饲料紧缺和饲料价格暴涨给水禽养殖业带来巨大影响。水禽饲料成本占总成本的60%-70%,提高饲料利用率能够间接降低我国禽养殖业的养殖成本,已成为鸭业的一个新的养殖目标。关于肉鸭饲料利用率国内外学者正处于组学分析以及生物信息学预测的阶段,但是并未对候选基因进行功能验证以及机制研究。因此,本研究旨在探究候选基因对肉鸭剩余采食量的影响及作用机制。选择500只雄性强英鸭作为试验材料,记录并计算21-42日龄肉鸭的生长性能和饲料效率,测定肉鸭的屠宰性能、肌内脂肪和血清脂质含量。检测42日龄肉鸭胸肌中RXRA表达量,排序,分为高RXRA表达量(HRXRA)、中RXRA表达量(MRXRA)、低RXRA(LRXRA)表达量组(n=25,P<0.05)。结果发现LRXRA组的平均日采食量(ADFI)、饲料转化率(FCR)和剩余采食量(RFI)显著低于MRXRA和HRXRA组(P<0此网站.05),而对生长性能和屠宰性能无显著影响。而LRXRA组血清中甘油三酯(TG)水平显著高于HRXRA组(P<0.05)。鸭的饲料效率可能受到脂质代谢的影响,因此本研究选择13胚龄的鸭胚分离、培养鸭的原代骨骼肌卫星细胞(CS2)。通过构建过表达和敲降RXRA基因的CS2细胞模型,利用RT–PCR和Western blotting检测与PPAR信号通路相关的基因和蛋白质的表达水平。采用Elisa试剂盒检测细胞内甘油三酯(TG)、胆固醇(CHOL)和非酯化游离脂肪酸(NEFA)的含量。脂肪含量用油红O染色进行可视化分析。使用双荧光素报告基因和染色质免疫沉淀(CHIP)来验证RXRA和候选靶基因之间的关系。气相-质谱联用分析细胞内脂肪酸含量差异。RNA-seq用于探索下游靶基因对CS2细胞脂质代谢的作用机制。结果表明:过表达RXRA后CS2内TG、CHOL、NEFA和脂滴的含量降低,CD36、ACSL1和PPARG基因的m RNA表达以及CD36和PPARG的蛋白表达上调。敲降RXRA后增加了CS2中TG、CHOL、NEFA和脂滴的含量,并下调了CD36、ACLS1、ELOVL6和PPARG的m RNA和蛋白表达。过表达RXRA基因,野生型CD36启动子的双荧光素酶报告基因活性高于突变型。RXRA在CD36的启动子区与-860/-852nt、-688/-680nt和-165/-157nt结合。此外,在CS2细胞中过表达CD36可抑制TG、CHOL、NEFA、脂滴和饱和脂肪酸(SFA)的含量。而敲低CD36的表达增加TG、CHOL、NEFA、脂滴、SFA和单不饱和脂肪酸(MUFA)的含量。CD36主要通过膦酸盐和次膦酸盐代谢、脂肪酸代谢和物质代谢加速CS2中脂肪酸的外流。为探究候选基因是否可作为鸭饲料效率育种的分子标记,本研究提取243只强英鸭血液全基因组DNA,通过直接测序和酶切方法,分析RXR此网站A和CD36基因单核苷酸多态性与肉鸭生长和饲料性状之间的关系。结果在RXRA基因编码区检测到4个SNPs,在非编码区发现8个SNPs。其中g.5,952,703 C>T和g.5,952,667 C>T的氨基酸发生了变化。g.5,952,667与ADFI、RFI和FCR相关。在CD36非编码区检测到1个SNP(g.11,233,114 T>G)。该位点与肉鸭生长性能和饲料效率无显著相关。为验证RXRA通过靶向CD36的表达调控肉鸭饲料delayed antiviral immune response效率,检测42日龄肉鸭胸肌中CD36的表达量并排序,分为高CD36表达量(HCD36)、中CD36表达量(MCD36)、低CD36表达量(LCD36)三组(n=25,P<0.05)。测定肉鸭的胸肌中RXRA基因表达量、生长性能、饲料效率、屠宰性能、肌内脂肪和血清脂质含量。结果发现HCD36组RXRA基因表达量、ADFI、FCR、RFI显著高于MCD36组和LCD36组(P<0.05)。与HCD36和MCD36组相比LCD36组的腹脂和血清中低密度脂蛋白(LDL)含量显著降低,肌内脂肪含量显著增加(P<0.05)。肉鸭的ADFI,RFI,FCR受到胸肌中RXRA基因的影响,且RXRA基因表达量与胸肌内脂肪以及血清脂质水平显著相关。在鸭骨骼肌卫星细胞中,RXRA通过促进CD36的表达,抑制了骨骼肌细胞内的累积,CD36通过脂肪酸代谢、脂肪酸延伸和细胞外流等途径加速脂肪酸的代谢。RXRA的SNPs与肉鸭ADFI、RFI和FCR相关。RXRA通过促进CD36的表达抑制肉鸭胸肌中脂肪累积影响其饲料效率。本研究为阐明了候选基因对肉鸭饲料效率的影响及作用机制,为培育高饲料利用率肉鸭提供理论基础。