achr抑制剂

目的 探究c-Jun氨基末端激酶(JNK)在促进氧糖剥夺(OGD)神经元存活中的作用及机制。方法 体外培养大鼠胎鼠大脑皮层原代神经元建立OGD神经元模型，通过CCK-8法筛选自噬特征时间点，进行JNK激活剂茴香霉素处理。将细胞随机分为空白组、茴香霉素处理组(神经元在OGD后，用茴香霉素处理5 h)、溶剂对照组(OGD神BLZ945生产商经元培养基中加入等量的溶剂二甲基亚砜)。Western blot法和免疫荧光细胞化学染色分别检测OGD神经元beclin 1、微管相关蛋白1轻链3(LC3)和B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2),胱天蛋白酶3(caspase-3)、 P62、泛素(ubiquitin)、组织蛋白酶B(cathepsin B)和溶酶体相关膜蛋白1(LAMP1)的蛋白表达量；CCK-8法检测神经biological implant细胞活性，利用IPP软件测量神经元轴突长度。结果 激活JNK可明显提高LC3、 beclin 1、 Bcl2的表达，并显著降低beclin 1-Bcl2复合物的含量及caspase-3、 P62、 ubiquitiMK-2206n的表达，而cathepsin B、 LAMP1的表达无明显变化。由此，通过激活JNK活性可显著提高OGD神经元存活。结论 激活JNK促进beclin 1-Bcl2解离，增强自噬，诱导大鼠OGD神经元凋亡向自噬转换，发挥神经元保护作用。

目的：探讨双氢青蒿素（DHA）对急性髓系白血病（AML获悉更多）的潜在治疗价值及其作用机制。方法：通过CCK-8检测细胞活力，明确DHA对AML细胞活力的影响；通过荧光探针染色及流式细胞术检测DHselleckA对AML细胞内氧化还原状态的影响；通过免疫印迹技术、腺病毒转染和激光共聚焦分析DBio-imaging applicationHA对细胞自噬水平的影响，并利用不同小分子抑制剂进行实验，进一步探究DHA诱导AML细胞死亡的可能机制。结果：DHA可抑制AML细胞株HL-60和Kasumi-1的活力，同时可显著提高细胞内氧化应激水平，经10μmol/L DHA处理后，HL-60细胞内活性氧含量可升至原来的2.6倍，Kasumi-1细胞内活性氧含量可升至原来的2.0倍。此外，DHA还可上调AML细胞内自噬相关蛋白的表达，增加胞内自噬流，激活自噬。进一步检测发现，自噬抑制剂可降低DHA诱导的细胞死亡，而且通过清除胞内自由基抑制氧化应激水平可抑制自噬的发生进而恢复细胞活力。结论：DHA可通过诱导氧化应激激活AML细胞发生自噬性死亡。

目的:探讨乳腺切除术后病人心理韧性水平及其危险因素。方法:选取2021年1月—2022年3月于医院行乳腺切除术治疗的72例乳腺癌病人为研究对象，术后采用心理韧性量表(RS)评估病人心理韧性情况，采用医院自行设计的基线资料调查问卷记录病人一般资料，比较不同特征的乳腺癌切除术后病人RS评分，分析可能影响乳腺切除术后病人心理韧性水平的危险因素。结果:72例乳腺切除术后病人RS评分5sexual medicine1～85(72.35±6.85)分；不同年龄段、文化程度寻找更多、家庭人均月收入、社会支持度的乳腺切除术后病人RS评分比较差异有统计学意义(P<0.05);经多元线性回归分析结果显示，年龄轻、文化程度低、家庭人均月收入低、社会支持度低是影响乳腺切除术后病人心理韧性水平的危险因素(P<0.05)。结论:乳腺切除术后ABT-263细胞培养病人心理韧性水平一般，可能受到年龄、文化程度低、家庭人均月收入低、社会支持度低等危险因素影响。

