目的:研究Nrf2/keap1调控铁死亡在高糖诱导小胶质细胞(BV2)损伤中的作用及机制。方法:第一部分:使用CCK-8法检测不同糖浓度、不同干预时间下BV2细胞相对活力的变化;将培养的BV2细胞分为正常组、高糖组和甘露醇高渗组培养48小时。使用荧光酶标仪检测各组细胞内ROS表达变化情况;使用Western blot法检测各组细胞中Nrf2、keap1、x CT及COX2蛋白表达变化;使用RT-q PCR法检测各组细胞中Nrf2、keap1、x CT及COX2m RNA表达变化;使用铁离子和还原型GSH试剂盒检测各组细胞中铁离子和GSH的表达变化情况。第二部分:使用keap1 sh RNA慢病毒转染BV2细胞,筛选出稳定表达的细胞此网站株,分为对照组、过表达组和空载组在高糖环境下培养48小时。使用荧光酶标仪检测三组细胞高糖环境下ROS表达变化情况;使用Western blot法和RT-q PCR法检测三组细胞高糖环境下Nrf2、keap1、x CT及COX2的蛋白和m RNA表达变化情FG-4592 MW况;使用铁离子和还原型GSH试剂盒检测三组细胞高糖环境下铁离子和GSH的表达变化情况。结果:第一部分:根据CCK-8结果,选择35mmol/L糖浓度、48小时作为后续实验高糖的干预条件;高糖组与正常组相比,高糖组ROS表达量明显升高,铁离子和还原型GSH表达量均减少;Western blot和RT-q PCR结果显示:高糖组与正常组相比,Nrf2、x CT、COX2蛋白与m RNA表达水平均升高;keap1蛋白与m RNA表达水平下降;甘露醇高渗组与正常组相比,检测结果无统计学差异。第二部分:慢病毒转染后,过表达组keap1m RNA表达水平是对照组的3.6倍。过表达组与对照组相比,过表达组ROS和铁离子表达水平明显升高,而还原型GSH表达水平下降;Western blot和RT-q PCR结果显示:过表达组与对照组相比,COX2的蛋白与m RNA表达水平呈升高趋势,Nrf2和x CT的蛋白与m RNA表达水Biopharmaceutical characterization平呈相同趋势的降低。结论:高糖环境下,Nrf2/keap1通过介导System Xc~-对还原型GSH发挥调控作用进而影响铁死亡的发生,部分改善高血糖诱导的小胶质细胞损伤。