片发育及变态叶的诱导至关重要。综上所述,tcp16突变体在拟南芥和‘香菇’芥蓝植株有相似的功能,BoTCP16受到mi R319的负调控,同时可能受到生长素的直接调节,此外BoTCP16与生长素响应因子BoARF4蛋白存在互作关系。以上结果说明Bomi R319-BoTCP16/BoARF4模块通过调节植株体内激素含量的分布,从而共同参与对叶片发育的调控,进而影响植株株型。
益肾活血通窍方对老化模型大鼠听皮层铁死亡的影响
目的 观察益肾活血通窍方对D-半乳糖腹腔注射致老化模型大鼠听皮层铁蛋白、P53、溶质载体家族7成员11(recombinant solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)、还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathioneperoxidase4,GPx4)表达水平的影响,探gamma-alumina intermediate layers讨益肾活血通窍法延缓听皮层老化的机制。方法将45只大鼠随机分成空白组、模型组、中药组,每组15只。空白组腹腔注射生理盐水(500 mg·kg~(-1)·d~(-1)),模型组、中药组腹腔注射D-半乳糖(500 mg·kg~(-1)·d~(-1)),连续注射8周;同时,空白组、模型组灌服生理盐水(18.45 g·kg~(-1)·d~(-1)),中药组灌服益肾活血通窍方(18.45 g·kg~(-1)·d~(-1)),连续灌服8周。末次给药后2 h检测各组大鼠听性脑干反应(ABR)反应阈后进行听皮层取材,采用EliPanobinostat供应商sa法检测各组大鼠听皮层铁蛋白、GSH的表达水平;采用Western-blot法检测各组大鼠听皮层P53、SLC7A11、GPX4的表达水平。结果 模型组和中药组造模后ABR反应阈值较空白组和造模前升高(P<0.05)。与空白组比较,模型组大鼠听皮层组织中铁蛋白、P53表达增高,模型组、中药组SLC7A11、GSH、GPX4表达降低(P<0.05);与模型组比较,中药组大鼠听此网站皮层铁蛋白(P<0.05)、P53表达水平降低,SLC7A11(P<0.05)、GSH、GPX4(P>0.05)表达水平提高。结论 益肾活血通窍方对老化模型大鼠听皮层具有保护作用,其机制可能与调控铁稳态与铁死亡通路相关。
肠道共生菌对葡聚糖硫酸钠诱导的肠道炎症的影响及作用方式的差异(英文)
Inflammatory bowel disease(IBD) is a complex relapsing inflammatory disease in the gut and is driven by complicated host-gut microbiome interactions. Gut commensals have shown different functions in IBD prevention and treatment. To gain a mechanistic understanding of how different commensals affect intestinal inflammation, we compared the protectCanagliflozin MWive effects of 6 probiotics(belonging to the genera Akkermansia, Bifidobacterium, Clostridium, and Enterococcus) on dextran sulfate sodium(DSS)-induced colitis in mice with or without gut microbiota. Anti-inflammatory properties(ratio of interleukin(IL)-10 and IL-12) of these strains were also evaluated in an in vitro mesenteric lymph nodes(MLN) co-culture system. Results showed that four probiotics(belonging to the species Bifidobacterium breve, Bifidobacterium bifidum, and Enterococcus faecalis) can alleviate colitis in normal mice. The probiotic strains differed in regulating the intestinal microbiota, cytokines(IL-10, IL-1β and interferon(IFN)-γ), and tight junction function(Zonulimedium- to long-term follow-upn-1 and Occludin). By constrast, Akkermansia muciniphila AH39 and Clostridium butyricum FHuNHHMY49T1 were not protective. Interestingly, B. breve JSNJJNM2 with high anti-inflammatory potential in the MLN model could relieve colitis symptoms in antibiotic cocktail(Abx)-treated mice. Meanwhihttps://www.selleck.cn/products/kd025-(slx-2119).htmlle, E. faecalis FJSWX25M1 induced low levels of cytokines in vitro and showed no beneficial effects. Therefore, we provided insight into the clinical application of probiotics in IBD treatment.
