achr抑制剂

失眠症作为第二大最普遍的精神障碍,影响睡眠的发生和维持,并伴有诸如清醒时的烦躁或疲劳等症状。然而目前临床上用于治疗失眠的药物长期使用会导致一些不良反应。近年来,大量研究发现,许多中药具有良好的镇静催眠作用,且副作用低。鉴于此背景,本论文以改善睡眠为功能指标、以药食同源中药材为原料,通过数据挖掘、配伍优化、功能评价及作用机制分析,进行了有助于改善睡眠的功能性食品配方设计研究,完成的主要研究内容及结果有以下几方面:(1)基于数据挖掘的改善睡眠药食同源中药材原料筛选。对文献及专利进行数据挖掘,得到804个配方,包括文献配方70个,专利配方666个,特殊食品配方68个。前10味高频药食同源中药为酸枣仁、当归、茯苓、百合、黄芪、党参、枸杞、龙眼肉、人参、栀子;由关联规则分析可知,关联selleck合成度最高的前两个组合分别是酸枣仁-当归、酸枣仁-茯苓,高频原料关联网络显示,酸枣仁-当归-茯苓关联度最强;改善睡眠高频中药功效可分为8类,按照频次高低依次为:安神药、补气药、利水渗湿药、补血药、清热药、补阴药、温里药、平肝息风药;高频中药用药属性分析中,使用频率最高的药性方面为平性药、药味方面为甘味药、归经方面为心经。通过以上分析并结合中医理论Dorsomorphin纯度推理出改善睡眠的原料为酸枣仁、茯苓、当归、黄芪、栀子。(2)基于药食同源中药材改善睡眠的功能性食品配方设计。以PCPA失眠小鼠为模型,通过均匀设计法对酸枣仁、茯苓、当归、黄芪和栀子的合理组成和剂量配比进行优化,经戊巴比妥钠延长睡眠时间实验、巴比妥钠睡眠潜伏期实验、戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验的评价,分别得到三组理论配方:配方一包括酸枣仁15 g、茯苓13.6 g、当归10 g、黄芪30 g;配方二包括茯苓15 g、当归10 g、黄芪30 g、栀子10 g;配方三包括酸枣仁15 g、茯苓15 g、当归10 g;验证试验表明,配方二改善睡眠效果最佳。(3)配方二改善睡眠的功能评价。通过《保健食品功能评价方法(2020年版)(征求意见稿)》中所列的方法进行功能评价,证明了配方二的改善睡眠作用;进一步的睡眠相关神经递质5-HT、GABA、DA含量测定表明,配方二能升高小鼠脑组织的5-HT和GABA含量,降低DA含量(p<0.01)。(4)配方二改善睡眠的作用机制网络药理学探析。网络药理学分析表明,配方二改善睡眠的主要活性成分为槲皮素、豆甾醇、谷甾醇、去氢齿孔酸,核心作用靶点为ACTB、AKT1、IL6、TNFConditioned Media、INS、IL1B、TP53、CASP3、CXCL8,参与的信号通路主要涉及神经突触信号的传递和炎性细胞因子的调控。综上所述,本研究所设计的由茯苓15 g、当归10 g、黄芪30 g、栀子10 g组成的配方(即配方二)具有改善睡眠的功能,其改善睡眠的作用机制可能与神经突触信号传递和炎性细胞因子调控有关,研究结果为有助于改善睡眠的功能性食品开发提供了有效配方。

目的 探析超声引导下胸椎旁阻滞联合全麻更多在乳腺癌改良根治术中的应用效BMS-354825配制果。方法 回顾性分析，将2017年9月-2021年4月75例在乳腺癌改良根治术中采用全麻的患者临床资料，纳入对照组；另将同期75例采用乳腺癌改良根治术中采用超声引导下胸椎旁阻滞联合全麻的患者临床资料，纳入观察组；比较两组手术情况(手术时间、术后苏醒及术后拔管时间)和术后1 h(T0)、术后6 h(T1)、术后12 h(T2)、术后24 h(T3)时视觉模拟疼痛评分法(VAS)评分以及不良反应发生情况[呼吸抑制、嗜睡、瘙痒以及苏醒期躁动]。结果 两组手术时间比较，差异不明显(P>0.05);观察组术后苏醒时间、术后拔管时间均较对照组短(P<0.05);T0、T1、T2时，两组VAS评分逐渐降低，且观察组低于对照组(P<0.05);T3时两组VAS评分比较，差异无统计学意义(P>0.05);观察组与对照组不良反应发生情况对比，无明显差异(P>0.05)。结论 超声引导下胸椎旁阻滞联合全麻food as medicine在乳腺癌患者改良根治术中的应用效果显著，可缩短术后清醒时间、术后拔管时间，降低患者疼痛程度。