目的：探究血府逐瘀汤下调窖蛋白-1(Caveolin-1)抑制自噬改善大鼠脑出血（ICH）损伤的效应及机制。方法：将60只大鼠按随机数字表法分为空白组、假手术组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组，每组10只。采用自体股动脉血注入脑尾状核建立ICH大鼠模型。各给药组大鼠分别灌胃给予相应药物，空白组、模LGK-974使用方法型组、假手术组大鼠灌胃等体Medical disorder积生理盐水，1次/d，连续给药3周。观察各组大鼠状态，并行神经功能缺损评分。采集各组大鼠脑组织，HE染色观察脑组织结构的改变情况，免疫组织化学法检测LC3Ⅱ阳性表达，qPCR法检测Caveolin-1 mRNA相对表达量；Western blotting检测Caveolin-1、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR、Caspase-3、Bcl-2/Bax、Beclin-1蛋白表达情况。结果：假手术组大鼠上述指标与空白组比较，差异均无统计学意义（P>0.05）；与空白组比较，模型组大鼠神经功能缺损评分明显降低（P<0.05），脑组织血肿区域明显，神经元胞浆减少，核固缩，脑组织中Caveolin-1、Caspase-3、Beclin-1、LC3Ⅱ蛋白相对表达量及Caveolin-1 mRNA相对表达量均明显升高（P<0.05）,p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR、Bcl-2/Bax均明显降低（P<0.05）；与模型组比较，低、中、高剂量组大鼠神经功能缺损评分均明显SB431542升高（P<0.05），脑组织血肿区域缩小、坏死神经元数目减少，脑组织中Caveolin-1、Caspase-3、Beclin-1、LC3Ⅱ蛋白相对表达量及Caveolin-1 mRNA相对表达量均明显降低（P<0.05）,p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR、Bcl-2/Bax均明显升高（P<0.05）；中、高剂量组上述指标均优于低剂量组（P<0.05）。结论：血府逐瘀汤可下调Caveolin-1激活PI3K/Akt/mTOR通路抑制自噬，保护神经元而改善大鼠ICH损伤。

目的 探讨糖尿病（DM）患者并发视网膜病变（DR）的相关危险因素。方法 选择收治的糖尿病患者95例，评估患者DR发生情况，根据结果分为发生组与未发生组，设计基线资料调查表，详细统计两组基线资料并比较，重点分析糖尿病患者并发DR的危险因素。结果 经评估95例糖尿病患者中发生DR peptidoglycan biosynthesis39例，占41.05%；发生组与未发生组患者的糖尿病病程、胰岛素治疗史及糖化血红蛋白（HbA确认细节1c）、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、胱抑素C(Cys-C)水平比较，差异有统计学意义（P<0.05），组间其他资料比较，差异无统计学意义（P>0.05）；回归分析结果显示，糖尿病病程长、胰岛素治疗史及HbA1c、TNF-α、胱抑素C(Cyselleckchem GSK2118436s-C)水平高均是糖尿病患者并发DR的危险因素（OR<1,P<0.05）。结论 糖尿病患者并发DR的危险因素可能是胰岛素治疗史、糖尿病病程长及HbA1c和TNF-α水平高。

