目的:急性髓细胞白血病(Acute myeloid leukemia,AML)是一种恶性的血液系统肿瘤,预后极差。越来越多的micro RNAs作为重要的调节因子,参与肿瘤的programmed cell death发生、发展。Micro RNA-409-3p(mi R-409-3p)异常表达与多种肿瘤包括胃癌、乳腺癌、结直肠癌、卵巢癌和宫颈癌等相关,然而其在AML中的作用机制未见报道。因此,本文探讨mi R-409-3p在AML中发生的生物学作用与机制,为AML的治疗提供分子靶点。方法:(1)采用实时荧光定量PCR(Real Time Quantitative PCR,RT-q PCR)方法检测人单核白血病细胞(THP-1)以及人骨髓基质细胞(HS-5)中mi R-409-3p和Rab10的表达;(2)设计并合成mi R-409-3p类似物(agomi R-409-3p和agomi R-409-3p NC)以及Rab10小干扰类似物(Si-Rab10和Si-control),用Lipofectamine3000脂质体转染方法将上述合成物转染至THP-1细胞中,应用RT-q PCR检测转染效率;(3)采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测过表达mi R-409-3p或敲低Rab10后对THP-1细胞增殖的影响;(4)采用Annexin V-FITC/PI法检测过表达mi R-409-3p或敲低Rab10后对THP-1凋亡的影响;(5)采用蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测过表达mi R-409-3p或敲低Rab10后凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达;(6)采用生物信息学方法预测mi R-409-3p与Rab10 m RNA的结合能力,通过双荧光素酶报告基因实验进一步验证mi R-409-3p与Rab10 3’UTR之间的靶向结合作用。采用RT-q PCR及Western blot检测分别检测过表达mi R-409-3p后Rab10m RNA和蛋白的表达。(7)构建稳转mi R-409-3p的THP-1细胞系植入SCID-Beige小鼠体内,观察mi R-409-3p对SCID-Beige小鼠移植瘤的影响;(8)采用HE(Hematoxylin-eosin)染色检测过表达mi R-409-3p后组织炎症增生和坏死程度;(9)应用免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)检测过表达mi R-409-3p后Rab10以Ki-67指标变化。结果:(1)RT-q PCR结果显示,相对于HS-5,THP-1中mi R-409-3p明显下调,而Rab10明显上调(P<0.05);(2)RT-q PCR验证mi R-409-3p过表达物以及Rab敲低物转染效果良好(P<0.05);(3)细胞功能实验表明相对于各自对照组,过表达mi R-409-3p或敲低Rab10均可以抑制白血病细胞系THP-1的增殖和凋亡(P<0.05);(4)Western blot结果显示,相对于各自对照组,过表达mi R-409-3p或敲低Rab10均可以使凋亡相关蛋白Bax表达上调,而Bcl-2表达下调(P<0.05);(5)利用生物信息学预测发现mi R-409-3p与Rab10 3'UTR区域之间存在可能结合的位点,RT-q PCR以及Western blot结果表明转染mi R-409-Microtubule Associat抑制剂3p过表达物后Rab10m RNA和蛋白表达量下降,双荧光素酶报告基因实验显示Rab10-WT+agomi R-409-3p共转染组相对荧光素酶活性均低于其他组(P<0.05);(6)SCID-Beige小鼠荷瘤实验表明,稳定过表达mi R-409-3p的SCID-Beige小鼠肿瘤体积和重量明显低于对照组(P<0.05);(7)HE结果表明相对于对照组,过表达mi R-409-3p组的炎症增生和坏死程度降低(P<0.05);(8)免疫组化结果表明相对于对照组,过表达mi R-409-3p组中Rab10、Ki-67阳性程度显著降低(P<0.05)。结论:miCobimetinib价格 R-409-3p在AML中通过下调Rab10抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,促进白血病的发展,为AML的治疗提供了潜在的分子靶点。