目的 探讨乳凝集素抗独特型抗体Ab2β对新生乳鼠感染人轮状病毒（HRV）的预防与治疗中的作用实验研究。方法：采用杂交瘤技术制备乳凝集素抗独特型抗体；选取120只7d龄昆明小PF-07321332配制鼠乳鼠作为研究对象，采用随机数字表法将其分为A、B、C组以及对照组，每组30只，A、B、C三组均采用灌胃病毒方式造模，其中A组造模后不进行任何处理，B组在造模前连续7d喂服乳凝集素，C组在造模后连续7d喂服乳凝集素，对照组灌胃不含病毒的细胞培chaperone-mediated autophagy养液。观察各组乳鼠感染病毒后不同时间点的临床表现（腹泻、体重）并采用酶联免疫分析法（ELISA）检测乳鼠粪便中轮状病毒抗原含量；HRV感染7d后，采用免疫组化法检测各组乳鼠小肠组织细胞间粘附分子1（ICAM-1）的表达水平。结果 对照组新生乳鼠各时间点均未非发生腹泻，A、B、C三组乳鼠在HRV攻击1d后出现腹泻症状，B、C组腹泻程度在HRV攻击后2d、3d和4d低于A组，差异有统计学意义（P＜0.05）；B、C组乳鼠粪便中HRV抗原含量在HRV攻击后1d、2d、3d、4d和5d低于A组，差异有统计学意义(P＜0.05)，B、C组各时间点腹泻程度和HRV抗原含量比较，差异均无统计学意义(P＞0.05)。各组乳鼠感染前、感染后1d体重比较，差异无统计学意义(P＞0.05)；B、C组乳鼠在HRV攻击后3d、5d和7d体重高于A组，差异有统计学意义（P＜0.05），B、C组乳鼠在HRV攻击后各时间点体重比较，差异均无统计学意义(P＞0.05)。A、B、C三组乳鼠在HRV攻击7d后小肠组织ICAM-1表达细胞数高于对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)，B、C组ICAM-1表达细胞数及灰度值低于A组，差异有统计学意义(P＜0.05)。结论 乳凝集素抗独特型抗体Ab2β对新生乳鼠人轮状病毒感染具有很好的预防与治疗作用，可显著改善腹泻症状、减降低HRV病毒载量，其具体作用机制可能与抑制小肠组织ICAMselleck抑制剂-1的表达有关。

目的：基于miR-199a/NF-κB信号通路探讨益气活血方(YQHX)抑制异位子宫内膜干细MLN8237采购胞(Endometrial Stromal Cells, ESCs)侵袭黏附的分子机制。方法：将25只雌性SD大鼠随机分为YQHX低、中、高剂量组，孕三烯酮组，生理盐水组，手术建立大鼠子宫内膜异位症模型，给药4周后制备含药血清。根据ESCs中miR-199a含量，挑选最佳YQHX实验血清。随后另将ESCs分为生理盐水组，YQHX组，YQHX+miR199a抑制剂组。通过CCK-8法测定细胞活力；Transwell检测细胞侵袭；qPCR法检测侵袭黏附相关基因表达；免疫印迹法检测IKKβ/p-IκBα/NF-κB P65蛋白表达。结果：选出YQHX高剂量组作为最佳含药血清；对比生理盐水组，YQHX组ESCs活性明显下降(P<0.01),而与YQHX组对比，YQHX+miR-1Reaction intermediates99a抑制剂组ESCs活性明显上升(P<0.01);与生理盐水组对比，YQHX组通过调控侵袭黏附相关基因抑制ESCs进展(P<0.01),而与YQHX组对比，YQHX+miR-199a组抑制侵袭黏附能力明显下降(P<0.05);对比生理盐水组，YQHX组能够有效抑制IKKβ/p-IκBα/NF-κB P65蛋白表达(P<0.05),而与YQHX组对比，YQHX+miR-199a抑制剂组的NF-κB通路抑制作用AZD9291使用方法明显降低(P<0.05)。结论：益气活血方可能通过调控miR-199a/NF-κB轴抑制子宫内膜异位症的侵袭与黏附。