微生物来源的天然产物是一类具有多种生物活性的次级代谢产物,目前已成为药物及化学品的重要来源。微生物中负责生产调控天然产物的基因通常被压缩成几十到几百kb不等的大片段DNA,即这些基因组成几十到几百kb不等的生物合成基因簇(Biosynthetic gene clusters,BGC)。挖掘新颖结构的天然产物常见的一种策略便是准确高效克隆这些大型BGCs,进而实现其表达。常规的DNA克隆基于PCR分级扩增目的基因,随后利用DNA组装技术按照顺序组装。这类方法存在操作复杂、周期较长、效率低下、突变率高等问题。因此,亟需开发一款高效、准确、简易的大片段DNA克隆方法。CRISPR/Cas9系统仅需要Cas9核酸酶和工程sgRNA便可以高特异性靶向目的DNA。由于其高特异性和可编程性被广泛应用于基因编辑、细胞成像、医学治疗等各个领域。本研究以CRISPR/Cas9的高BI 10773小鼠特异性靶向切割能力为基础开发大片段DNA克隆技术,从而规避传统方法酶切位点限制问题。首先通过gRNA在线设计软件筛选高效率编辑靶点,缓解了部分位点靶向切割效率低下的问题,降低了脱靶效应,节省了筛选高切割效率靶点的时间;其次,本研究采用CRISPR/Cas9系统直接切割基因组DNA,从基因组中直接获取目BIOPEP-UWM database的DNA片段,从而避免PCR扩增限制以及突变等问题。利用酶解法处理细胞壁,并结合酚氯仿法抽提基因组DNA,该方法操作简单,获取的基因组完整度高,利于后续切割克隆及组装。本研究在大肠杆菌中采取了蓝白斑法进行克隆筛选并计算阳性率,通过设计双gRNA靶向切割分离基因组,然后利用NEBuilder一步式多片段无缝克隆方法进行质粒组装。我们首先选择一段15 kb含LacZ基因的DNA片段为目标,对CRISPR/Cas9介导的大片段DNA克隆涉及到的酶切体系、连接体系、同源臂长度等条件进行优化。结果表明,当体系中Cas9:gRNA:genome摩尔比例在5000:5000:1～10000:10000:1之间,且插入片段与载体DNA摩尔浓度为1:1时,克隆效率最高,接近100%。随后利用本方法逐次应用于30～100kb不同大小的DNA片段克隆:对50 kb以下大片段DNA克隆效率近100%,但当克隆DNA大于50 kb时,克隆效率迅速下降。尽管随着克隆DNA长度增加,克隆效率下降,但对77 kbIpatasertib分子量的大片段DNA克隆仍有46%的效率。链霉菌是微生物天然产物的重要来源,因此本研究也将该方法成功应用于天蓝色链霉菌,并以93%的阳性率成功克隆了40 kb天蓝色链霉菌基因组大片段。本研究基于CRISPR/Cas9系统,设计了体外靶向识别并切割基因组DNA体系,结合NEBuilder无缝克隆技术连接大片段DNA和载体,实现了快速高效地构建大分子重组质粒。本方法较其他大片段DNA克隆技术具有简便、可操作性高、效率高、周期短等特点。

目的 分析果胶泌在胃癌前病变患者治疗中的疗效，及其可能的作用机制。方法 选取2017年2月至2020年1月我院收治的胃癌前病变患者200例为研究对象，随机分为对照组和观察组，每组100例。两组患者均指导其建立健康的生活饮食习惯，并进行心理干预。对照组患者予以常规西医治疗，观察组患者在常规治疗基础上再予以果胶泌治疗。两组患者均连续治疗观察1个月为一疗程。对两组患者治疗前后采集血清检测胃泌素17、胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)和PGⅡ,辅助型T细胞1(Th1)/辅助型T细胞2(Th2)免疫细胞因子：白介素细胞-2(IL-2)、白介素细胞-4(IL-4)、白介素细胞-6(IL-6),并行组间比较。治疗一疗程后，对两组患者临床疗效进行评估，并行组间比较，收集两组患者治疗期间药物不良反应并比较。结果 (1)两组患者治疗前入组时胃泌素17、PGⅠ、PGⅡ组间比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗一疗程后Adavosertib细胞培养，两组患者上述指标均较治疗前下降，且观察组患者低于对照组患者(P<0.05);(2)两组患者入组时INF-γ、IL-2、IL-4、IL-6组间差异无统计学意义(P>0.05),治native immune response疗一疗程后，两组患者INF-γ较治疗前明显上升，且观察组高于对照组，IL-4、IL-6较治疗前明显下降，且观察组低于对照组(P<0.05);(3)观察组患者治疗一疗程后的临床总有效率高于对照组患者(P<0.05);(4)两组患者治疗期间未收到严重不良反应，一般不良反应率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 果胶泌联合常规治疗胃癌前病变患者可有效提升治疗疗效，其可能机制为改善了患者胃泌素及胃蛋白酶原、Th1/Th2平衡系统，且不增加患者药物不良IACS-10759反应，果胶泌联合西药是一种胃癌前病变较为有前途的治疗方案。