经尿道前列腺等离子电切术与绿激光汽化术治疗良性前列腺增生患者的临床效果比较
目的 比较经尿道前列腺等离子电切术(TUPKRP)与绿激光汽化术(PVP治疗良性前列腺增生(BPH)Nirogacestat细胞培养患者的临床效果。方法 回顾性分析2021年1月至2022年12月宿迁市钟吾医院收治的82例BPH患者的临床资Chemical-defined medium料,根据手术方式不同分为TUPKRP组(40例)与PVP组(42例)。比较两组围手术期相关指标、术前和术后1个月的国际前列腺症状评分法(IPSS)、生活质量(QOL)评分及术后并发症发生情况。结果 TUPKRP组手术时间短于PVP组,术中出血量多于PVP组,术后留置导尿管时间、住院时间均长于PVP组,差异有统计学意义(P<0.05)。术后1个月,两组IPSS及QOL评分均低于术前,差异有统计学意义(P<0.05);但术前、术后1个月组间比较,差异均无统计学意MK-2206分子式义(P>0.05)。PVP组术后并发症发生率低于TUPKRP组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TUPKRP与PVP治疗BPH患者的疗效相当,TUPKRP较PVP术中出血量更多,术后留置导尿管时间和住院时间更长,但PVP术后并发症更少。
CalliSpheres可载药微球经导管肝动脉化疗栓塞序贯射频消融治疗原发性肝癌患者疗效研究
目的 研究在经导管肝动脉化疗栓塞(TACE)术时应用CalliSpheres可载药微球化疗序贯射频消融(RFA)治疗原发性肝癌(PLC)患者的疗效。方法 2019年1月~2021年1月我院收治的PLC患者79例,被分为两组,43例观察组采用CalliSpheres可载药微球TACE序贯RFA治疗,36对照组采用常规TACE序贯RFA治疗。根据实体瘤疗效考核标准评估短期疗效,采用电化学发光分析仪检测血清甲胎蛋白(AFP)和人热休克蛋白90α(HSP90α)。随访2年,记录两组生存情况。结果 在治疗后1 m末,观察组肿瘤晚期缓解、部分缓解、疾病稳定和疾病控制率分别为23.3%、46.5%、16.3%和86.1%,对照组分别为11.1%、36.1%、19.4%和66.7%,其疾病控制率差异显著(P<0.05);在治疗后3 m,观察组血清ACell Cycle抑制剂FP和HSP90α水平分别为(87.5±14.5)μg/L和(126.1±13.3)ng/mL,均显著低于对照组【分别为(164.6±17.2)μg/L和(150.8±19.7)ng/mL,P<0.05】确认细节;在治疗期间观察组和对照组不良反应发生率分别为48.8%和50.0%,差异无统计学意义(P>0.05);观察组和对照组1 a生存率分别为83.7%和72.2%,差异无统计学意义(P>0.05),而2 a生存率分别为69.8%和47.2%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 采用CalliSpheres可载药微球TACE序贯RFA治疗PLC患者近期疗redox biomarkers效显著,可有效提高患者近期生存率,值得进一步探究。
前列腺增生症患者中前列腺炎症严重程度的预测模型构建
目的 从临床及实验室指标中筛选前列腺增生症(benign prostatic hyperplasia, BPH)患者中患有前列腺炎症的预测因子并构建预测模型。方法 选择我院2019年5月至2021年3月收治的择期行经尿道前列腺电切术(transurethral resection of prostate, TURP)的BPH患者200例,年龄56~85岁。术前检测外周血淋巴细胞计数及游离/总前列腺特异性抗原(Free/Total prostate specific antigen, f/t PSA)数值,并评估国际前列腺症状评分(international prostate symptom score, IPSS)。术后前列腺组织送病检,分析外周血淋巴细胞计数、TPSA、f/t PSA数值、相关临床化验指标及相关下尿路道症状(lower urinary tract symptoms, LUTS)与前列腺组织炎症分布的关系。结果 随着前列腺组织炎症的加重,IPSS评分及tPSA数值越大,selleck HPLC而f/t PSA数值和淋巴细胞计数越低;对200例BPH患者进行单因素及多因素Logistic回归分析表明,年龄(≥60岁)[odds ratio(OR)=0.29,95%CI=0.31-2.10;P=0.02]、IPSS评分[OR=1.24,95%CI=1.13-1.37;P<0.01]、tPSA [OR=1.10, 95%CI=1.02-1.19;P=0.02]、f/t PSA [OR=0.83, 95%CI=0.34-1.23;P=0.02]、淋巴细胞[OR=0.70, 95%CI=0.78-3.77;P=0.04]与BPH患者前列腺组织炎症形成有关。使用受试者工作secondary endodontic infection特征曲线(receiver operating characteristic curve, ROC)评估这些指标在诊断前列腺炎症的特异性和敏感性,结果表明tPSA、f/t PSA、IPSS评分和淋巴细胞计数在诊断前列腺炎症方面具有3-MA较好的特异性和敏感性。结论 外周血淋巴细胞计数、tPSA、LUTS严重程度及f/t PSA比率能够预测前列腺炎症严重程度,可能作为患有LUTS症状的BPH患者的前列腺炎诊断预测标志物,优化针对患有前列腺炎的BPH患者的LUTS症状的药物治疗。
不同中医证型骨髓增生异常综合征患者自噬性组蛋白密码的差异性研究
目的 研究不同中医证型骨髓增生异常综合征(MDS)患者自噬性组蛋白密码表达的差异性。方法 根据相关标准将MDS患者分为正虚毒蕴组、毒盛正虚组,将健康人群设为健康对照组,采用激光扫描共聚焦显微镜观察比较各组骨髓单个核细胞(BMMNCs)自噬囊泡,流式细胞术检测BMMNCsAlpelisib体内自噬水平,Western blot法检测BMMNCs组蛋白密码表达情况。结果 (1)与健selleck HPLC康对照组比较,正虚毒蕴组、毒盛正虚组BMMNCs自噬囊泡数量减少(P<0.05);与正虚毒蕴组比较,毒盛正虚组BMMNCs自噬囊泡数量进一步减少(P<0.05)。(2)与健康对照组比较,正虚毒蕴组BMMNCsOncolytic Newcastle disease virus的甲基化修饰[组蛋白H3亚基27号赖氨酸甲基化(H3K27me)、组蛋白H4亚基16号赖氨酸甲基化(H4K16me)]表达水平升高(P<0.05),乙酰化修饰[组蛋白H3亚基4号赖氨酸乙酰化(H3K4ac)、组蛋白H3亚基9号赖氨酸乙酰化(H3K9ac)]表达水平降低(P<0.05),毒盛正虚组BMMNCs的H3不同位点及H4位点的甲基化修饰水平升高(P<0.05),乙酰化修饰[H3K4ac、H3K9ac、组蛋白H3亚基27号赖氨酸乙酰化(H3K27ac)、组蛋白H3亚基56号赖氨酸乙酰化(H3K56ac)、组蛋白H4亚基16号赖氨酸乙酰化(H4K16ac)]表达水平降低(P<0.05)。结论 MDS患者与正常人群BMMNCs自噬水平及组蛋白修饰水平表达存在差异,H3不同位点及H4位点的高甲基化及低乙酰化水平会通过下调细胞自噬水平参与MDS的发生、发展。