目的 探讨三阴性乳腺癌(TNBC)的乳腺X射线肿块型病变影像学特征与肿瘤浸润Genetic dissection淋巴细胞(TILs)水平及临床病理特征的关联性。方法 回顾性分析2018-08-01—2019-11-30北京中日友好医院经手确认细节术病理确诊的86例TNBC患者病例资料。所有患者均行术前乳腺X射线影像学检查，共纳入86个癌肿块，并通过ITK-SNAP软件对癌肿块切割提取，经Python软件分析肿块灰度值分布范围，并以Jet色阶映射图的形式表达。采用免疫组化方法(IHC)计数TILs百分比并对免疫组化特征进行分析，根据计数情况以50%为界值，分为高水平TILs组(TILs≥50%,36例)和低水平TILs组(TILs<50%,50例),比较2组影像学特征参数及灰度值分布差异，并分析其与TILs水平及临床病理特征的关联性。结果 2组患者一般资料间差异无统计学意义。高水平TILs组和低水平TILs组的病理组织学分级(χ~2=13.676,P=0.041)和Ki-67阈值(χ~2=10.897,P=0.001)差异有统计学意义；低水平E-616452体外组组织学Ⅱ级较多(64.00%),而高水平组Ⅲ级较多(50.00%);同时高水平TILs组Ki-67阈值低于低水平TILs组。分析发现高水平TILs组的癌肿块形态多表现为类圆形(61.11%)、边缘光滑(69.44%),χ~2=1.728,P=0.003;低水平TILs组则表现为分叶状(62.00%)、边缘多毛刺(62.00%),χ~2=3.951,P=0.004。高水平TILs组(1 665)平均灰度分布值低于低水平TILs组(1 819);Jet灰度映射反映高水平TILs组灰度分布不均匀，而低水平TILs组灰度分布均匀，差异有统计学意义，χ~2=23.124,P<0.001。多因素分析结果显示，病理组织学分级(OR=0.139,95%CI为0.046～0.415,P<0.001)、Ki-67(OR=0.175,95%CI为0.058～0.523,P=0.002)、肿块形态(OR=18.944,95%CI为5.171～69.393,P<0.001;OR=7.750,95%CI为1.978～30.229,P=0.003)、肿块边缘(OR=3.708,95%CI为1.492～9.217,P=0.005)和Jet灰度映射图(OR=0.094,95%CI为0.033～0.263,P<0.001)是影响TILs水平的独立因素。结论 TNBC的乳腺X射线肿块型影像学病变特征与TILs水平及临床病理特征具有关联性。