目的 基于网络药理学并结合大Gefitinib-based PROTAC 3化学结构鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(rat pheochromocytoma cell, PC12)分析地黄抗阿尔茨海默病(Alzheimer’sdisease,AD)的主要活性成分及作用机制。方法 查阅文献收集地黄的化学成分，经TCMSP筛选其主要活性成分，并构建“地黄-活性成分-潜在靶点”相互作用网络图和PPI图，通过DAVID数据库进行GO生物学过程富集和KEGG代谢通路富集分析，最后采用MTT法验neonatal infection证活性成分对PC12细胞的保护作用。结果 网络药理学分析预测出地黄主要活性成分15个，作用于AD的CP-456773小鼠相关靶点343个，涉及MAPK信号通路、代谢通路、胰岛素信号通路、PI3K-Akt信号通路等。PC12细胞实验结果表明，通过网络药理学筛选得到的地黄9个活性成分均能不同程度提高PC12细胞的存活率，其中胡萝卜苷、木犀草素、京尼平1-β-D龙胆双糖苷、芹菜素、蔗糖、棉子糖处理的PC12细胞存活率更高(P<0.05)。结论 地黄对AD的作用呈多成分、多靶点、多通路的调节机制，为地黄用于AD的干预和治疗提供参考。

目的:探讨血清微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3(Caspase-3)及高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在不同程度急性胰腺炎(AP)中的表达及意义。方法:选取AP患者135为病例组，根据病情严重程度又分为轻症急性胰腺炎(MAP)组、中度重症急性胰腺炎(MSAP)组以及重症急性胰腺炎(SAP)组三个亚组，每组45例。选取同期体检健康者135例为对照组。采用酶联免疫吸附法(ELISA)对血清LC3-Ⅱ、CLGX818aspase-3、HMGB1表达水平进行测定。采用急性生理学和慢性健康状况评估Ⅱ(APACHEⅡ)对病例组患者进行评估。比较病例组与对照组血清LC3-Ⅱ、Caspase-3、HMGB1表达水平。比较不同程度AP患者血清LC3-Ⅱ、Caspase-3、HMGB1表达水平及APACHEⅡ评分。采用Spearman法分析血清LC3-Ⅱ、Caspase-3、HMGB1与AP患者APACHEⅡ评分的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清LC3-Ⅱ、Caspase-3、HMGB1对AP的预测价值。结果:与对照组相比，病例组患者血清LC3-Ⅱ、Caspase-3、HMGB1表达水平明显升高(均P<0.05)。血清LC3-Ⅱselleck化学、Caspase-3、HMGB1表达水平及APACHEⅡ评分在不同程度AP患者中由高到低依次为SAP组、MSTimed Up and GoAP组、MAP组，各组间比较差异有统计学意义(均P<0.05)。血清LC3-Ⅱ、Caspase-3、HMGB1与AP患者APACHEⅡ评分呈正相关(r=0.704、0.642、0.723,均P<0.05)。血清LC3-Ⅱ、Caspase-3、HMGB1对AP具有良好的预测价值。结论:血清LC3-Ⅱ、Caspase-3、HMGB1水平在AP患者中升高，且与病情严重程度呈正相关，对AP具有良好的预测价值。

恶性肿瘤长久以来威胁着人类的健康，传统中药通关藤的茎和根以及其他部位已被广泛用于治疗恶性肿瘤、哮喘病、风湿病和气管炎等。近年越来越多的研究聚焦于通关藤的selleck激酶抑制剂抗肿瘤作用，由通关藤的提取物制成的消癌平制剂在临床上广泛用于治疗肝癌、肺癌、食道癌和胃癌等。至今为止，已从通关藤的各个部位提取鉴定出包括C21甾体皂苷、甾醇/环醇类、有机酸类、多糖类、三萜类、脂肪酸类、酯类等在内的几百种化学成分。C21甾体皂苷类为通关藤的首要特征和抗肿瘤活性成分。现代药理学研究证明通关藤在体内外均有抗肿瘤活性，主要体现在抗肝癌、肺癌、血液系统肿瘤、食管癌、胃癌、乳腺癌等。通关藤的单方制剂消癌平的常用剂型有片剂、糖浆、注射液、口服液、胶囊等，主要用于治疗肝癌、食道癌、非小细胞肺癌、胃癌、结Drug Screening肠癌、宫颈癌、乳腺癌和白血病等。通关藤及其制剂抗肿瘤作用的主要机制包括直接抗肿瘤作用，具体体现为抑制癌细胞增殖、调节肿瘤细胞血管生成、介导细胞凋亡、促进分化等，还包括对其他抗癌药物的增效减毒作用。主要综述通关藤抗肿瘤作用的主要成Y-27632化学结构分和作用机制的近年研究进展及现状，旨在为通关藤的应用开发以及抗肿瘤药物的研发提供参考。