FT(FLOWERING LOCUS T)是开花调控网络的信号整合因子。FT蛋白在叶片中合成,转移到顶端分生组织发挥成花诱导作用。目前在大豆中发现了10个FT同源基因,其中GmFT2a是主要的开花促进因子之一。现已证明大豆FT蛋白可以移动到根部诱导根瘤的产生,但FT运动到顶端分生组织促进成花的过程还未被证实。NaKR1(SODIUM Pgenomics proteomics bioinformaticsOTASSUIM ROOT DEFECTIVE 1)是一种在拟南芥韧皮部特异表达的基因,NaKR1可以协助FT在韧皮部运输。然而,GmNaKR1蛋白能否在大豆中与FT蛋白互作并发挥作用尚不清楚。本研究以大豆品种Jack为材料,利用实时荧光定量PCR技术,分别在长日和短日照条件下,分析GmNaKR1在不同组织、不同发育时期、不同生育期组大豆品种中的表达模式;通过转基因技术分析GmNaKR1在大豆光周期调控开花途径中的功能以及与GmFT2a间的相互关系,以期深化对大豆成花素移动性的认识,为大豆开花期调控和生态适应性改良提供理论依据。主要研究内容和结果如下:(1)通过对GmNaKR1的生物信息学分析,在大豆基因组中共筛选出90个含有HMA结构域的GmNaKR1同源基因。共线性分析表明,90个GmNaKR1同源基因分布在18条染色体上,其中19、3、10号染色体上的GmNaKR1基因最多。构建系统发育进化树得出与拟南芥同源性最高的GmNaKR1(Glyma.19G175100.1),位于19号染色体上,由3个外显子Entinostat生产商和2个内含子组成。(2)利用实时荧光定量PCR分析在GmNaKR1大豆不同组织的表达模式、节律表达、不同生育时期的表达模式。组织特异性表达模式分析结果表明,在短日条件下,GmNaKR1主要在三出LGX818研究购买复叶和下胚轴中表达;在长日条件下,GmNaKR1主要在对生真叶和上胚轴中表达。不同生育时期的表达模式分析表明从出苗后第13 d开始,在短日条件下的表达量急剧上升,在14-27 d内达到峰值并下降。GmNaKR1在不同生育时期大豆品种中的表达模式有所不同:在极早熟品种黑河27和中熟品种Jack中的表达模式相似,即在长日条件下的表达较为稳定,而在短日条件下有明显的表达峰值;在极晚熟品种自贡冬豆中,GmNaKR1在长、短日下的表达模式相似,在一天内的表达水平较为稳定。(3)构建绿色荧光蛋白(GFP)的融合表达载体,农杆菌介导的烟草瞬时表达的定位实验表明,GmNaKR1定位于细胞核和细胞膜内。(4)通过双分子荧光互补和pull-down实验,证明了GmNaKR1与GmFT2a存在互作关系。(5)以农杆菌介导的方法侵染大豆子叶节进行遗传转化,获得过表达植株和gmnakr1d纯合基因组编辑植株。GmNaKR1-OE在短日条件下的开花期比野生型延迟约1 d。在短日条件下gmnakr1d与野生型开花时间无区别。