本文以罗非鱼骨为原料,选取常用的生物蛋白酶进行酶解,筛选出具有最高钙螯合能力的罗非鱼骨酶解物。通过反相高效液相色谱法对筛选酶解物进行分离纯化,获得具有高钙螯合能力的肽组分,对其肽段进行鉴定。利用鉴定肽段,制备肽钙螯合物,对其结构进行表征,预测肽段与钙的螯合机制。通过分子对接对制备肽段的成骨活性进行评估,筛选出具有潜在成骨活性的肽段。建立诱导RAW 264.7破骨细胞和MC3T3-E1分化成骨细胞的模型,对筛选肽段的成骨活性进行评价。主要研究结果如下:1.使用9种蛋白酶对罗非鱼骨进行酶解,以水解度和钙螯合能力作为筛选条件,得到最佳的水解蛋白酶为动物蛋白酶,其水解度为24.01%,钙螯合能力为50.18μg/mg。同时,对动物蛋白酶酶解物(TBEH)进行氨基酸组成分析,结果表明,氨基酸总量为838.70 mg/g,其中甘氨酸的含量最高,达到131.08mg/g;必需氨基酸含量为182.04 mg/g,占总氨基酸含量的21.70%;疏水性氨基酸总量为324.22 mg/g,占总量的38.66%。2.通过制备型与半制备型反相高效液相色谱法对TBEH进行两步分离纯化,得到具有高钙螯合medicines policy能力的组分。利用高分辨质谱(UPLC-Q-Orbitrap-MS~2)鉴定分离组分中具有高钙螯合能力的多肽,分别为DGPSGPK(656.71 Da)、APEEHTP(IACS-10759供应商779.35 Da)和QSGPAGPR(768.40 Da),其螯合能力为111.98μg/mg、57.91μg/mg和114.31μg/mg。3.通过紫外光谱扫描(UV-VLY-188011细胞培养IS)、红外光谱扫描(FTIR)、X射线衍射分析(XRD)、电镜扫描(SEM)以及UPLC-Q-Orbitrap-MS~2对DGPSGPK、APEEHTP和QSGPAGPR与其钙螯合物的结构进行表征。UV-VIS,SEM与XRD结果显示,肽与钙螯合形成了新的化合物。FTIR与UPLC-Q-Orbitrap-MS~2的结果表明,多肽与钙的螯合位点主要存在于氨基N原子与羧基O原子。4.利用DGPSGPK、APEEHTP和QSGPAGPR与整合素1L5G和3VI4进行分子对接,三条肽与整合素之间形成了氢键和疏水作用,DGPSGPK显示较好的对接能力。建立RAW 264.7诱导分化破骨细胞以及MC3T3-E1细胞诱导成为成骨细胞模型,评估DGPSGPK的成骨活性。通过测定TRAP酶的酶活以及对TRAP酶进行染色可以看出DGPSGPK对于破骨细胞的分化具有显著的抑制作用,并成剂量依赖性增长,且具有统计学意义。建立以MC3T3-E1细胞,10 m M的甘油磷酸钠与50μg/ml的抗坏血酸进行诱导分化为成骨细胞的模型,使用不同剂量的DGPSGPK对成骨细胞的分化进行干预。以MTT实验测定DGPSGPK对MC3T3-E1细胞的促增殖作用,结果发现不同剂量的DGPSGPK对MC3T3-E1细胞均有促增殖效果,且当剂量为800μg/ml时,促增殖效果最好,在24h和48h的促增殖效果分别达到了142%和166%。随后测定了不同剂量的DGPSGPK对MC3T3-E1细胞分化为成骨细胞过程中的ALP酶酶活,并在第7天进行了染色。通过ALP活性测定和染色发现了DGPSGPK对MC3T3-E1细胞分化有着促进的作用。随后DGPSGPK对MC3T3-E1细胞分化为成骨细胞过程在21天时进行了茜素红染色实验,发现能够有效促进成骨细胞的矿化。

目的 研究白藜芦醇通过诱导自噬促进肥胖小鼠骨骼肌组织中纤连蛋白Ⅲ型结构域包含5 (FNDC5)降解的机制。方法 将6周龄雄性C57 BL/6小鼠随机分为标准饮食(SCD)组、高脂(HFD)组及高脂host-derived immunostimulant+白藜芦醇(HFD+RES)组,HFD+RES组在HFD的同时胃饲白藜芦醇(400 mg/kg·d),共持续20周。测定体重和血脂水平,HE染色、免疫组化、RT-PCR和WeCP-690550 NMRstern blot分析骨骼肌的病理学和相关分子表达变化。结果 HFD组小鼠体重增高,血脂水平升高;骨骼肌纤维间出现脂肪沉积;沉默信息调节因子(SIRT)-1、SIRT2、微管相关蛋白1轻链3(LC3)自噬效应蛋白(Beclin)-1、自噬相关蛋白(Atg) 7表达减少,跨膜蛋白Ⅲ型纤连蛋白结构域5(FNDC5)、选择性自噬接头蛋白(p62)表达增加。RES组可逆转HFD的效应,增加SIRT1、SIRT2和自噬相关基因的表达。结论 白藜芦醇可减少骨骼肌FNDwww.selleck.cn/products/gsk1120212-jtp-74057C5表达的效应,其机制可能与其增加SIRT1和SIRT2的表达,进而促进自噬和FNDC5的降解有关。

【目的】从天然产物库中筛选具有颉颃A型塞内卡病毒(SenecavSAGirus A,SVA)活性的天然产物并研究其颉颃作用机制。【方GSK2118436使用方法法】利用荧光素酶重组塞内卡病毒(rSVA-NLuc)与BHK-21细胞，结合荧光素酶高通量筛选技术，建立抗SVA药物体外筛选平台。从天然产物库中筛选浓度为10μmol/L时具有抑制荧光素酶活性效应的天然产物，并进一步利用实时荧光comprehensive medication management定量RT-PCR验证其抑制活性，通过细胞毒性试验确定其最大无毒浓度。选择病毒感染周期的吸附、入胞、复制、组装释放4个主要过程，利用实时荧光定量RT-PCR、50%组织细胞感染量(TCID_(50))测定等进行天然产物分子颉颃机制研究。【结果】从包含560种天然产物的分子库中筛选出16种候选抗SVA活性分子，通过实时荧光定量RT-PCR及细胞毒性检测，鉴定出4种安全、有效的天然产物，分别为20S-原人参三醇((20S)-protopanaxatriol)、蕈青霉素(paxilline)、方胆碱(fangchinoline)、竹红菌乙素(hypocrellin B)。作用机制研究显示，20S-原人参三醇能抑制SVA感染过程中的吸附、复制阶段；蕈青霉素在SVA的吸附、入胞、复制、组装释放阶段即整个病毒感染周期均发挥抑制作用；方胆碱能抑制SVA的入胞、复制；竹红菌乙素能抑制SVA的吸附、入胞、复制及组装释放阶段。【结论】本试验从天然产物库中筛选出了4种具有抗SVA活性的天然产物，这些化合物抗病毒效果良好，且作用机制各有不同。本研究为抗SVA药物的进一步研发提供重要参考。

鸭坦布苏病毒病是由坦布苏病毒（DTMUV）感染引起的一种可以引起蛋鸭产蛋率获悉更多严重下降、雏鸭Flavivirus infection出现神经症状甚至死亡的传染病。目前该病在免疫防控等方面取得了较大的研究进展，但是宿主与DTMUV感染之间的免疫机制还有待我们进一步研究。本研究应用DTMUV感染鸭胚成纤维细胞（DEF），利用荧光定量PCR（qPCR）检测抗病毒信号通路主要细胞因子（RIG-1、IRF-7、STAT1、IFN-α、IFN-β、IFN-γ）、主要组织相容性复合体（MHCI、MHCII）、白细胞介素（IL-1、IL-6、IL-8）、趋化炎性因子（CCL-4、CCL-5）和凋亡相关因子（Fas、BCL2、BCL2A、APAF-1、CASP7、BiD、MCL、FADD）mRNA转录水平。结果显示DTMUV感染DEF 12 h后，有少数细胞因子呈现轻微下调，但在感染24h后所测的21种细胞因子全部呈现上调，其中IRF7、IFN-β、MHCII、CCL4与对照组相比上调了4.81倍、14.58倍、3.24倍、4.68倍、11.73倍。对TMUV感染DEF后免疫相关因子mRNA转录水平此网站的变化分析发现，病毒感染DEF细胞 24h后，细胞产生明显的炎性反应，同时激活抗病毒信号通路、细胞凋亡通路，促进多种免疫相关因子的表达。该研究为DTMUV感染宿主致病机制与宿主抗病毒固有免疫反应的研究奠定了良好的基础。

布鲁菌感染可导致牲畜流产和不育，造成巨大的经济损失，也可导致人类的心内膜biologicals in asthma therapy炎、关节炎和骨髓炎，并可随其发展或慢性化而导致终身残疾。目前布鲁菌病selleckchem防控的重点是牧场净化，而牧场净化最迫切的需求是疫苗产品与配套的诊断试剂。因此，我们旨在建立一种间接ELISA方法来检测布鲁菌BP26蛋白的抗体，用于区分自然感染和疫苗免疫。通过优化抗原封装、血清作用、显色反应等条件，以纯化的rbp26蛋白为封装抗原，开发了一种间接ELISA，并对其敏感性、特异性、稳定性和符合率进行了研究。敏感性和特异性测试NSC 125973结果显示，阳性血清的最大稀释比为1：6400。而RM6和其他5种非布鲁菌病疫苗的血清均为阴性，无交叉反应，表明能够区分接种疫苗和自然感染的实验动物。批内和批间变异系数均小于10%，虎红平板凝集试验的临床符合率，阳性血清为97.7%(86/88)，阴性血清为95.3%(61/64)。结果表明，本试验建立的间接ELISA法具有良好的敏感性、特异性、重现性和重合率，可作为实验室开发试验试剂(LDTs)，监测牧场周围啮齿类动物的感染情况和评价RM6不同批疫苗的安全性和有效性，为布鲁双基因基因敲除疫苗株MB6 Δbp26ΔwboA(RM6)的应用奠定了物质基础。